DNA甲基转移酶3B4过表达与肾透明细胞癌的关系

  目的  探究DNA甲基转移酶（DNA methyltransferase,DNMT）在肾透明细胞癌（clear cell renal cell carcinoma,ccRCC）发生发展中的机制。  方法  收集2012年1月至12月15例内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院术前均未结予放化疗并行肾癌根治术患者的组织标本,均经病理证实为ccRCC。应用实时定量PCR、蛋白印迹、联合亚硫酸氢钠限制酶分析法和甲基化特异PCR等方法检测ccRCC组织中DNMT的mRNA表达,及ccRCC组织中整体甲基化（global methylation）水平和抑癌基因RASSF1A甲基化和表达水平。  结果  ccRCC组织中DNMT3B4的mRNA表达增加,同时其蛋白含量也相应增加。ccRCC患者癌组织中DNA重复序列Alu的甲基化水平0.106±0.04较癌旁组织中0.115±0.03低,差异具有统计学意义（P < 0.05）。而肿瘤抑制基因RASSF1A启动子区域发生高甲基化,其mRNA和蛋白的表达均降低。  结论  DNMT3B4基因过表达可能与染色体不稳定以及RASSF1A基因低表达有关,在ccRCC的发生发展中可能扮演着重要的角色。      

结直肠腺瘤中DNMT3B表达及RASSF1A甲基化分析

目的探讨DNA甲基转移酶的表达及抑癌基因RASSF1A的甲基化及两者表达与较大结直肠腺瘤(colorectal adenoma,CA)的关系。方法选取20对直径≥10 mm的CA患者组织及对应瘤旁组织作为对照,分别使用Real-time PCR和Western blot技术检测DNMT1、DNMT3A和DNMT3B mRNA和蛋白表达变化,应用亚硫酸氢盐限制性酶切分析(COBRA)技术分析重复序列LINE-1甲基化水平,应用甲基化特异性PCR(MS-PCR)技术分析抑癌基因RASSF1A的甲基化水平。结果与对照组相比,CA中DNMT3B的mRNA和蛋白水平升高,DNMT3B的活性显著升高。CA组织中LINE-1甲基化水平降低,肿瘤抑制基因RASSF1A的启动子甲基化水平升高,且表达降低。结论 DNMT3B过表达可能在CA的发生、发展中起重要作用,具体机制可能与降低整体甲基化水平和升高抑癌基因RASSF1A甲基化水平有关。     

创新性实验在本科生实验课程中的应用

目的：探索医学细胞生物学创新性实验方法及培养学生的创新思维和动手能力。方法：在实验课程中,学生用10个X射线剂量照射小鼠,检测小鼠嗜多染细胞和外周血红细胞的微核率,通过查阅文献、骨髓提取、制片、实验记录与报告书写等步骤完成相应的研究工作。结果：学生掌握了文献查阅及综述撰写、小鼠嗜多染细胞和外周血红细胞的微核的测定方法、评价X射线的剂量与效应的关系、分析嗜多染细胞与红细胞微核率差异的意义及正确书写实验报告。结论：把创新性实验应用于实验课堂教学,提高了学生学习兴趣和参与科学研究的积极性,锻炼了学生的独立动手能力,提高了实验教学质量。     

钒化钠对小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞株增殖影响的研究

目的探讨不同浓度钒化钠(sodium vanadate,SV)对小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞株增殖作用的影响。方法将培养的NIH3T3细胞给予不同浓度及时间的SV刺激,以噻唑蓝(MTT)比色法检测小鼠成纤维NIH3T3细胞增殖及增殖抑制情况。结果与对照组比较,0.1μM对细胞增殖无影响(P>0.05);1.0、5.0、10.0μM SV可以促进细胞增殖,而200μM SV抑制其增殖(P<0.01),不同处理时间变化趋势一致;100μM SV对细胞作用随处理时间不同而不同。结论SV对NIH3T3细胞增殖作用因处理剂量和时间不同而呈现差异。     

钒化钠对人食管癌细胞系EC109 p-ERK1/2蛋白表达的影响

钒的药理作用报道最多的是它的降血糖作用[1].Ray等[2]研究显示,钒化钠可以通过促进乳腺癌MCF7细胞凋亡而抑制其增殖,显示了钒化钠作为有效的化疗制剂的潜能.我们前期研究显示,一定浓度的钒化钠能明显抑制食管癌细胞系EC109细胞株的生长,钒化钠的抗肿瘤机制可能与cyclin D1蛋白表达降低有关[3].本研究进一步揭示钒化钠抗肿瘤作用的分子机制,为钒化钠进一步发展成一种新型的抗肿瘤药物提供理论依据.     

蛋白磷酸酶－1在能量代谢作用中的研究进展

蛋白质的磷酸化和去磷酸化是真核生物体内基本的调控机制,蛋白磷酸酶的去磷酸化作用在调控细胞生命过程中起了重要的作用。蛋白磷酸酶－1（protein serine／threonine phosphatase－1,PP1）是一种在能量代谢过程中处于关键位置的蛋白磷酸酶,研究表明80％以上蛋白质的去磷酸化反应是由PP1和PP2A行使的。本文就PP1的结构、分布以及与代谢相关的功能等内容进行论述。     

钒化钠对人食管癌细胞系EC109细胞株增殖影响的研究

目的：探讨不同浓度钒化钠对食管癌细胞系EC109增殖作用的影响。方法：将培养的食管癌细胞系EC109给予不同浓度及时间的钒化钠刺激,以噻唑蓝（MTT）比色法检测食管癌细胞系EC109增殖及增殖抑制情况。结果：一定浓度的钒化钠对食管癌细胞系EC109有生长抑制作用。结论：一定浓度的钒化钠能明显抑制食管癌细胞系EC109细胞株的生长。     

DNA甲基化和肾癌关系的研究进展

DNA的异常甲基化导致基因表达沉默,在肾癌的发生发展中起着重要作用。表观遗传学改变与肿瘤的发生有着必然联系。研究发现抑癌基因启动子的甲基化如RASSF1A、VHL的失活,最终导致癌症的发生。去甲基化药物、RNA干扰技术以及微小RNA被广泛用于肾癌的早期诊断以及靶向治疗,已经成为治疗肾癌的有效手段。     

钒化钠对人食管癌细胞系EC109 ERK1／2胞内信号转导的影响

目的：探讨钒化钠对人食管癌细胞系EC109 MAPK信号通路中ERK1／2表达的影响。方法：用半定量Western--blot方法检测ERK1／2蛋白的表达水平。结果：一定浓度的钒化钠对食管癌细胞系EC109 MAPK信号通路中ERK1／2表达有抑制作用。结论：一定浓度的钒化钠能明显抑制食管癌细胞系EC109细胞株的生长，钒化钠的抗肿瘤机制可能与ERK1／2蛋白表达水平降低有关。