外源性TNF-α基因克服多药耐药性的初步研究

目的：探索外源性细胞因子TNF－α基因克服多药耐药（multidrug resistnce,MDR)的新途径。方法：以重组逆转录病毒为载体,将TNF－α基因导入具MDR表型的人乳腺癌细胞系MCF－7／Adr ,经G418抗性筛选获阳性克隆MCF－7／Adr－TNF1与MCF－7／Adr－TNF2。以PCR和ELISA法检测目的基因的整合与表达。细胞计数法观察细胞生长速度的改变。MTT法检测外源性TNF－α基因的逆转MDR作用,流式细胞仪分析细胞内ADR积累的变化。结果：MCF－7／Adr－TNF1GN MCF－7／Adr－TNF2细胞中有TNF－α基因的整合和表达,病毒上清中TNF－α含量分别为1737pg/ml(10^6cells/48h)、2875pg/ml。与阴性对照细胞相比,MCF－7／Adr－TNF1GN MCF－7／Adr－TNF2细胞的生长速度明显减慢,生长抑制率分别为32．4％、54．8％,对ADR的耐药性明显降低,耐药逆转倍数分别为5．2倍、19．3倍,细胞内ADR的积累明显增加。结论：外源性TNF－α基因的导入能有效克服耐药性,增加细胞内药物的积累为其逆转耐药性的主要机制。     

康莱特诱导具多药耐药表型的人乳腺癌细胞MCF7~(adr)凋亡及周期阻滞的研究

目的:观察康莱特对耐药细胞的作用及分子机制。方法:以敏感型乳腺癌细胞株 MCF7为对照,四氮唑蓝(MTT)法检测康莱特对耐药细胞株 MCF7~(adr)的抑制作用。以 Annexin V 标记法、DNA 含量测定法及电镜观察康莱特的诱导耐药细胞 MCF7~(adr)凋亡及周期阻滞的作用。免疫组化法检测康莱特对 MCF7~(adr)细胞 p53、p21~(WAF1/CIP1)蛋白表达的影响,RT-PCR 法检测康莱特对 MCF7~(adr)细胞 p21~(WAF1/CIP1)mRNA 表达水平的影响。结果:康莱特对 MCF7~(adr)细胞的半数抑制剂量(IC_(50))为26μ1/ml,与其对敏感细胞 MCF7的 IC_(50)(21μ1/ml)差异无显著性(P>0.05)。康莱特能诱导 MCF7~(adr)出细胞凋亡及细胞周期阻滞(G_0/G_1及 G_2/M 期),使 p53蛋白、p21~(WAF1/CIP1)mRNA 及蛋白表达水平升高。结论:康莱特对耐药细胞同样有效,这为其临床应用于已产生耐药性的肿瘤提供了依据。     

急性坏死性胰腺炎生长抑素治疗后血内毒素、TNF-α和肝TNF-αmRNA的变化

急性坏死性胰腺炎（ANP）往往累及多个器官，引起多器官功能障碍综合征（MODS），其发病机制尚未完全阐明。本实验主要观察ANP鼠经生长抑素治疗后血TNF-α、内毒素以及肝脏TNF-αmRNA转录水平的变化，进一步阐明ANP时肝损伤的机制。材料和方法一、实验动物雄性SD大鼠30只，体重325土159，购自中科院。二、试剂生长抑素（Stilami）为瑞士雪兰诺公司产品；牛磺胆酸购自Sigma公司；TNF-α的酶联免疫测定试剂盒购自美国T＆B公司：一步法RT-PCR试剂盒购自Promega公司。引物由中国科学院细胞所合成。上游序列为：5’一GCCAATGG…     

Foxp3仍然是人调节性T细胞的标志？

CD4＋CD25＋调节性T细胞是维持机体免疫稳态和免疫耐受的一个重要机制。缺乏这群细胞与许多自身免疫性疾病的发生和发展密切相关。目前积累的证据表明，在啮齿类动物中，一个叉头样转录因子Foxp3基因及其编码产物（scurfin）是CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的特异性标志物。Foxp3基因控制着CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的发育,并且直接影响它的功能。虽然早期研究认为Foxp3也在人CD4^＋CD25^＋调节性T细胞上特异性表达，但是越来越多的研究发现Foxp3在人类激活的CD4^＋效应T细胞中也有表达。Foxp3是否也是人的调节性T细胞的特异性分子标志？本文对当前国际免疫调节领域相关方面的工作进展进行总结，以供同行参考。     

滋养细胞肿瘤中角蛋白和上皮细胞膜抗原的表达

应用抗上皮细胞膜抗原（ＥＭＡ）和角蛋白（ｃｙｔｏｄｅｒａｔｉｎ，ＣＫ）等单克隆抗体对正常胎盘、葡萄胎、浸润性葡萄胎、胎盘部位中间型滋养细胞肿瘤（ＰＳＴＴ）和绒癌等进行免疫组织化学研究，结果发现ＥＭＡ和ＣＫ在正常滋养细胞及其肿中皆有较高的表达，阳性率分别为９４％和９１％，并且在合体滋养细胞（ＳＴ）、细胞滋养细胞（ＣＴ）和中间型滋养细胞（ＩＴ）中皆有不同程度的表达，其中，ＥＭＡ的阳性表达在ＳＴ中９４％     

胎盘部位中间型滋养细胞肿瘤

人们对二型滋养层、细胞滋养层和合体滋养层以及相应的疾病,如水泡状胎块、侵蚀性葡萄胎和绒癌已有清楚的认识。近年来,光镜、电镜和免疫组化研究证实了还存在第三种中间型滋养层细胞(Inter-mediate cell,IT),它是正常胎盘的组成成份,也可     

雌激素对卵巢癌AO,3AO细胞增殖作用的调节

观察雌激素对卵巢癌细胞的增殖调节。利用卵巢上皮性癌ＡＯ、３ＡＯ细胞，采用增殖细胞核抗原免疫化检测法及＾３Ｈ－胸腺嘧啶掺入率测定法观察了不同浓度的雌二醇对卵巢癌细胞增殖的影响。结论：雌激素对卵巢癌的增殖作用具有剂量依赖性，高浓度的雌激素对癌细胞有明显的抑制作用。     

c－erbB－2基因蛋白在肺癌组织中的表达及其意义

ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白在肺癌组织中的表达及其意义陈至善，郑颂国，张岩，杨玉妹，傅秀珍为探索ｃ－ｅｒｂＢ－２与肺癌发生、病理分类的关系，以期为肺癌的发生发展，诊断和鉴别诊断，提供新的参考指标，我们应用ＡＢＣ法检测７２例肺组织的ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白...     

滋养细胞肿瘤PP_（11）、PP_（19）、PP_（25）和PP_（26）的免疫

通过免疫组织化学方法研究了４种胎盘蛋白（ＰＰ１１、ＰＰ１９ＰＰ２５和ＰＰ２６）在滋养细胞肿瘤中的表达情况。发现ＰＰ１１在恶性葡萄胎中的表达明显低于葡萄胎（Ｐ＜０．０５），ＰＰ２５和ＰＰ２６在绒癌中的表达低于葡萄胎（Ｐ＜０．０５），ＰＰ１９在各种滋养细胞肿瘤中皆有强表达，提示联合检测４种胎盘蛋白有助于滋养细胞肿瘤间的鉴别诊断。ＰＰ１９还是中间型滋养细胞肿瘤的优良标志物。     

滋养细胞及其肿瘤的常用标志物

滋养细胞及其肿瘤的常用标志物郑颂国，朱雄增，许良中滋养细胞肿瘤分为水泡状胎块（ｈｙｄａｔｉｄｉｆｏｒｍｍｏｌｅ，ＨＭ），浸润性水泡状胎块（ｉｎｖａｓｉｖｅｍｏｌｅ，ＩＭ）、绒癌（ｃｈｏｒｉｏｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＣＣ）及胎盘部位中间型滋养细胞肿瘤（１）...