IL-13促进小鼠肺成纤维细胞增殖及表达

目的 研究重组小鼠IL-13对肺成纤维细胞的作用及其机制.方法 取生长良好的NIH/3T3,给予无血清培养基饥饿24 h,在培养液中加入IL-13.MTT法、RT-PCR等方法 测定肺成纤维细胞的增殖及TGF-β_1、PDGF-AA、α-SMA等因子的表达.MTT法观察TGF-β单克隆抗体干预后,IL-13对NIH/3T3细胞增殖反应的影响.结果 与对照组相比,IL-13促进NIH/3T3细胞增殖(P<0.05).IL-13能够显著地促进NIH/3T3细胞中TGF-β1和PDGF-AA mRNA的表达,刺激NIH/3T3分泌α-SMA.TGF-β单克隆抗体能抑制IL-13诱导引起的NIH/3T3细胞增值.结论 IL-13能促进成纤维细胞的增殖,其可能的机制是通过促进成纤维细胞分泌TGF-β_1和PDGF-AA来发挥作用.     

TGF-β_1诱导肺泡上皮细胞间质转化

目的:通过观察TGF-β1诱导下A549细胞出现的细胞形态学和E-cad表达的变化,探讨上皮细胞-间质细胞转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程在肺纤维化发病机制中的作用。方法:体外培养A549细胞,以TGF-β1进行干预,收集不同时段的细胞,应用荧光实时定量PCR(RT-PCR)检测TGF-β1干预前后E-cad的mRNA表达变化;倒置相差显微镜观察细胞形态学的变化;间接免疫荧光观察E-cad蛋白表达的变化。结果:倒置相差显微镜观察到TGF-β1干预后A549细胞由鹅卵石状变为梭形,形态如同肌纤维母细胞。间接免疫荧光显示A549细胞的E-cad表达(红色荧光染色)随时间延长逐渐减少。RT-PCR显示E-cad的mRNA表达下调(P<0.05)。结论:TGF-β1在体外诱导肺泡上皮细胞向间质细胞转化,肺泡上皮细胞间质转化是肺纤维化的重要发病机制之一。     

开胸患者术后72小时内强化呼吸道管理的临床效果

随着医学的发展,对肺癌、食管癌、贲门癌要求根治的手术越来越高。然而开胸手术风险高,创伤大,术后并发症居高不下。在开胸术后诸多的并发症中,呼吸道并发症占居首位,一旦出现,不仅给患者带来病情变化,并且在一定程度上影响手术效果和增加费用支出。因此,做好围术期呼吸道强化管理,对提高手术成功率,争取按时恢复至关重要。     

柴胡皂甙D通过调控TGF-β1/Smads信号通路抑制人胚肺成纤维细胞增殖和胶原蛋白产生

目的研究柴胡皂甙D(SSD)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)增殖、转分化以及TGF-β1/果蝇抗生物皮肤生长因子蛋白家族(Smads)信号通路的影响。方法体外培养HELF,设立正常对照组、 1 ng/mL TGF-β1处理组、 1 ng/mL TGF-β1联合0.5μmol/L SSD处理组、 1 ng/mL TGF-β1联合1μmol/L SSD处理组、 1 ng/mL TGF-β1联合2μmol/L SSD处理组。采用CCK-8法检测HELF的增殖情况,荧光定量PCR法检测Smad2、 Smad3、 Smad7的mRNA水平, Western blot法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、 1型胶原蛋白(Col1)、 Smad2、 Smad3、磷酸化的Smad2(p-Smad2)、 p-Smad3、 Smad7的蛋白水平。结果与正常对照组比较, TGF-β1处理组细胞增殖明显, Col1、α-SMA蛋白水平增加, Smad2和Smad3 mRNA和蛋白磷酸化水平显著增加, Smad7 mRNA和蛋白水平显著降低;与TGF-β1处理组比较,不同浓度SSD处理组细胞增殖降低,可逆转以上各指标的改变,呈一定的量效关系。结论 SSD通过调控TGF-β1/Smads信号通路,发挥抗肺纤维化的作用。     

经纤维支气管镜肺活检结合经皮针吸活检诊断肺周围型病变

目的：评价经纤维支气管镜肺活检结合经皮穿针吸活检（ＰＮＡＢ）对肺周围型型结节或肿块（ＰＰＮ／Ｍ）的诊断价值。方法：１２８例ＰＰＮ／Ｍ患者先行ＴＢＰＢ,结果阴性者加做ＰＮＡＢ。另６０例ＰＰＮ／Ｍ患者先做ＰＮＡＢ,阴性者再做ＰＢＰＢ。结果：单做ＴＢＰＢ和ＰＮＡＢ的诊断率分别为７０％和８５％,ＴＢＰＢ结合ＰＮＡＢ的诊断率达９５％。显示两种方法的诊断率均与病灶的大小和部位有关。结论：ＴＢＰ和ＰＮＡＢ对ＰＰ     

鼠IL-28重组腺病毒体外抗肺癌活性研究

目的 将已成功构建的mIL-28A重组腺病毒载体转染至肺腺癌细胞LA795,并对其抗肺癌细胞生物学活性进行研究.方法 将Ad-pshuttle-cmv-mIL-28A转染至LA795细胞,用PCR、免疫细胞荧光、Tunel、Annexin V及MTT法等进行检测.结果 LA795细胞转染Af-mIL-28A后,MiL-28A的mRNA基因表达明显增加,且细胞内明显表达IL-28蛋白,LA795细胞凋亡增多,细胞生长明显抑制.结论 成功构建的mIL-28A重组腺病毒载体转染至肺腺癌细胞LA795后表达IL-28,且可能通过促进细胞凋亡而抑制其一定程度的生长.

Abstract：

Objective To transfect the recombinant mIL-28A adenovirus vector into lung adenocarcinoma cell line LA795 and research its anticancer activity. Methods Transfected the constructed mouse IL-28(mIL-28) recombinant adenovirus vector into LA795 cell line, detected with PCR, immunocytal fluorescence, Tunel, Annexin V and MTT. Results Transfected with rAd-mlL-28A into the LA795 cells, mIL-28A gene expression products mRNA increased obviously, IL-28 expression was detected in cells obviously,apoptosis cell number increased, and the growth of LA795 cells transfected with rAd-mIL-28A were inhibited obviously. Conclusion The recombinant miL-28A adenovirus vector we have constructed, which expresses IL-28 when transfected to lung adenocarcinoma cell line LA795, inhibits growth of carcinoma cell to some extent, and may work by promoting the apoptosis of cancer cells.     

不同部位和大小的肺癌动态增强CT表现

目的 :探讨非小细胞肺癌的大小和部位对动态增强CT表现的影响。方法 :对 37例周围型肺癌 (直径≤ 30mm组11例 ,直径 >30mm组 2 6例 ) ,2 4例中央型肺癌 (直径均在 30mm以上 ) ,术前行 3min内的动态增强CT扫描 ,术后肺癌组织行Ⅷ RAg的免疫组化染色。 结果 :直径≤ 30mm组的周围型肺癌到达高峰强化的延迟时间均在 90s,峰值后CT值下降快 ;而直径 >30mm组到达高峰时间均在 6 0s,且峰值后CT值下降慢。前者的平均高峰增强值 (4 6 .6 4± 8.0 5 )Hu显著高于后者(32 .6 5± 7.38)Hu (t=5 .13,P <0 .0 0 1) ;前者的微血管密度高于后者 ,但差异无显著性 (t=2 .12 ,P >0 .0 5 )。 5 4 % (13/ 2 4 )的中央型肺癌强化高峰在 6 0s,平均高峰强化值为 (2 6 .5 6± 3.0 1)Hu ,显著低于周围型肺癌 (t=5 .72 ,P <0 .0 0 1)。 4 2 % (11/ 2 4 )的中央型肺癌的动态增强CT呈缓慢升高 ,且最大强化值均在 16Hu以下。结论 :大小和部位不同的肺癌动态增强表现有区别 ,但它们是有规律可循的。     

肺癌纤维支气管镜标本端粒酶活性的检测

目的：探讨纤维支气管镜检查活检、刷检标本端粒酶活性检测对肺癌诊断的价值。方法：应用TRAP-PCR-ELISA方法检测39例纤维支气管镜活检标本、29例刷检标本端粒酶活性并分析其诊断肺癌的价值。结果：24例肺癌活检标本端粒酶活性水平与癌颖组相近,但明显高于炎症组。端粒酶活性的检测敏感性为83.3%,特异性为80.0%,准确性为82.1%。不同病理类型肺癌的端粒酶活性检出率差异无显著性。刷检标本中端粒酶活性阳性检出率58.3%,端粒酶活性阳性标本的端粒酶活性水平在不同病理分型间差异无显著性,而病理分级组间有显著差异。结论：端粒酶活性是肺癌诊断的分子生物学标志物之一。与组织细胞学检查相结合可提高肺癌的早期诊断率。     

肺癌活检小标本ICM-DNA定量分析在诊断中的应用

目的:为了进一步了解肺癌细胞生物学行为,评价肺小标本ICM-DNA含量检测对肺癌的诊断价值.方法:选取纤维支气管镜活检肺小标本95例,其中肺癌组64例包括鳞状上皮细胞癌(简称鳞癌)45例,腺癌9例,小细胞未分化癌10例,肺良性病变(炎症)组31例.将肺小标本石蜡包块以5μm连续切片,分别作HE染色和Feulgen染色,后者进而用国际标准化CAS-200型图像细胞仪(ICM)检测DNA含量.分析指标包括DNA质量、DNA指数(DI)、增殖指数(PI)、S期百分比、核面积、直方图类型及倍体状况等.结果:肺癌组细胞核DNA质量、DI、PI、S%和核面积等指标均明显高于肺炎症组(P＜0.05或P＜0.01);肺癌组DNA直方图类型主要为Ⅲ型和Ⅵ型(占79.7%),未见Ⅰ型;而肺炎症组相反,无1例为Ⅲ型和Ⅵ型,多呈Ⅰ型改变(90.3%),两组之间有显著差异(P＜0.01);两组的细胞核DNA倍体状况存在极显著差异(P＜0.01),肺癌组多为异倍体,异倍体检出率达96.9%,而肺炎症组均为二倍体.以异倍体为标准,结合S期百分比,诊断肺癌的敏感性为96.7%,特异性达100%.结论:应用ICM检测纤维支气管镜小标本DNA含量快速、精确、重复性好.不仅有助于进一步研究肺癌生物学行为,而且更有助于提供客观、准确、可靠的鉴别良恶性病变的重要辅助诊断指标.     

氨基胍对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及机制

目的探讨氨基胍(AG)对博莱霉素(BLM)诱导SD大鼠肺纤维化中的干预作用。方法将116只SD大鼠随机分成5组:正常对照组、BLM组、AG组、激素组和AG+激素组。经气道给予BLM或生理盐水后,每天给不同组别相应的药物或生理盐水连续28 d。分别在第7,14,21,28天随机处死各组老鼠5只。处死前,取肺泡灌洗液用硝酸还原酶法测一氧化氮(NO)的表达。用碱水解法测肺组织中羟脯氨酸的含量及用RTPCR检测肺组织中转化生长因子(TGF)-β1 mRNA的相对表达量。结果①与BLM组比较,AG组、激素组和AG+激素组支气管肺泡灌洗液(BALF)中NO的表达在第7,14天下降(P<0.05),肺组织羟脯氨酸含量减少(P<0.05)。②各治疗组肺组织TGF-β1 mRNA的相对表达量和BLM组比较在7,14,21 d明显增加(P<0.05)。结论 AG可以降低BLM诱导的肺纤维化程度,作用机制可能是通过抑制TGF-β1的基因表达。