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1997年 | 1篇 |
1996年 | 1篇 |
1992年 | 1篇 |
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61.
62.
鉴定和测序鉴定序列及插入方向正确,其中pGPU6/GFP/Neo-DAL-1-T4表达载体在mRNA和蛋白质水平能有效抑制DAL-1的表达,抑制率分别为(87 41±1 994)%和(82 73±2 147)%.与对照组细胞比较,DAL-1稳定抑制的实验组细胞迁移和侵袭能力(P=0 000)和增殖能力显著增强(P=0 000).结论: 成功设计并构建了靶向DAL-1的shRNA表达载体,建立了DAL-1稳定抑制的NSCLC细胞株,为进一步研究DAL-1在NSCLC细胞中的作用提供了实验模型. 相似文献
63.
观察成骨肉瘤患者辅助性T淋巴亚群中Th1/Th2亚群的变化,为细胞因子免疫治疗提供依据。方法应用放射免疫法以及酶联免疫吸附法检测成骨肉瘤患者血清中IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α的含量,检测外周血单个核细胞培养上清中IL-2、IL-4含量。结果成骨肉瘤血清中及培养上清中IL-2减少,而IL-4、IL-6、TNF-α含量增加。结论成骨肉瘤患者中存在有Th1/Th2平衡失调,其中Th1亚群功能抑制,Th2亚群功能亢进,它们与肿瘤在宿主体内生长密切相关。 相似文献
64.
目的 探讨非小细胞肺癌中潜在抑癌基因DAL-1的表达与其启动子甲基化的关系.方法 10例非小细胞肺癌初诊患者,每例在治疗前抽取胸水并分离培养肿瘤细胞成系.分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、western blot检测DAL-1的mRNA水平和蛋白水平的表达,用甲基化特异性PCR检测DAL-1基因启动子的甲基化.结果 10个细胞系中有9个完全不表达DAL-1mRNA和蛋白,仅有1个表达与人支气管上皮细胞株HBE水平相当.9个不表达DAL-1的细胞系有6个检出启动子CpG岛甲基化.结论 DAL-1在大多数非小细胞肺癌患者胸水分离细胞系中表达缺失.而DAL-1启动子甲基化是造成这种现象的主要原因. 相似文献
65.
肺癌的靶向治疗中以EGFR-TKI应用最为广泛,已有研究证实了EGFR突变检测与靶向治疗的相关性,使用EGFR-TKI之前应当进行EGFR突变检测已经深入人心. 相似文献
66.
目的:克隆及表达人黑色素瘤特异性抗原(PRAME)基因的cDNA片段。方法:从人急性髓细胞白血病细胞系HL-60提取总RNA,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从中扩增出PRAME基因cDNA片段。将PRAME基因cDNA片段插入载体pGEM-T-easy中,经全自动序列分析仪测序正确后,再克隆至表达载体pGEX-4T-2中,构建高效表达克隆,并转化大肠杆菌进行表达。结果:1mmoL/L异丙基-β—D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导5h,PRAME蛋白表达即达高峰。结论:PRAME基因在极少数正常组织中低表达,而在白血病患者高表达,并编码被自体细胞毒T淋巴细胞识别的抗原,所以该基因有望成为肿瘤免疫治疗的新成员。 相似文献
67.
人NY-ESO-1基因的原核表达、纯化和初步应用 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:克隆人NY-ESO-1基因,进行原核表达和分离纯化,并初步应用于肝癌患者血清NY-ESO-1抗体的检测。方法:通过RT-PCR技术从人肝癌组织中扩增NY-ESO-1基因片段,插入原核表达载体pGEX4T-1( )中,构建重组表达质粒pGEx/ESO1,导入大肠杆菌BL21(DE3),诱导目的蛋白表达,经包涵体透析复性和GSTrap亲和层析纯化目的蛋白,Westem blot鉴定。应用间接ELISA方法初步检测50例肝癌患者血清和20例正常人血清NY-ESO-1抗体的表达。结果:扩增得到NY-ESO-1基因3′端276bp片段,与GeneBank公布序列一致,构建的pGEX/ESO1原核表达质粒经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达分子量约36kD的GST-ESO1融合蛋白,纯化后蛋白纯度为90%。50例肝细胞癌患者血清中4例检测到NY-ESO-1抗体(8%),正常人血清均为阴性。结论:成功构建pGEX/ESO1重组表达质粒,得到有活性的NY-ESO-1融合蛋白,对肝癌患者血清NY-ESO-1抗体的检测有-定的应用价值。 相似文献
68.
目的:检测鼻咽癌、耳鼻部良性疾病和正常人血清中蛋白质指纹图谱,筛选特异的蛋白质标志物,构建用于鼻咽癌诊断的分类树模型.方法:采用CM10芯片及SELDI-TOF-MS技术对30例鼻咽癌患者及24例对照组血清样本进行蛋白质指纹图谱检测分析,所得到的结果采用Biomarker Wizard和Biomarker Patterns System软件分析并建立用于鼻咽癌诊断的分类树模型,并用其余10例鼻咽癌患者和12例对照组标本进行双盲验证.同时用酶联免疫法(ELISA)检测两组的血清EB病毒VCA-IgA抗体,将诊断模型的判定结果通过与血清EB病毒VCA-IgA抗体检测结果相对比验证其对于临床的应用价值.结果:从两组血清中筛选出Mr为8559,15 115,15 836,15 937,16 089的5个差别有统计学意义(P<0.05)的标志蛋白,所建立的诊断模型对鼻咽癌诊断的准确率、灵敏度和特异度分别为98.1%(53/54),96.7%(29/30)和100%(24/24).双盲验证后的准确率、灵敏度和特异度分别86.4%(19/22),80.0%(8/10),和91.7%(11/12).灵敏度优于血清EB病毒VC... 相似文献
69.
人肝癌细胞中一个MAGE抗原表位的获得及mRNA水平分析 总被引:1,自引:1,他引:0
0 引言 寻找和鉴定肿瘤抗原肽是肿瘤免疫研究中的重要任务 .人细胞毒性 T淋巴细胞 (CTL)可通过特异性识别与人类 HL A分子结合的肿瘤抗原决定簇而介导肿瘤抑制 ,用这些肽支撑的疫苗可以预防或治疗肿瘤 [1 ] .寻找和鉴定肝癌细胞表面表达的抗原肽对肝癌治疗有重要意义 .目前这方面报道很少 .本实验用细胞膜温和酸洗、液质联用技术分析了人肝癌细胞系 HHCC细胞膜表面表达的抗原肽 .并用 RT- PCR的方法在 m RNA水平上分析了该抗原肽编码基因的表达1 材料和方法1.1 材料 人肝癌细胞株 HHCC购于上海动物细胞所 .反相 C18柱为 Nobe… 相似文献
70.
目的研究一氧化氮合酶(NOS)反义核酸(ASODN)对脊髓损伤后NOS表达、细胞凋亡、信号转导通路的影响。方法设计并合成诱导型NOS反义寡脱氧核苷酸(ASODN-iNOS)及诱导型NOS无义寡脱氧核苷酸(NSODN-iNOS),微量注入大鼠蛛网膜下腔并制备成脊髓压迫伤动物模型。伤后6 h分别用RT-PCR检测iNOS mRNA表达及用Western blotting检测组织中磷酸化丝裂原激活蛋白激酶(p-p38 MAPK)的变化,用双标染色流式细胞术检测伤后72 h细胞凋亡情况。损伤对照组鞘内注射不含核酸的溶液成分。结果脊髓损伤后组织中存在iNOS的表达和p-p38 MAPK变化;损伤后局部组织中存在明显的细胞凋亡;ASODN-iNOS可以抑制iNOS的表达,并可以显著抑制损伤后p-p38 MAPK的表达和细胞凋亡的发生,与损伤对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论ASODN-iNOS可以抑制脊髓损伤后iNOS的表达和细胞凋亡,ASODN的这种作用可能与p-p38 MAPK信号转导通路有关。 相似文献