姜黄素与STI571联合及序贯给药对K562细胞增殖的影响

目的 研究姜黄素(Cur)与STI571联合应用对慢性粒细胞白血病(CML)细胞株K562增殖的影响,探索两药序贯给药的不同效果. 方法 锥虫蓝排染计数计算K562细胞增殖抑制率;显微镜下观察Cur与STI571联合应用对K562细胞的细胞毒作用;锥虫蓝排染法检测药物序贯给药的不同效果;金氏公式评价两药的协同效果. 结果 Cur与STI571单独作用均抑制K562细胞的增殖,二者联合应用呈协同作用(Q＞1.15);显微镜下可见0.4 μmol/L STI571与 5 μmol/L Cur联合应用对K562细胞毒作用强于单独应用;先给予STI571作用24 h,再给予Cur作用24 h,对K562细胞的抑制呈协同作用(Q＞1.15),而先给予Cur作用24 h,再给予STI571作用24 h,则呈单独相加或拮抗作用(Q＜1.15). 结论 Cur与不同浓度的STI571(0.1～0.4 μmol/L)联合应用可协同抑制K562细胞增殖;联合应用STI571和Cur时,先给予STI571再给予Cur比先给予Cur再给予STI571协同效果好.     

白血病患者血清触珠蛋白水平测定及临床意义

触珠蛋白(Haptoglobin,Hp)属血清α_2-球蛋白区中糖蛋白成分,由肝脏合成.Hp 与血红蛋白(Hb)结合形成稳定的复合物,因后者分子量大,不能通过肾小球滤膜而经尿液排出,从而防止血红蛋白的流失.Hp 也是一种急性相蛋白,当机体受到某些病理因子攻击时而有明显变化.因此血清Hp 水平测定对     

CD44抗体HI44a对急性髓系白血病细胞株HL-60细胞体外增殖、分化作用的研究

目的探讨CD44抗体HI44a对急性髓系白血病细胞株HL-60细胞增殖、分化的作用机制。方法以急性髓系白血病细胞株HL-60为研究对象,以ATRA为阳性对照,以同型抗体IgG2a为阴性对照,以HI44a作为实验组,应用台盼蓝拒染法检测HI44a对HL-60细胞增殖的影响,瑞氏染色法及流式细胞学检测HI44a对HL-60细胞分化的影响,RT-PCR方法检测HI44a处理HL-60细胞前后TGFβ1和TGFβR1基因表达变化,应用荧光定量RT-PCR法检测HI44a处理HL-60细胞前后髓系分化相关的细胞因子及受体信号通路(GM-CSFRα、OPN)基因表达变化,以及DNA序列分析法检测HI44a处理HL-60细胞前后OPN异构体表达改变。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测实验组与对照组培养上清液的OPN水平。结果经HI44a作用后,HL-60细胞增殖受抑;细胞形态变化表现为体积变大,核固缩,核浆比例降低,核仁减少,出现核分叶等特征;细胞表面分化抗原CD15表达上调;HL-60细胞的GM-CSFRα及TGFβ1 mRNA表达水平增高,而OPN mRNA表达水平降低,TGFβR1 mR-NA表达水平无变化;OPN序列分析结果表明HI44a作用后OPN的3种异构体的组成发生改变,HI44a处理后的OPN水平明显下降。结论 CD44抗体HI44a通过上调GM-CSFRα、TGFβ1及下调OPN mRNA表达水平,减少OPN的分泌,抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞分化。     

白血病细胞TGFβ1及其受体基因表达与白血病患者血清TGFβ …

目的：研究转化生长因子β（ＴＧＦβ１）对白血病细胞增殖抑制作用的机制及急性白血病患者血清ＴＧＦβ１变化及意义。方法：应用逆转录－聚合酶链反应方法检测白血病细胞的细胞因子及其受体基因表达；应用白血病细胞集落试验测定ＴＧＦβ１对ＨＬ－６０、ＤＡＭＩ、Ｋ５６２细胞增殖作用；应用ＥＬＩＳＡ方法测定３３例急性白血病患者血清ＴＧＦβ１水平。结果：ＴＧＦβ１对ＨＬ－６０、Ｋ５６２、ＤＡＭＩ细胞增殖具有明显的抑制     

白细胞介素3竞争性逆转录-聚合酶链反应方法的建立及初步应用

传统的逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术难以对待测样品中ｍＲＮＡ进行定量分析。为克服ＲＴＰＣＲ的这种不足,９０年代初Ｇｉｌｉａｎｄ等建立了竞争ＰＣＲ（ｃｏｍｐｅｔｉｔｉｖｅＰＣＲ）方法［１］,从而使得快速、敏感地定量研究ｍＲＮＡ成为可能。关于...     

p53基因诱导白血病细胞凋亡的机制研究

目的：探讨p53基因诱导白血病细胞凋亡过程中内源性TGF-β1、TNF-α、端粒酶活性、Bcl-2表达的改变及其意义。方法：利用脂质体将温敏型p53基因[pN53cG(Val135)]导入p53基因缺失的白血病细胞系HL-60、K562细胞，经G418筛选，获得稳定表达p53蛋白的抗性克隆细胞HL-60pN53cG，K562-pN53cG细胞。采用缺口末端标记法、片段化DNA分析、RT-PCR、定量PCR、ELISA、PCR-ELISA、流式细胞术等方法检测外源性p53基因诱导白血病细胞凋亡过程中TGF-β1、TNF-α、bcl-2、端粒酶反转录酶(hTERT)mRNA表达变化、细胞上清TGF-β1水平和端粒酶活性及。TGF-β1、TNF-α反义PS-ODNS对白血病细胞凋亡和Bcl-2蛋白表达的影响。结果:①外源性野生型p53基因诱导细胞凋亡过程中内源性。TGF-β1和TNF-α mRNA表达上调，bcl-2及hTERT mRNA表达下调，细胞培养上清TGF-β1蛋白水平明显升高，端粒酶活性水平下降；②TGF-β1、TNF-α反义PS-ODNS能够明显抑制野生型p53基因诱导细胞凋亡的发生，并使细胞bcl-2 mRNA及蛋白表达恢复到处理前的水平。结论：p53基因诱导白血病细胞凋亡可通过上调内源性TGF-β1和TNF-α水平，下调hTERT mRNA表达及端粒酶活性，抑制bcl-2基因表达而发挥作用。     

姜黄素对白血病细胞的细胞周期阻断与细胞周期蛋白的关系

目的研究姜黄素（Cur）对K562细胞和HL-60细胞的细胞周期阻断与细胞周期蛋白的关系。方法用流式细胞光度术对K562细胞和HL-60细胞进行细胞周期检测,用蛋白免疫印迹检测细胞周期蛋白水平。结果姜黄素0—10mg／L作用24h可将K562细胞和HL-60细胞阻滞于G0／G1期,该期细胞比例增加;阻断细胞从S期向G2／M期转化,G2／M期细胞比例减少;姜黄素作用24h减少K562细胞和HL-60细胞Cyclin D1、Cyclin B1的蛋白水平,但几乎不影响K562细胞和HL-60细胞Cyclin A的蛋白水平。结论姜黄素扰乱K562细胞和HL-60细胞的细胞周期进程与Cyclin D1和Cyclin B1的蛋白水平减少有一定关系。     

DNA电化学传感器在白血病基因诊断中的应用

DNA电化学传感器技术是20世纪末发展起来的一种新型生物传感器技术，为基因识别和疾病基NN断提供了一种快速、简便、廉价的方法，现已成为一个非常活跃的研究领域。目前DNA电化学传感器的研究已经取得很大的进展，但同时也面临很多困难和挑战。本文就DNA电化学传感器的设计、研究现状和近几年来该领域的一些重要进展作一总结，并对研制用于白血病融合基因检测和诊断的DNA电化学传感器作了展望。     

G-CSFR Ⅳ型异构体在成年急性髓系白血病的表达及其临床意义

本研究旨在探讨G-CSFRⅣ型异构体在成年急性白血病患者中的表达及其临床意义.以19例正常骨髓造血干细胞为对照,利用定量RT-PCR检测正常对照、99例成年AML和34例ALL患者的G-CSFR Ⅳ/G-CSFR Ⅰ型异构体的相对表达水平,并对其中84例AML（非M3）患者的临床特征及化疗效果进行分析.结果表明,G-CS-FR Ⅳ/G-CSFR Ⅰ相对表达水平在AML患者较ALL患者及正常造血干细胞组高,而G-CSFR Ⅳ/G-CSFR Ⅰ的相对表达水平在ALL患者组与正常造血干细胞组差别无统计学意义.AML（非M3）患者的临床特征及疗效分析显示,G-CSFR Ⅳ/G-CSFR Ⅱ相对高表达的患者比低表达的患者的临床CR率低.G-CSFR Ⅳ/G-CSFR Ⅱ相对表达水平与AML（非M3）患者的性别、年龄、幼稚细胞比例、FAB分型、染色体和融合基因所作的危险分层之间无相关性.结论：G-CSFRⅣ异构体异常高表达与急性髓系白血病预后差相关.     

白血病细胞TGF-β1含量减少及外源性TGF-β1基因对HL-60细胞的作用

目的：研究白血病细胞是否存在转化生长因子β1（TGF-β1）量的异常以及这种异常在白血病发病机制中的可能作用。 方法： 应用ELISA法检测白血病细胞株和原代白血病细胞培养上清TGF-β1水平，进一步应用脂质体介导基因转移法将TGF-β1基因转染HL-60细胞，采用有限稀释法及G418筛选得到抗性细胞，应用RT-PCR、白血病细胞集落培养、裸鼠移植瘤成瘤试验、片段化DNA分析、流式细胞术检测HL-60细胞内TGF-β1、bcl-2、端粒酶反转录酶（hTERT）mRNA的表达变化等方法了解外源性TGF-β1基因对HL-60细胞体内外增殖、凋亡的影响。 结果： 白血病细胞株和原代白血病细胞培养上清TGF-β1水平明显低于正常对照组(P<0.01)，转染TGF-β1基因后，HL-60细胞内TGF-β1 mRNA表达上调，bcl-2、hTERT mRNA表达下调，细胞体外增殖受抑制，集落形成抑制率达78.3%，裸鼠移植瘤生长受抑制，荷瘤鼠生存期延长，细胞呈现凋亡特征性的梯形条带，凋亡比例达73.4%。 结论： 内源性TGF-β1水平降低是白血病的发病机制之一,外源性TGF-β1基因能够抑制HL-60细胞增殖，诱导细胞凋亡,该基因通过下调bcl-2、hTERT mRNA的表达而发挥作用。