NMBzA对猴食管上皮癌基因和多种抑癌基因的作用

应用ＰＣＲ扩增和直接测序方法，分析致癌物甲基苄基亚硝胺（ＮＭＢｚＡ）对猴食管上皮细胞中癌基因Ｈａ－ｒａｓ和多种抑癌基因ｐ５３、Ｒｂ、ＡＰＣ的作用。结果未发现Ｈａ－ｒａｓ第１２密码子突变；给猴灌喂食管上皮ＮＭＢｚＡ２４和４８ｈ，食管上皮有ｐ５３基因突变指纹；灌喂ＮＭＢｚＡ４８ｈ，存在Ｒｂ与ＡＰＣ基因突变指纹；灌喂ＮＭＢｚＡ第５天的猴食管上皮细胞中，ｐ５３、Ｒｂ、ＡＰＣ基因突变指纹消失。实验证实：化学致癌物ＮＭＢｚＡ能引起多种抑癌基因改变，ＮＭＢｚＡ对细胞中抑癌基因的遗传性突变影响可能需要多次作用。这些基因突变指纹与过去报道的部分原发性食管癌中的ｐ５３、Ｒｂ和ＡＰＣＮＭＢｚＡ突变相同。     

食管癌相关基因1在甲醇酵母中的表达与纯化

目的为获得食管癌相关基因1(ECRG1)编码的活性蛋白,利用甲醇酵母系统表达ECRG1。方法将本研究室构建的PCDNA6-HA-ECRG1重组到分泌表达载体pPIC9k中,然后转入酵母GS115,通过G418筛选,在甲醇的诱导下,获得表达的蛋白。结果成功构建了分泌表达重组体pPIC9k-ECRG1,并转入了GS115,筛到抗2.5mg/ml G418的重组菌株,在甲醇的诱导下,ECRG1蛋白得到了分泌表达,发酵培养获得的融合蛋白经镍离子亲和层析,得到纯度80%左右的蛋白。结论用酵母表达系统得到了活性蛋白,可用于进一步的生物功能及作用机理的研究,也为今后研究基因-蛋白的功能与结构,提供了分离和纯化蛋白的重要方法。     

实验性胃癌的研究概况

 胃癌是我国城乡常见的恶性肿瘤之一,约占恶性肿瘤的第二～三位;在某些地区,胃癌占恶性肿瘤的首位,严重威胁着劳动人民的生命健康,直接影响社会主义革命和建设。近几年来,我国对胃癌的防治进行了大量的研究工作,为胃癌的防治研究工作提供了很多的宝贵经验。为了进一步验证病因调查中所发现的可疑因素与促癌因素。以及阐明其作用机理，需要一个简便而诱癌率高的胃癌动物模型;此外，实验性胃癌的研究，还可以为胃癌的实验治疗，药物的定向筛选，以及癌变理论的研究，提供理想的动物模型，因此，实验性胃癌的研究，在胃癌的防治研究工作中具有重要意义。