环氧合酶-1和前列腺素E2在多潘立酮对大鼠胃黏膜保护中的作用

目的　研究多潘立酮对大鼠胃黏膜损伤是否具有保护作用 ,并探讨胃黏膜细胞中环氧合酶 1(COX 1)及前列腺素 (PG)E2是否参与其中。方法　研究分为对照组和实验组。后者分别用多潘立酮 0 .5mg/kg、1mg/kg和 2mg/kg灌胃 ,3次 /d ,连续 3d。各组大鼠灌入无水乙醇后 ,肉眼观察胃黏膜损伤指数 (LI) ,光镜下观察黏膜缺损深度 ,并计算黏膜缺损深度与胃壁全层厚度百分比。放射免疫法测定各组胃黏膜PGE2的水平。免疫组织化学方法检测COX 1和COX 2蛋白表达水平并以平均吸光度值表示其强度。RT PCR检测胃黏膜COX 1和COX 2mRNA表达变化。结果　多潘立酮 1mg/kg组的LI及黏膜缺损深度与胃壁全层厚度百分比显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,0 .5mg/kg组和 2mg/kg的组LI亦显著低于对照组 (P <0 .0 5 )。多潘立酮 1mg/kg组大鼠胃黏膜COX 1蛋白表达水平及PGE2水平显著高于空白对照组 (P <0 .0 1)。各实验组和对照组在胃黏膜细胞内均无COX 2蛋白表达。三个实验组COX 1mRNA表达量与对照组比较差异均有显著性 (P <0 .0 1)。各组均未检测到COX 2mRNA表达。结论　多潘立酮对胃黏膜损伤具有保护作用 ,其机制之一可能与其增加胃黏膜COX 1mRNA和COX 1蛋白表达及促进胃黏膜PGE2分泌有关。     

左旋卡尼汀对异丙肾上腺素致心肌损害的影响

目的:观察左旋卡尼汀对异丙肾上腺素致心肌损害的保护作用并探讨其机制。方法:采用大鼠皮下注射异丙肾上腺素造成心肌损害模型。心肌切片,HE染色,光镜下观察心肌损害程度;分离心肌线粒体,测定膜脂流动性（LFU）。结果:注射左旋卡尼汀可减轻心肌损害程度;改善线粒体的损伤,改善LFU。结论:左旋卡尼汀能减轻异丙肾对心肌的损害,对线粒体膜脂流动性损伤具有明显的保护作用。     

Nimesulide诱导胃癌细胞凋亡的作用机制研究

目的　非甾体抗炎药诱导胃癌细胞凋亡的机制不清楚。通过研究选择性COX 2抑制剂Nimesulide对人胃癌细胞系SGC 790 1的COX 2mRNA表达和c myc、Bcl 2、caspase 3凋亡基因蛋白表达的影响 ,探索其诱导胃癌细胞凋亡的机制。方法　胃癌细胞的凋亡用电子显微镜、AnnexinV FITC染色、流式细胞仪技术测定。COX 2基因表达用RT PCR法测定。c myc、Bcl 2和caspase 3蛋白表达用免疫细胞化学技术测定。结果　Nimesulide在浓度为 50 μmol/L时作用 48、72h和浓度为 1 0 0和2 0 0 μmol/L 时作用 2 4、48、72h均可诱导胃癌细胞凋亡 ,凋亡率分别为 7.51 % ,9.86 % ;1 1 .58% ,1 2 .45 % ,1 6 .66 %和 1 2 .2 1 % ,1 5 .38% ,2 0 .2 8% ,呈浓度和时间依赖性。Nimesulide可降低COX 2mRNA表达和Bcl 2蛋白表达 ,增加c myc和caspase 3蛋白表达。 2 0 0 μmol/LNimesulide作用 72h ,Bcl 2 ,c myc和caspase 3蛋白表达阳性率分别为 (2 0 .2± 7.6) % ,(49.2± 1 5 .1 ) %和 (34 .6± 1 2 .9) % ,对照组为(44.6± 1 2 .1 ) % ,(2 4 .7± 9.5) %和 (1 4 .8± 6 .4) % ,三者对照比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 1。)结论　Nimesulide可诱导胃癌细胞SGC 790 1凋亡 ,其机制涉及Bcl 2表达下调、c myc表达上调及caspase 3激活。     

O-GIcNAc 转移酶在直肠癌中的分布及其对预后的影响

目的了解O- GIcNAc转移酶(O- GlcNAc transferase,OGT)在直肠癌中的表达情况及对预后的影响。方法利用免疫组化技术,在直肠癌组织芯片上染色OGT,确定表达情况,并与患者临床资料结合,了解OGT的表达与直肠癌患者的生存是否有差异。结果 OGT在直肠癌组织中的表达情况：“-”12.22%、“+”27.78%、“++”44.44%、“+++”15.56%,癌旁组织中的表达情况：“-”18.89%、“+”42.22%、“++”37.78%、“+++”1.11%;癌组织中OGT高表达（++和+++）为60.00%,高于癌旁组织中OGT高标的量38.89%;OGT高表达直肠癌患者的3年生存率分别是82.90%和60.00%,两者比较有统计学差异（字2=7.452,P=0.006）。结论OGT在直肠癌中的表达高于周围正常组织,直肠癌中高表达的3年生存率较低,OGT可能参加了肿瘤的发生、发展过程。     

RNAi对结肠癌SW480细胞Nucleostemin基因表达的影响

目的:探求RNA技术干扰人结肠癌SW480细胞Nucleostemin(NS)基因后,结肠癌SW480细胞NucleosteminmRNA和蛋白水平的表达,及细胞增殖情况变化.方法:构建Nucleostemin特异性真核表达载体,和脂质体共同转染SW480细胞后,采用Real-timePCR和Westernblot方法检测NS基因mRNA和蛋白变化,MTT法检测细胞的增殖情况.结果:与对照组相比较,RNAi干扰细胞后NSmRNA表达明显下降;NS蛋白表达亦明显下降(1.069±0.368,1.003±0.313,1.901±0.817,P<0.05;1.069±0.368,1.003±0.313,2.035±0.665,P<0.05),空白对照组(仅加入脂质体)和阴性对照组(RNAi错义序列)间无显著差异(2.035±0.665,1.9001±0.817,P>0.05).MTT显示RNA干扰后细胞增殖明显受到抑制.结论:通过特异性RNA干扰NS基因后,结肠癌SW480细胞增殖受到抑制.     

经微创通道治疗下腰椎退行性疾病的疗效分析

目的探讨采用MAST-QUADRANT可扩张微创通道管系统单切口治疗下腰椎退行性疾病的临床疗效。方法对2009-06-2013-06对32例在微创通道下行减压经椎间孔腰椎间融合术联合椎弓根螺钉内固定术治疗的下腰椎退行性疾病患者进行回顾性分析,观察手术时间、术中失血量、术后并发症,对比术前、术后视觉模拟评分法(VAS)及Oswestry功能障碍指数(ODI)和椎间隙高度评价疗效,采用Bridwell标准评价植骨融合率。结果手术时间为145±29 min,出血量(180±96)ml,所有患者均未输血;2例患者出现硬脊膜损伤,发生并发症2例(6.2%)。所有患者均获得随访,随访时间平均为18.6个月,VAS评分由术前(6.9±1.4)分、术后7 d(2.5±0.7)分、末次随访(2.3±0.4)分,VAS评分术前和末次随访比较差异有统计学意义(P0.01),ODI指数术前和末次随访比较差异有统计学意义(P0.05)。末次随访植骨融合率均为100%,内固定及椎间融合器位置良好,随访期间无融合器松动、脱落、钉棒断裂,椎间隙高度无丢失。末次随访时采用改良Mac Nab疗效评价标准评价手术效果,优19例,良10例,可3例,优良率90.6%(29/32)。结论手术适应证掌握恰当,MAST-QUADRANT可扩张微创通道管系统技术是治疗下腰椎退行性疾病的有效方法,具有创伤小、恢复快的优点。     

运动对超重/肥胖型葡萄糖耐量减低患者炎症相关蛋白表达水平的影响

目的:研究运动对超重／肥胖型葡萄糖耐量减低(IGT)患者血循环中炎症相关蛋白--白细胞介素-6(IL-6)、可溶性内皮细胞选择素(sE-selectin)水平的影响。方法:60例超重／肥胖型IGT患者入选为期12周的随机对照研究,对照组予以单纯生活方式干预,运动组在此基础上增加运动强度及时间。观察血中IL-6、sE-selectin及体重变化。结果:超重／肥胖型ICT患者的血循环中IL-6、sE-Selectin明显升高,与正常人组比较,差异有显著性意义(P均<0.01)。经12周的干预治疗研究IGT患者体重减轻,运动组减轻体重较对照组更明显4.82±2.12kg,2.35±2.14kg(P<0.01)。伴随着血糖和体重的下降IL-6、sE-selectin明显降低,运动组改善更明显。相关分析显示:sE-selectin与体重指数(BMI)及糖化血红蛋白(HbAlc)之间分别存在显著的正相关(P均<0.01)。结论:超重／肥胖型IGT患者已有炎症因子的异常表达,而运动干预能使这些异常得到显著改善。     

参芪排毒汤对宫颈癌组织人乳头瘤病毒E6/E7、P53和PRb基因蛋白表达的影响

目的:研究参芪排毒汤对宫颈癌组织人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA、肿瘤抑制基因(P53)、视网膜母细胞瘤蛋白(PRb)表达水平的影响与意义。方法:选取112例宫颈癌患者进入研究,按随机数字表划分成对照组与治疗组,两组均给予新辅助化疗联合腹腔镜宫颈癌根治术治疗,治疗组在新辅助化疗的同时给予参芪排毒汤口服; 术前评估两组临床疗效,统计不良反应发生情况,术中取癌旁健康组织与病灶病理组织样本检测HPV E6和E7 mRNA表达水平并计算E6/E7比值,检测样本中P53、PRb表达水平; 随访至少3年,比较两组患者的3年无病情进展生存时间(PFS)、总生存时间(OS),分析新辅助化疗后病理组织中HPV E6/E7、P53、PRb表达水平对PFS、OS的预测价值。结果:治疗组缓解率为83.93%,对照组为62.50%,治疗组缓解率高于对照组(P<0.05); 治疗组不良反应发生率为12.50%,对照组为17.86%,差异比较无统计学意义(P>0.05); 化疗后两组患者癌旁组织中HPV E6/E7比值比较,差异无统计学意义(P>0.05),病理组中HPV E6/E7表达高于治疗组(均P<0.05),两组癌旁与病理组织中P53、PRb比较,差异有统计学意义(均P>0.05); 化疗后宫颈癌组织中HPV E6/E7、P53、PRb表达水平对于患者无病情进展生存时间PFS、OS均具有较高预测价值(AUC>0.9,P<0.05); 治疗组患者PFS、OS均长于对照组(均P<0.05)。结论:在腹腔镜宫颈癌根治术前新辅助化疗中联合应用参芪排毒汤,能够提高术前疗效,抑制宫颈癌组织中HPV E6/E7表达、提升P53、PRb表达水平,从而起到延长患者无病情进展生存时间与总生存时间,改善预后的作用。     

大鼠骨髓基质干细胞体外分化为神经元样细胞并表达肠神经相关神经营养因子

目的探讨维甲酸、锌联合胎肠培养基诱导大鼠骨髓基质干细胞向神经元细胞分化的可能性以及分化前后肠神经相关神经营养因子表达的变化。方法体外培养大鼠骨髓基质干细胞（BMSC），传代至第6代，进行神经诱导分化。先以bFGF（10ng／ml）预诱导24h，然后以维甲酸（Retinoic acid，RA）、锌在胎肠培养基（FGCM）条件下诱导10d。免疫荧光法检测神经元标志神经特异性烯醇化酶（NSE）和神经丝蛋白（NF）的表达。RT-PCR法检测胶质源神经营养因子（GDNF）和神经生长因子（NGF）mRNA的表达。结果流式细胞检测BMSC高表达CD90（99，7％），而CD45表达阴性。诱导10d后，部分细胞在形态上表现出神经元样改变，免疫荧光染色神经元标志NSE和NF阳性，而胶质细胞标志GFAP阴性。RT-PCR检测发现，BMSC诱导前低表达神经营养因子NGF和GDNF mRNA，而诱导后表达水平显著增加。结论维甲酸、锌联合胎肠培养基不仅能在体外诱导BMSC分化为神经元样细胞，而且能促进肠神经相关神经营养因子表达显著上调。