间质性肺病支气管肺泡灌洗液免疫活性成分研究

特发性肺纤维化 (ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃｐｕｌｍｏｎａｒｙｆｉｂｒｏｓｉｓ,ＩＰＦ)和结节病 (ｓａｒｃｏｉｄｏｓｉｓ,Ｓａｒ)是受国内外学者关注的 2种不明原因的间质性肺病 (ｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｌｕｎｇｄｉｓｅａｓｅ ,ＩＬＤ)。早期的病理改变为弥漫性肺泡炎 ,以后肺间质中纤维组织逐步增多 ,最终导致广泛肺纤维化 ,形成蜂窝肺。已有学者认为 ,其发病机制与免疫功能紊乱有关 ,在疾病的活动期 ,给予积极的肾上腺皮质激素和 (或 )免疫抑制剂治疗 ,可望收到良好的疗效[1] 。本研究应用双盲对照法检查一组间质性肺病患者支气管肺泡…     

尿激酶对肺纤维化干预作用及对TGF-β1的影响

目的研究尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）对肺纤维化模型的干预作用和对TGF-β1的影响。方法45只SD雄性大鼠随机分成3组,每组15只: (1)干预组：经气管灌注博莱霉素,随后从第2天起每两天腹腔给予尿激酶干预;(2)模型组：气管内灌注博莱霉素;(3)对照组:气管内滴入生理盐水。模型组与对照组腹腔给予生理盐水。所有动物第28天全部处死。肺组织经苏木精-伊红(HE)、Masson胶原染色来评价肺泡炎和肺纤维化。对肺泡灌洗液进行细胞计数、分类,酶联免疫吸附测定( ELISA)法检测灌洗液中TGF-β1含量。结果尿激酶干预组中性粒细胞百分比为（3.1±1.8）,低于模型组（9.3±4.1）,高于对照组（2.5±1.3）,有统计学意义(P＜0.01) 。干预组肺泡炎程度为（0.9±0.7）分,低于模型组（1.7±0.6）分,高于对照组（0.2±0.4）分,有统计学意义(P＜0.01)。干预肺纤维化程度（1.1±0.7）分,低于模型组的(2.0±0.8)分(P＜0.01)。干预组TGF β1含量在第28天为(42.5±1.7)ng/mL,低于模型组的(45.6±0.6)ng/mL (P＜0.01),差异有统计学意义。结论尿激酶能减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化,可能通过抑制TGF-β1来实现     

血清内皮细胞特异性分子1与降钙素原联合检测在慢性阻塞性肺疾病急性加重细菌感染中的临床意义

目的 探讨血清内皮细胞特异性分子1(ESM-1)与降钙素原（PCT）联合检测在细菌感染导致慢性阻塞性肺疾病急性加重（AECOPD）中的临床意义。方法 选择2019年1月至2021年12月在上海市金山区亭林医院呼吸内科住院治疗的AECOPD患者200例作为研究对象,依据痰培养报告分为两组：细菌性感染组113例、非细菌性感染组87例。以同期在上海市金山区亭林医院行健康体检的志愿者100例作为对照。采集AECOPD患者及健康对照组血清,用ELISA法检测血清ESM-1和PCT表达水平。绘制ROC曲线,评价ESM-1、PCT单独或两者联合检测对AECOPD细菌感染的诊断价值。结果 经抗感染治疗前,AECOPD细菌性感染组患者的血清ESM-1和PCT水平均高于AECOPD非细菌性感染组及健康对照组（P均<0.05）;经抗生素治疗后,AECOPD细菌性感染的患者血清ESM-1和PCT表达水平均下降,与治疗前比较差异均有统计学意义（P均<0.05）。用血清ESM-1、PCT单独诊断AECOPD细菌感染的AUC为0.902、0.828;ESM-1最佳临界值为1.326μg/L,诊断AECO...     

肺纤维化进程中肺泡上皮细胞进行性减少的动态变化:P16,CyclinD1,CDK4的参与及作用?

背景:研究发现肺纤维化进程中肺组织肺泡上皮细胞进行性减少,但其原因不明.课题组设想在肺纤维化进程中可能存在P16,CyclinD1,CDK4蛋白异常表达,P16-CyclinD1/CDK4细胞周期调控通路异常可能参与肺纤维化肺泡上皮细胞减少过程.目的:研究P16,CyclinD1,CDK4在博来霉素诱导的小鼠肺纤维化肺组织中的动态表达及其意义.方法:向6周龄KM小鼠气管内注射博莱霉素制备肺纤维化模型,对照组给予等体积的生理盐水.分别于造模后的第3,7,14和28天,苏木精-伊红染色观察肺组织的病理形态改变;免疫组织化学及Western blot检测肺组织P16,CyclinD1,CDK4蛋白的表达.结果与结论:模型组小鼠肺组织出现典型的纤维化改变,肺组织P16,CDK4蛋白表达随时间增加而增强,CyclinD1蛋白表达随时间增加而减少.与对照组比较,模型组P16,CDK4蛋白阳性细胞数增多,P16蛋白量于造模后14,28 d多于对照组(P<0.01),而CDK4蛋白量于造模后7,14,28 d多于对照组(P<0.05);CyclinD1蛋白阳性细胞数及蛋白量于造模后3,7 d多于对照组(户<0.05),而28 d则明显少于对照组(P<0.05),造模后14 d,模型组的CyclinD1蛋白阳性细胞数多于对照组,而蛋白量少于对照组(P<0.05).说明在肺纤维化进程中存在P16,CyclinD1,CDK4蛋白异常表达,P16-CyclinD1/CDK4细胞周期调控通路异常可能是肺纤维化肺泡上皮细胞减少的重要原因.     

肺癌支气管肺泡灌洗液标本端粒酶活性检测的价值

目的:探讨纤维支气管镜检查所取支气管肺泡灌洗液(BALF)标本端粒酶活性检测对肺癌诊断的价值.方法:应用TRAP-PCR-ELISA方法及TRAP-银染法分别检测60例支气管肺泡灌洗液标本端粒酶活性及活性水平并分析对肺癌诊断的价值.结果:41例肺癌组标本端粒酶活性及活性水平与癌疑组相近,但明显高于炎症对照组.端粒酶活性的检测敏感性83.8%,特异性69.6%,准确性80.4%.周围性肺癌端粒酶活性阳性率83.3%,虽较中央性肺癌组高,但两者比较无显著性差异.病理确诊的肺癌BALF端粒酶活性阳性率83.8%,明显高于刷检细胞学检查48.6%,两者联合平行试验敏感性91.7%,特异性60.5%.用TRAP-银染法测定端粒酶活性率与定量法相近,但端粒酶活性水平较低的标本定型分析为弱阳性,条带不清晰或条带较少.结论:端粒酶活性是肺癌的标志物之一,用定量法检测支气管肺泡灌洗液标本端粒酶活性与组织细胞学检查相结合,可提高肺癌的早期诊断率.     

鼠肺细胞的分离纯化及原代培养

目的:建立一套可靠的鼠肺细胞分离、纯化和培养技术,用于体外研究间质性肺病的发病机制及治疗方法.方法:采用胰酶消化出生后2 d SD大鼠肺组织块及SD大鼠肺泡灌洗液, 经差时贴壁法, 分离、纯化红皮鼠肺成纤维细胞(lung fibroblast, LF)和SD大鼠肺泡巨噬细胞(pulmonary alveolar macrophage,AM), 并进行原代培养.用波形蛋白(Vimentin)、 CD14细胞免疫荧光染色、蛋白质印迹和电镜对所分离的细胞进行鉴定.结果:所得细胞产量大、纯度高.细胞免疫荧光染色LF细胞波形蛋白染色阳性而CD14染色阴性;AM细胞则相反.扫描电镜观察可见肺成纤维细胞有微绒毛,细胞间连接成网状,蛋白质印迹结果显示波形蛋白表达.结论:该方法是一种可靠的红皮鼠肺成纤维细胞及大鼠肺巨噬细胞的分离纯化培养技术, 可用于间质性肺病(interstitial lung disease, ILD)的发病机制及治疗方法的体外研究.     

间充质干细胞外泌体调控氧化应激减轻D 氨基半乳糖/脂多糖诱导的急性肝损伤

目的: 探讨小鼠间充质干细胞来源的外泌体(exosome, Exo)对D-氨基半乳糖(D-galactosamine hydrochloride, D-GalN)/脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导的急性肝损伤治疗作用及可能机制。方法: 提取小鼠间充质干细胞,通过流式细胞术和细胞分化实验进行验证。超速离心法提取间充质干细胞外泌体,透射电镜和蛋白质免疫印迹对其鉴定,纳米颗粒追踪分析测定外泌体粒径电位。通过活性氧荧光探针考察外泌体减轻活性氧损伤的功能。CCK-8检测外泌体对肝细胞的保护作用。腹腔注射D-GalN/LPS制备急性肝损伤小鼠模型,考察外泌体对D-GalN/LPS诱导的急性肝损伤小鼠的治疗作用。结果： 原代间充质干细胞表达CD29和CD44两个标志蛋白,而不表达CD31和CD117,具有成骨分化能力。间充质干细胞外泌体为具有典型杯状结构的纳米囊泡,表达CD9和CD63两个标志性蛋白。与PBS组相比,干细胞外泌体能够减轻L02细胞内的活性氧水平,提高L02细胞活性,且外泌体本身对L02细胞活性没有影响。与PBS组相比,Exo治疗组能够改善肝脏组织损伤,降低转氨酶水平,调节丙二醛、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶的水平。结论： 在细胞实验中,间充质干细胞外泌体能够减少活性氧,保护肝细胞的活性;在动物实验中,间充质干细胞外泌体能够下调氧化应激相关蛋白的表达,促进肝脏组织修复。     

Th 细胞亚群在肺纤维化小鼠中的动态表达

目的：研究辅助性T细胞亚群（Th17、Th1和Th2）在肺纤维化模型小鼠的动态表达。方法40只雄性C57／BL6小鼠随机均分为两组,分别经气管一次性注入生理盐水（A组）或博来霉素溶液0.04ml（5mg／kg,B组）,于第3、7、14和28天处死。采用HE和Masson染色评价小鼠肺组织病理形态变化;检测肺组织中羟脯氨酸（HYP）含量;应用流式细胞术分析脾脏中Th1、Th2和Th17细胞的动态变化。结果A组小鼠肺泡形态正常,肺组织HYP含量无明显变化。B组小鼠第7天时即有部分肺泡结构破坏,肺组织可见大量炎性细胞及红细胞浸润,伴细束状胶原纤维增生;第7、14、28天肺组织HYP含量高于A组（P＜0．05）;与A组比较,B组4个时间点的Th17和Th2细胞数增加,Th1细胞数减少（P＜0．05）。结论Th17、Th2和Th1细胞与特发性肺纤维化密切相关,可能参与其发病机制。     

弥漫感染性猫抓病1例报告

弥漫感染性猫抓病１例报告镇江医学院附属医院（２１２００１）内科郑金旭张蓝石朱文芳马国尔病理科吴建农张云兴１临床资料患者女性，５３岁，农民。因畏寒发热、咳嗽伴乏力纳差１个月，１９９７年２月１３日入院。患者１个月前无明确诱因出现畏寒发热，体温波动于３７?..