活动性弥漫性肺间质纤维化的诊断

弥漫性肺间质纤维化活动性的判断,与临床疗效密切相关。现介绍血清学指标、核素扫描、电子计算机超薄分层成象、磁共振成象、支气管肺泡灌洗液中细胞成分和基质成分的分析,以及运用免疫病理学方法,检测肺组织中某些生化、免疫活性物质等在该病活动性诊断中的临床意义。     

HSP47在肺纤维化中的作用机制

肺纤维化（PF）是由各种原因引起的弥漫性肺部炎症疾病，其病理特征是肺炎症损伤、成纤维细胞灶的形成、细胞外基质过度沉积，最终导致了肺组织结构的异常重塑。目前，PF的发病机制尚不明确。近年来，细胞因子成为研究疾病发病机制的热点，如TGF-β1、IFN-γ、TNF-α、PDCF、IGF-1、IL-1和IL-8等，它们相互作用，相互协调，形成一个复杂的细胞因子网络，在PF形成中起着重要的调控作用。     

热休克蛋白47参与TGF-β1促人胚肺细胞胶原合成

  摘要：目的 观察热休克蛋白47（HSP47）对人胚肺成纤维细胞（HELF）胶原合成及间质细胞标志物的影响,探讨它与肺纤维化的关系。方法 用TGF－β1诱导HELF表达HSP47,观察用5ng/mL TGF-β1作用不同时间和用不同浓度TGF－β1作用于HELF48h; WST法检测TGF-β1对HELF增殖影响;细胞免疫荧光法检测HSP47的表达;免疫印迹技术检测HSP47、Ⅰ型胶原（COLLAGENⅠ）及间质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(VIMENTIN)的表达。结果 正常HELF表达少量HSP47,随着HELF在TGF-β1作用时间的延长和剂量逐渐增加,HSP47、COLLAGENⅠ、α-SMA和VIMENTIN的表达均同步增强（P<0.05）。结论 HSP47在TGF－β1的作用下,促进人胚肺成纤维细胞胶原蛋白的合成,作为胶原特异性分子伴侣在肺纤维化的发生发展过程中发挥至关重要的作用。     

地塞米松减轻博来霉素诱导小鼠肺纤维化的机制探讨

目的探讨地塞米松减轻博来霉素诱导小鼠肺纤维化的机制。方法 60只小鼠随机均分为三组:B组和BD组用气管灌注博来霉素5mg/kg建立肺纤维化模型。24h后,BD组使用地塞米松0.45mg.kg-1.d-1灌胃。BC组气管灌注用生理盐水作为空白对照。检测灌注博来霉素或生理盐水后第7、14、21和28天小鼠肺脏转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3及JAK-STAT表达,观察肺组织病理变化。结果与BC组比较,处理28d后,B组肺组织切片显示有较严重的纤维化表现,而BD组的肺纤维化则有明显的减轻。观测期间,B组和BD组TGF-β1(第7、14天)、Smad3(第14天)及JAK-STAT(第14、21和28天)表达均高于BC组,但BD组低于B组(P<0.05或P<0.01)。结论推测在博来霉素诱导小鼠肺纤维化模型中,地塞米松的治疗作用可能与TGF-β1、Smad3及JAK-STAT通路有关。     

β-连环蛋白在肺纤维化小鼠肺组织中的表达

目的观察β-连环蛋白在肺纤维化模型小鼠肺组织中的表达。方法昆明小鼠40只随机均分成实验组和对照组,气管内分别一次性注入博来霉素5mg/kg(0.04ml)和生理盐水0.04ml。给药后第3、7、14、28天,每组处死小鼠5只,取肺组织做病理切片和HE染色;用碱水解法检测肺组织羟脯氨酸含量,免疫组化法及Western blot检测肺组织中β-连环蛋白表达。结果实验组肺泡炎和肺纤维化程度均明显高于对照组(P<0.05),羟脯氨酸的含量在第7-28天明显高于对照组(P<0.01)。实验组在各时间点肺组织中的β-连环蛋白表达高于对照组(P<0.05);其表达高峰在第14天。结论β-连环蛋白在模型小鼠肺纤维化发生过程中存在高表达。     

IL-17和CRP在慢性阻塞性肺疾病中的作用及相关性

目的:探讨白细胞介素(IL)-17和C反应白蛋白(CRP)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病机制中的作用。方法:取100例健康体检者(健康对照组)、100例COPD急性加重期及100例稳定期患者空腹静脉血,采用双抗体酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清中IL-17及CRP水平。并对全部研究对象进行肺功能检查,计算出第1秒用力呼气容积占预计值百分率(FEV1%)。结果:COPD急性加重期患者血清IL-17、CRP明显高于稳定期患者和健康对照组(P<0.05)。COPD急性加重期患者血清IL-17与FEV1%呈负相关,与血清CRP呈正相关(r分别为-0.437和0.582,均P<0.05);COPD稳定期患者血清IL-17与CRP呈正相关(r=0.481,P<0.05)。结论:IL-17可能参与COPD的发病,IL-17与CRP可作为监测COPD的病情活动的相关性指标之一。     

柴胡皂甙d对博来霉素诱导肺纤维化小鼠的治疗作用及机制研究

目的 探讨柴胡皂甙d(SSd)抗小鼠肺纤维化的作用及其机制.方法 180只小鼠按随机数字表法分5组.其中4组为博来霉素(BLM)诱导肺纤维化模型组(气管内注射BLM 5 mg/kg),分为单纯造模组(BLM组)、地塞米松(DXM)干预组(DXM组)、SSd干预组(SSd组)和SSd+DXM联合干预组(SSd+DXM组),每组40只;造模后1 h,后3组小鼠分别腹腔注射DXM 5 mg/kg(0.1 ml)、SSd 1.8 mg/kg(0.18 ml)、SSd+DXM(0.1ml+0.18ml),BLM组腹腔注射0.28 ml生理盐水,每天1次,连续28 d.另1组为正常对照组(NC组,20只),同时间按同样方法注入0.28 ml生理盐水.给药第3、7、14、28天每组各处死5只小鼠,取肺组织行常规组织病理学检查,检测肺组织中羟基脯氨酸(HYP)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;取外周血检测SOD和MDA含量.造模的4组每组各20只小鼠用于观察自然生存状况.结果 SSd可明显提高肺纤维化小鼠存活率(SSd组和SSd+DXM组存活率均为80.0%,BLM组为50.0%,P<0.05),并显著减轻小鼠肺泡炎和肺纤维化程度.DXM组、SSd组和DXM+SSd组肺组织HYP含量给药第14、28天明显低于BLM组(P<0.05),血清及肺组织MDA含量给药第3、7、14天明显低于BLM组(P<0.05,P<0.01),血清SOD含量给药第3、7、14天、肺组织SOD含量给药第3、7天明显高于BLM组(P<0.05,P<0.01).结论 SSd有很明显的抗肺纤维化作用,其作用机制可能与抗脂质过氧化作用有关.     

IL-28B mRNA在小鼠纤维化肺组织内的表达及意义

目的: 研究白介素28B(IL-28B)mRNA在小鼠肺纤维化模型中的表达,探讨其在肺纤维化发病过程中的意义.方法: 健康昆明种雄性小鼠72只,随机分成3组:对照组(生理盐水)、模型组(博莱霉素)和治疗组(博莱霉素+泼尼松),每组24只.第7,14,21,28天各组处死小鼠6只.无菌操作下取出小鼠肺组织,RT-PCR检测IL-28B的mRNA表达.结果: 第7,14,21天时,模型组IL-28B的mRNA表达显著高于对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01);其中模型组14天时,IL-28B表达最高.第7,14,21天时,治疗组IL-28B的mRNA表达显著低于模型组(P<0.05,P<0.01,P<0.01).结论: IL-28B参与了肺纤维化的发生、发展过程,在肺纤维化的早期发挥了重要作用.     

布地奈德吸入联合N-乙酰半胱氨酸治疗特发性肺纤维化

目的客观评价吸入性表面激素联合抗氧化剂治疗特发性肺纤维化（IPF）及口服激素治疗特发性肺纤维化这两种治疗方法的疗效及不良反应。方法 42例IPF进展期患者随机分为试验组和对照组,试验组给予布地奈德雾化吸入联合口服N-乙酰半胱氨酸治疗,对照组给予口服泼尼松治疗。对两组治疗前后进行呼吸困难评分,检测血气分析、肺功能及不良反应指标。结果两组对比治疗前各项检测指标均无差异（P〉0.05）。两组治疗后的呼吸困难评分、血气分析、肺功能的相关指标比治疗前均有所改善（P〈0.05）。试验组治疗后的呼吸困难评分、血气分析、肺功能的相关指标优于对照组（P〈0.01）。试验组治疗前后的不良反应指标无差异（P〉0.05）。对照组治疗后不良反应指标比治疗前明显（P〈0.05）。结论布地奈德雾化吸入联合口服N-乙酰半胱氨酸治疗IPF的疗效比口服泼尼松好,而不良反应发生明显降低。表面激素联合抗氧化剂对IPF进展期的治疗值得临床推广。     

鼠IFN-λ2 CHO细胞系建立及生物学活性的研究

目的 稳定表达鼠IFN-λ2并对其生物学活性进行研究.方法 用水疱口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)刺激小鼠脾脏细胞,克隆mIFN-λ2全长基因,构建真核表达载体PCAGG-EGFP-mIFN-λ2,并在CHO细胞稳定表达,且在小鼠黑色素瘤B16细胞上进行抗病毒活性测定;构建MDBK-Mxp-Luc细胞系诱导Mx1抗病毒蛋白产生.结果 pMD18-T-mIFN-λ2双酶切鉴定,出现582 bp大小的条带,成功构建了PCAGG-EGFP-mIFN-λ2真核表达载体;稳定表达mIFN-λ2 CHO的细胞株分泌的上清中mIFN-λ2蛋白在B16细胞上的抗病毒活性为10~4 AU/ml;mIFN-λ2蛋白诱导鼠Mx1抗病毒蛋白的表达,9～12 h达高峰,24 h后消失(P<0.05).结论 建立了稳定表达mIFN-λ2的CHO细胞株,其分泌型mIFN-λ2蛋白具有明显的抗病毒活性,且与诱导Mx1抗病毒蛋白密切相关.