靶向survivin基因siRNA对喉癌细胞增殖、凋亡的影响

目的观察靶向survivin基因的siRNA对喉癌细胞Hep-2增殖和凋亡的影响,为喉癌的基因治疗提供有效靶点及技术。方法使用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将靶向survivin基因的siRNA转染至喉癌细胞株Hep-2;MTT[3-（4,5-二甲基噻唑-2）-2,5-二苯基四氮唑溴盐]法检测对喉癌细胞Hep-2增殖的影响;RT-PCR检测喉癌细胞Hep-2survivin基因mRNA表达的变化;Western Blot检测survivin基因蛋白表达;流式细胞技术检测喉癌细胞Hep-2凋亡情况。结果各浓度survivin-siRNA转染组细胞增殖抑制率和凋亡率均明显高于对照组（〈0.05）,survivinmRNA和蛋白表达有不同程度减弱,并且有明显的浓度依赖性,随着浓度的上升表达率下降。结论利用RNA干扰技术沉默survivin基因表达可以显著抑制喉癌细胞Hep-2细胞增殖,并在一定程度上诱导其自发凋亡,不同浓度survivin-siRNA转染能下调survivinmRNA和蛋白表达,靶向survivin基因的RNA干扰技术在喉癌的基因治疗中具有一定价值。     

融合基因pCEAcd-tk/前体药物体系的体外旁观者效应的差异性

目的：观察用白细胞介素－２（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｒｔ－２,ＩＬ－２）基因修饰小鼠骨髓来源的树太细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ,ＤＣ）后,ＤＣ表达细胞因子和趋化因子的变化及ＤＣ体内免疫后,小鼠体内主要脏器中ＩＬ－２表达情况。探讨其对抗原提呈微环境的改善及其可能的机制。方法：用ＥＬＩＳＡ方法检测ＤＣ培养上清和小鼠血清及脏器中ＩＬ－２的含量,用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测ＤＣ中ＩＬ－２,ＩＦＮ－γ,ＩＬ－     

枸杞多糖对人肝癌细胞HepG2生长的影响及其分子机制

目的探讨枸杞多糖(Lycium barbarumpolysaccharides,LBP)对人肝癌细胞HepG2生长的影响及可能机制。方法人肝癌HepG2细胞用100~1 000 mg/L LBP处理1~5 d,分别用MTT方法、流式细胞术检测细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡。用Western blotting分析周期蛋白(cyclin)和周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependentkinase,CDK)表达的变化。结果 LBP以质量浓度依赖方式抑制肝癌细胞的生长,阻滞细胞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡;其分子机制为引起cyclin Dc、yclin E和CDK2蛋白表达下降。结论 LBP抑制人肝癌细胞HepG2增殖的机制包括阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡。     

人DNA指纹的研究及其应用

1988年,作者根据DNA指纹是人基因组中重复序列的RFLP的原理和人与鼠的髓鞘碱性蛋白(MBP)基因同源序列高于90％的事实,选用鼠MBP CDNA3’-端的与人基因组中该类重复序列几乎完全同源的0.81kb片段作探针,检测用Hae Ⅲ酶解的人DNA限制性片段(RF),在人群中可检出22条谱带,受检的无血缘关系的个体之间没有两个人的谱带是完全相同的,显示这一方法的高度个体特异性。这是国内首次用自己的力量找出检测DNA     

中医推拿临床疗效相关影响因素探究

推拿是传统中医学的重要组成部分, 具有简便廉验的特点, 临床上在治疗肌肉筋骨病变、内脏病、妇科病、小儿常见病等方面显示出良好效果。本文对推拿疗效的影响因素进行分析, 从诊断因素、治疗因素、预后因素、患者因素和医患沟通等方面进行了探讨, 认为医者必须进行良好的医患沟通, 恰当评估患者基础病及身体素质, 在明确诊断的基础上, 针对患者体质、基础疾病与生理状态等, 采取适宜的按摩手法与预后措施, 才能达到良好的治疗效果, 提高临床疗效。     

端粒酶活性及其hTR表达在诱导大肠癌分化细胞中的变化

目的 观察全反式维甲酸（ＡＴＲＡ０和１，２５－二羟维生素Ｄ３（ＶＤ３）大肠癌细胞株诱导分化过程中粒酶活性的变化，并对其ＲＮＡ组分ｈＴＲ进行检测。方法 ＡＴＲＡ和ＶＤ３对大肠癌细胞进行诱导分化，在进行细胞活力测定，细胞增殖测定，流式细胞仪（ＦＣＭ）分析细胞周期及碱性磷酸酶比活性测定的时时，分别在诱导后第２天，第４天和第６天用ＴＲＡＰ法检测其端粒酶活性的变化，并同时用ＲＴ－ＰＣＲ的方法对端粒酶的ＲＮＡ     

中国畲族人群DYS287位点多态性的研究

目的：分析Y染色体特异的Alu插入位点DYS287的遗传多态性。并对江西，浙江和福建三省不同地区的畲族人群Alu插入频率进行比较。方法：以中国畲族群体的117名男性个体为研究对象，采用PCR-SSP法扩增后琼脂糖凝胶电泳分离的方法检测结果。结果：我国畲族人群中Alu插入的基因频率为17.1%，江西，浙江入福建三省不同地区的畲族人群中Alu插入频率无显著差异。结论：DYS287位点作为一种稳定，可靠的遗传标记可以为研究民族间的遗传关系及其起源提供可靠的证据。     

免疫磁珠与DNA倍体检测肿瘤患者外周血中癌细胞的初步临床应用

DNA异倍体是恶性肿瘤的重要标志之一[1-2],检测外周血中肿瘤DNA异倍体为无创性肿瘤诊断开辟了一条新途径[3].流式细胞术 (FCM)-DNA倍体分析技术具有特异性强的优点,但该方法在外周血中检测的阳性率不高[4].本研究先用免疫磁珠(IMB)阴性分选富集癌细胞,后用FCM-DNA倍体检测外周血中癌细胞,现报告如下.     

免疫磁珠与荧光定量逆转录聚合酶链反应在胃癌患者外周血癌细胞检测中的应用价值

目的研究免疫磁珠和荧光定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测胃癌患者外周血癌细胞的应用价值。方法将不同浓度的人胃腺癌细胞系MGC803细胞加入到健康人血中,经淋巴细胞分离液收集单核细胞后,等分4份。其中1份直接用于提取RNA(方法Ⅰ)、其他分别用阴性磁珠(方法Ⅱ)、阳性磁珠(方法Ⅲ)及联用阴性和阳性磁珠(方法Ⅳ)富集癌细胞。然后,以癌胚抗原(CEA)mRNA作为分子标志物进行荧光定量RTPCR检测其相对拷贝数;并检测45例胃癌、30例胃溃疡患者和30名健康人外周血CEAmRNA。结果方法Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ测得的CEAmRNA相对拷贝数与癌细胞数间有良好的相关性(方法Ⅱ和ⅢP<005;方法ⅣP<001),尤以Ⅳ方法为佳,可检测出每毫升血中含有的1个胃癌细胞。Ⅰ～Ⅳ方法检测胃癌患者阳性率分别为4222%、5333%、5111%和6444%;方法Ⅳ与方法Ⅰ比较,差异有显著意义(P<005)。用方法Ⅳ检测30例胃溃疡患者均为阴性,而其他3种方法检出2例阳性;30名健康人中4种方法均未检出扩增产物。结论免疫磁珠与荧光定量RTPCR法可提高胃癌患者外周血CEAmRNA的检出率。