电针不同穴位对高血压模型大鼠血压的影响

目的:观察针刺高血压大鼠不同穴位的降压效果,研究单穴降压的穴位特异性。方法:采用二肾一夹法造成高血压大鼠模型,随机分为偏历、合谷、曲池、阳池、消泺、外关共6组,分别行电针治疗20min,记录造模前、造模后(治疗前)、治疗后0min、10min、20min的血压,进行组间比较。结果:曲池、合谷在电针治疗后即刻血压与治疗前血压相比有显著性变化(P<0.05,P<0.01),并与阳池穴在治疗后10~20min使血压下降趋于稳定(P<0.05,P<0.01)。偏历、消泺、外关三穴降压效果不明显(P>0.05)。结论:曲池、合谷、阳池单穴降压作用具有相对特异性。     

不同核酸提取法对HCMV-DNA准确定量的影响

目的 评价不同核酸提取法对人巨细胞病毒核酸(HCMV-DNA) 荧光定量PCR准确定量的影响.方法 含HCMV AD169株病毒颗粒的病毒培养物,以不同浓度分别与10份健康人HCMV-DNA阴性血浆标本混合;另取15份临床移植患者HCMVpp65抗原血症阳性血浆样本,上述2种标本分别用碱裂解吸附法、沉淀煮沸裂解法和酚-氯仿抽提法提取病毒核酸模板,随后运用荧光定量聚合酶链反应对样本进行定量分析,并作评价.结果 15例临床检测阳性血浆标本中,酚-氯仿法提取效率为最高(P＜0.05),换算后其相对提取效率为100%,而沉淀煮沸裂解法为90%,碱裂解吸附法为65%;此外,沉淀煮沸裂解法和酚-氯仿法的重复性均好于碱裂解吸附法,变异系数(CV)值分别为0.26、0.30和0.39.结论 经典、传统的酚-氯仿抽提法仍不失为实验室首选的核酸提取方法.     

miR-613靶向PTBP1抑制子宫内膜癌细胞侵袭和迁移的实验研究

  目的  探讨微RNA-613(miR-613)靶向多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对子宫内膜癌细胞(Ishikawa)增殖、迁移及侵袭的影响。  方法  采用RT-qPCR法检测子宫内膜癌组织miR-613及PTBP1 mRNA表达;体外培养Ishikawa细胞并对Ishikawa细胞进行干预,过表达miR-613、抑制PTBP1表达或共同过表达miR-613与PTBP1,分别检测Ishikawa细胞增殖、迁移与侵袭及PTBP1、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达情况;双荧光素酶报告实验验证miR-613与PTBP1的靶向关系。  结果  子宫内膜癌组织中miR-613表达水平为0.48±0.09,显著低于癌旁组织的1.03±0.11(P＜0.05),PTBP1 mRNA表达水平为2.78±0.23,显著高于癌旁组织的1.01±0.12(P＜0.05),miR-613与PTBP1 mRNA呈负相关关系(r=-0.523,P＜0.05);双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-613靶向负调控PTBP1表达;过表达miR-613与抑制PTBP1表达,Ishikawa细胞存活率、细胞迁移与侵袭数、PTBP1、MMP-2及MMP-9表达水平显著降低(均P＜0.05);过表达PTBP1逆转过表达miR-613对Ishikawa细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用。  结论  miR-613在子宫内膜癌组织中低表达,过表达miR-613可通过靶向抑制PTBP1表达,抑制人子宫内膜癌细胞的增殖、迁移及侵袭。      

血吸虫成虫排泄分泌抗原的组成及免疫反应性分析

目的分析日本血吸虫成虫排泄分泌抗原的组成及其与血吸虫感染兔疗前、疗后配对血清的免疫反应特征。方法采用7cm（pH5～8）的IPG和12%SDS-PAGE对血吸虫成虫排泄分泌抗原的组成进行双向凝胶电泳分析,并用免疫印迹试验检测排泄分泌抗原各蛋白点与疗前、疗后血清的反应性;采用PDQuest8.0图像分析软件对二维图像斑点进行分析,寻找差异反应蛋白点。结果血吸虫成虫排泄分泌抗原双向凝胶电泳图谱主要由215个蛋白斑点组成,其中16个斑点大、染色深,可能为高丰度的循环抗原;免疫印迹显示可被感染6周兔血清识别,但不能被治疗12周兔血清识别的蛋白斑点有84个,与感染6周兔血清的反应强度比与治疗12周兔血清的反应强度高2倍的蛋白点有38个。结论血吸虫成虫排泄分泌抗原中存在高丰度的能被短程抗体识别的抗原分子。     

日本血吸虫信号传导蛋白14-3-3的制备及其特性分析

目的制备可溶性重组日本血吸虫信号传导蛋白14-3-3（rSj14-3-3）,并研究其免疫学特性。方法采用反转录聚合酶链反应方法从日本血吸虫成虫mRNA中制备Sj14-3-3基因cDNA片段,将此cDNA片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-3的谷胱甘肽还原酶的基因下游,构建重组表达质粒Sj14-3-3/pGEX-4T-3。重组质粒转化大肠埃希菌BL21,转化子细菌采用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）进行诱导,表达产物经SDS-PAGE以观察重组GST-Sj14-3-3表达情况。GST-rSj14-3-3经凝血酶消化后,经过Glutathione Sepharose-4B胶亲和层析制备纯化的rSj14-3-3。rSj14-3-3免疫家兔制备免疫兔血清,经免疫印迹试验分析rSj14-3-3免疫原性和反应性。结果日本血吸虫江苏株Sj14-3-3蛋白基因编码序列被成功克隆,开放阅读框的DNA序列与基因库中的登录序列同源性为99.08%。构建的含Sj14-3-3蛋白基因的重组表达质粒经IPTG诱导能表达分子量约为55 kDa的融合蛋白,融合蛋白经凝血酶切割和亲和层析获得纯化的rSj14-3-3。rSj14-3-3能诱导家兔产生高效价的特异性抗体,该抗体可识别重组和天然的14-3-3蛋白。结论本研究成功制备了可溶性rSj14-3-3,其具有良好的免疫原性与反应性。     

存活7年以上肾移植患者环孢素A血药浓度监测资料分析

目的:为临床安全、合理应用环孢素A(CsA)提供参考。方法:采用荧光偏振免疫法测定91例存活7年以上肾移植患者2291例/次的CsA血药浓度,分析术后时间、性别、年龄等因素与CsA血药浓度的关系。结果:CsA血药浓度随术后时间的延长而逐渐下降,且个体差异大;男性、女性2组CsA血药浓度差异无统计学意义(P>0.05);与中、青年组比较,老年组患者的血药浓度在同一时间段内差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:监测CsA血药浓度,可防止免疫过度、不足和药物毒性,从而提高移植肾的长期存活率。     

反相高效液相色谱法测定人血清中盐酸二甲双胍浓度

目的建立人血清中盐酸二甲双胍血药浓度的测定方法。方法采用D iam onsil C18(250×4.6mm,5μm)色谱柱,以乙腈∶水(含3mm ol.L-1十二烷基磺酸钠、0.5%三乙胺,用磷酸调至pH=3.89)(27.5∶72.5,V∶V)为流动相,流速:0.8mL.m in-1,紫外检测波长:233.50nm,柱温:30℃。结果盐酸二甲双胍在0.05~4.00μg.mL-1范围内线性关系良好(r=0.99945,n=6)。日内RSD<6.34%,日间RSD<6.82%(n=5),平均回收率>96.66%。结论本方法操作简便,准确,重现性好。     

杭州市孕妇弓形虫和弓首线虫感染的血清学调查

目的　了解杭州市孕妇弓形虫和弓首线虫感染情况,为降低出生缺陷、提高出生人口素质提供基础数据。方法　以2018年2月至2019年12月在杭州市余杭区第一人民医院妇产科接受产前诊断的235例孕妇作为观察组,以同期在该院体检中心接受健康体检且年龄相仿的235例健康未怀孕女性作为对照组,通过医院管理信息系统收集两组病历资料。采集两组研究对象血液样本,采用酶联免疫吸附试验检测血清抗弓形虫和抗弓首线虫IgG抗体,比较两组抗体检出情况。结果　观察组年龄23～31岁,平均年龄（26.5 ± 4.3）岁,孕龄10～27周;对照组年龄20～30岁,平均年龄（26.1 ± 5.7）岁。观察组血清抗弓形虫IgG抗体阳性率（28.51% vs. 4.68%;[χ2] = 34.85,P < 0.01）、抗弓首线虫IgG抗体阳性率（24.26% vs. 5.11%;[χ2] = 25.77,P < 0.01）均显著高于对照组。此外,观察组抗弓形虫和抗弓首线虫IgG抗体双阳性检出率亦显著高于健康对照组（13.19% vs. 2.13;[χ2] = 17.49,P < 0.01）。结论　杭州市孕妇弓形虫、弓首线虫感染血清学阳性率及两者合并感染率均较高,应加强孕期弓形虫和弓首线虫感染筛查。     

1例念珠菌血症并行连续性肾脏替代治疗患者的抗感染治疗分析

目的 为临床念珠菌血症并行连续性肾脏替代治疗(continuous renal replacement therapy,CRRT)患者的抗感染治疗提供参考依据。方法 临床药师参与患者抗感染药物的方案选择、剂量确定,监护疗效与不良反应。结果 抗感染治疗效果理想,患者成功从ICU转回原病房。结论 临床药师参与药物治疗过程,对危重患者实施药学监护,能提高药物治疗的效果。     

电针曲池穴对二肾一夹高血压大鼠血压和颈总动脉血管重构的影响

目的和方法:观察电针曲池穴对二肾一夹高血压大鼠(2K1C-RHR)血压和颈总动脉血管重构的作用。结果:电针组治疗后血压明显降低,与治疗前及模型对照组比较有显著性差异;模型对照组大鼠颈总动脉存在着明显的血管重构现象,电针组治疗后对其血管重构现象具有一定的抑制作用,电针组和模型对照组比较有显著性差异。结论:电针曲池穴可抑制二肾一夹高血压大鼠血压的升高,对其颈总动脉的血管重构具有一定的防治作用。