多效生长因子在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨多效生长因子（pleiotrophin,PTN）mRNA及其蛋白在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法采用原位杂交和免疫组化染色方法,检测结直肠癌组织和正常结直肠组织中PTN mRNA及其蛋白的表达,并分析其与结直肠癌患者临床病理特征的关系。结果结直肠癌组PTN mRNA及其蛋白的表达阳性率分别为63.9%（53/83）和60.2%（50/83）,均高于（P=0.008,P=0.002）正常对照组的40.7%（22/54）和33.3%（18/54）。结直肠癌组织中PTN mRNA及其蛋白的表达与肿瘤分化程度和TNM分期均有关（P〈0.05）,Ⅲ～Ⅳ期者和低分化者的表达阳性率均较高;而与年龄、性别及肿瘤类型均无关（P〉0.05）。结论 PTN mRNA及其蛋白在结直肠癌组织中高表达,其可能参与了结直肠癌的浸润和转移。PTN可作为预测结直肠癌转移和预后的指标之一。     

胆囊良性肿瘤诊疗的临床思维

胆囊良性肿瘤较少见,仅在胆囊造影或超声检查时发现胆囊壁的异常影像,所以胆囊良性肿瘤几乎均表现为胆囊息肉样病变（polypoid lesions of thegallbladder,PLG）。较多的临床研究资料已证实某些胆囊良性肿瘤具有癌变倾向。随着临床影像学检查的发展,如B超、CT应用非常普及,近年开展的内镜超声、螺旋CT薄层、MRI及PET对胆囊良恶性肿瘤的鉴别有一定效果,但是临床上定性诊断仍然困难,最终确诊有赖于病理检查。因为胆囊癌的预后极差．所以胆囊良性肿瘤对于胆囊癌早期诊治尤为重要。     

CDX2基因干扰对人结肠癌细胞在裸鼠体内生长的影响

目的:探讨CDX2基因表达对结肠癌细胞生长的影响。方法:将体外转染CDX2-shRNA慢病毒、空慢病毒载体及无转染的人结肠癌细胞系SW480和HT29接种到裸鼠皮下,制备皮下移植瘤模型,观察各组移植瘤的生长情况,28d后处死裸鼠,剥取移植瘤称重,并分别用免疫组化、Westernblot检测各组移植瘤组织Ki-67与CDX2的表达。结果:与各自空白对照组(无转染的SW480或HT29细胞移植)比较,两个干扰组(转染CDX2-shRNA慢病毒的SW480或HT29细胞移植)移植瘤生长速度均明显加快、移植瘤质量明显增加(SW480:679.11mgvs.379.36mg;HT29:715.78mgvs.427.07mg),瘤组织Ki-67蛋白表达水平明显升高、CDX2蛋白表达明显下调(均P0.05)。两个阴性对照组(转染空慢病毒载体的SW480或HT29细胞移植)的各指标与各自空白对照组间均无明显差异(均P0.05)。结论:抑制CDX2基因的表达能促进人结肠癌细胞的裸鼠体内的生长,故CDX2可能是一种重要的抑癌基因。     

腹腔镜对比传统开放手术治疗直肠癌临床效果的Meta分析

目的：对比腹腔镜直肠癌手术和传统开腹手术的临床效果。 方法：检索近20年来发表的关于比较腹腔镜与传统开腹手术治疗直肠癌临床效果的随机对照试验。按纳入标准筛选文献,用Review Manager 5.1软件行Meta分析。 结果：最终纳入14个随机对照试验,共2 114例患者,其中腹腔镜组1 111例,开腹组1 003例。腔镜组与传统开腹组比较,术中出血量少、胃肠功能恢复时间及下床活动时间早、住院时间缩短、伤口感染减少,差异均有统计学意义（均P<0.05）;手术并发症发生率包括输尿管损伤、尿潴留、肠梗阻、吻合口瘘,切口疝,两组组间差异均无统计学意义（均P>0.05）;两组在淋巴结清扫数量、标本长度、环周切缘阳性率、局部复发、切口或穿刺口种植转移、远处转移、3,5年总体生存率、3,5年无病生存率等指标上均无统计学差异（均P>0.05）。 结论：腹腔镜直肠癌手术术中出血少、术后恢复快、住院时间短,肿瘤根治效果与传统开腹手术相仿,可作为治疗直肠癌的标准术式。     

肠系膜上动脉压迫综合征的诊断与治疗

目的探讨肠系膜上动脉压迫综合征的诊断和治疗方法。方法对笔者所在医院2003年8月至2010年8月期间收治的16例肠系膜上动脉压迫综合征患者的临床资料进行回顾性分析。结果 16例肠系膜上动脉压迫综合征患者的临床表现主要为反复发作性进食后上腹部胀痛或隐痛、呕吐且呕吐后症状可缓解（12例）,恶心、反酸及嗳气（13例）,饭后饱胀感或腹胀（16例）,以及食欲不振（13例）。16例患者均行上消化道造影检查明确诊断;3例行腹部彩色多普勒超声检查符合诊断;4例行CT检查排除十二指肠周围占位性病变。16例患者均先行非手术治疗,其中10例患者的腹痛缓解,呕吐消失,好转出院;另6例因治疗无效而行手术治疗,其中行Treitz韧带松解加十二指肠空肠侧侧吻合术2例,行十二指肠空肠Roux-en-Y吻合术3例,行胃大部分切除、胃空肠吻合术（BillrothⅡ式）1例。术后除1例行Treitz韧带松解加十二指肠空肠侧侧吻合术的患者仍有间断腹胀伴恶心外,其余患者均痊愈。结论肠系膜上动脉压迫综合征主要表现为上腹部胀痛、呕吐、食欲不振及消瘦,确诊依赖于上消化道造影。对其治疗首选非手术治疗,对非手术治疗无效者可采用手术治疗,其中十二指肠空肠Roux-en-Y吻合术是一种有效、易行的手术方式。     

hTERT|CEA及CMV启动子在人结肠癌细胞株中的转录活性比较

目的：比较人端粒酶催化亚单位（hTERT）,癌胚抗原（CEA）及巨细胞病毒（CMV）启动子在人结肠癌细胞株LoVo和SW480中的转录活性。 方法：设计引物应用PCR法从人结肠癌基因组中克隆hTERT和CEA启动子;用双酶切和PCR法切除原始载体pLVX-EGFP-3FLAG中的CMV启动子后,将hTERT,CEA启动子与该载体重组,构建出重组质粒pLVX-hTERTp-EGFP-3FLAG和pLVX-CEAp-EGFP-3FLAG;将上述两种质粒及原始载体（含CMV启动子）分别瞬时转染人结肠癌细胞株LoVo和SW480后,检测两种细胞株绿色荧光蛋白表达。 结果：经PCR,酶切及测序鉴定,克隆及载体构建完全正确。CMV,hTERT及CEA启动子的转录活性（绿色荧光细胞数/总细胞数）在LoVo细胞中依次为54.7%,33.0%,9.5%;在SW480中依次为16.5%,10.1%,8.5%,差异均有统计学意义（均P<0.05）。 结论：在人结肠癌细胞株中,转录活性以CMV启动子最高,hTERT启动子次之,CEA启动子最低。该结果可为结肠癌的靶向性基因治疗研究提供参考。

     

进一步提高胆囊癌诊治的总体水平

原发性胆囊癌是胆道系统最常见的恶性肿瘤,女性多于男性。该病发病隐匿,临床症状不典型,早期诊断率低,恶性程度高,预后极差,病理类型以腺癌为主。虽然外科手术技术不断进步,但手术切除率仍低。所以努力提高胆囊癌早期诊断率,开展以手术为主的综合治疗措施,把握手术适应证,选择合理术式,是进一步提高胆囊癌诊治总体水平的重要措施。     

缺氧微环境对TSST-1诱导的抗CEA+结肠癌LoVo细胞免疫治疗的调控

目的:研究缺氧微环境对靶向性表达的超抗原中毒性休克综合征毒素-1(toxic shock syndrome toxin-1,TSST-1)激活人外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocyte,PBL)对CEA+结肠癌LoVo细胞杀伤作用的调控.方法:包装、收集前期构建的缺氧反应元件( hypoxia-response elements,HRE)和癌胚抗原启动子CEAp联合调控的逆转录病毒载体pLEGFP-N1-5HRE-CEAp-TSST-1-linker-CD80TM(简称pLEGFP-N1-5HCTC),感染CEA+ LoVo细胞及CEA -宫颈癌HeLa细胞,获取稳定表达跨膜型超抗原TSST-1-linker-CD80TM蛋白(TC融合蛋白)的肿瘤细胞.用缺氧模拟试剂CoCl2模拟缺氧微环境,RT-PCR和Western blotting分别检测缺氧调控下TSST-1的表达水平.将健康人PBL与pLEGFP-N1-5 HCTC感染后的肿瘤细胞共培养,3H-TdR掺入法检测缺氧调控下PBL的增殖能力,MTT法检测缺氧调控下PBL对肿瘤细胞的杀伤效应.结果:pLEGFP-N1-5HCTC病毒成功感染CEA+LoVo细胞(5HCTC/LoVo),RT-PCR和Westernblotting证实,缺氧可上调5HCTC/LoVo细胞中TSST-1mRNA和蛋白的表达,CEA - HeLa细胞在常氧和缺氧条件下均无TSST-1的表达.缺氧可上调5HCTC/LoVo细胞诱导的人PBL的增殖(7.3×103 vs 3.1×103cpm,P＜0.05),缺氧环境下PBL对5HCTC/LoVo细胞的杀伤率明显高于常氧环境(82.69％vs 53.50％,P＜0.01);CEA - HeLa细胞不能刺激PBL增殖,PBL对其也无抑制作用.结论:缺氧微环境可显著上调靶向性表达的超抗原TSST-1诱导的对CEA+ LoVo细胞的杀伤作用.     

胃癌术后肠功能恢复影响因素及术后早期予以灌肠疗效的研究

目的:探讨胃癌术后肠功能恢复的影响因素,并研究术后早期予以灌肠对肠功能恢复的作用.方法:收集2015年6月至2015年12月行胃癌手术患者临床资料,定义术后3日内肛门自主排气为早期肠功能恢复组,余为非早期肠功能恢复组.采用单因素及非条件Logistics回归分析(逐步法)研究影响胃癌术后早期肠功能恢复的因素.按灌肠情况将研究对象分为早期灌肠组、非早期灌肠组及未灌肠组,比较三组患者术后肠功能恢复情况.结果:共纳入102例,单因素分析显示术前合并糖尿病、是否行腹腔镜手术、吻合方式、是否早期启动肠内营养和是否灌肠为早期肠功能恢复的影响因素.非条件Logistic回归分析以上影响因素,结果证实是否行腹腔镜手术、吻合方式、是否早期启动肠内营养和是否灌肠是影响胃癌患者术后肠功能恢复的因素.比较三组不同灌肠情况患者一般资料及手术资料,均未见统计学差异(P＜0.05).早期灌肠组、非早期灌肠组及未灌肠组患者术后自主排气时间分别为(3.61 ±0.83)d、(4.09±1.12)d、(4.58 ±0.91)d,P＜0.05,术后自主排便时间分别为(4.11±1.85)d、(4.96± 1.52)d、(5.74±1.50)d,P＜0.05.而对三组患者术后住院天数、术后总体并发症比较时未见明显差异(P＞0.05).结论:影响胃癌术后肠功能恢复因素为是否行腹腔镜手术、吻合方式、早期启动肠内营养和灌肠.灌肠有助于胃癌患者术后排气排便,但是否早期灌肠对肠道功恢复未见明显差异.     

shRNA干扰CDX2基因表达对裸鼠结直肠癌肝转移瘤的影响

目的:建立人结直肠癌裸鼠肝转移瘤模型,探讨干扰尾型同源盒基因2(caudal-related homeobox 2,CDX2)基因表达对结直肠癌肝转移瘤的影响.方法:通过慢病毒载体将CDX2-shRNA体外转染人结直肠癌细胞SW480、HT29,筛选建立稳定干扰CDX2基因表达细胞株和阴性病毒细胞株;将稳定干扰CDX2基因表达的结直肠癌细胞(SW480-KD、HT29-KD)、空白对照细胞(SW480-CON、HT29-CON)和阴性对照细胞(SW480-NC、HT29-NC)接种到裸鼠脾下极包膜内,建立裸鼠结直肠癌肝转移瘤模型,每天称量裸鼠体质量并观察其摄食、活动及精神情况;50 d后处死裸鼠,分别从大体水平以及镜下观察肝转移瘤情况.结果:成功构建裸鼠结直肠癌肝转移模型,H-E染色确认为结直肠癌肝转移.各细胞干扰组(SW480-KD、HT29-KD)裸鼠体质量明显低于相应空白对照组和阴性对照组[SW480-KD:(15.02±2.00) vs (18.00±2.48)、(18.03 ±2.05) g;F=3.761,P ＜0.05;HT29-KD:(15.39 ±2.16) vs (17.96 ±2.48)、(18.30±1.87) g;F=3.721,P ＜0.05].SW480-KD组肝转移瘤数目明显多于SW480-CON组和SW480-NC组[(57.83 ±22.56)vs (29.50±16.90)、(28.20±15.40)个;F=4.197,P＜ 0.05];HT29-KD组肝转移瘤数目明显多于HT29-CON组和HT29-NC组[(56.83 ±29.16) vs (26.40±12.76)、(21.00±11.50)个;F=4.467,P＜0.05)].结论:脾注射法裸鼠肝转移模型可作为体内研究基因功能的理想模型;干扰CDX2基因表达可促进结直肠癌SW480和HT29细胞在体内的转移.