正交设计法优化复方党参中多糖的提取工艺

目的:考察复方党参中多糖的最佳提取工艺。方法:超声波辅助法提取复方党参中的多糖,苯酚-硫酸法测定多糖的含量。通过正交设计方法,以多糖含量和浸膏得率为考察指标,优化多糖的提取工艺。结果:四因素中提取次数对实验结果影响最大,为多糖提取工艺的主要影响因素,提取温度为次要因素,其次为溶剂量和提取时间。结论:复方党参多糖最佳提取工艺为药材提取温度40℃、液料比6∶1、提取20min、提取3次。     

中医证候的拓扑结构表征理论数据验证

中医证候存在动态演化过程,并且具有点集拓扑结构的数学内涵。以脾气虚证候与脾阳虚证候为例,运用临床数据,对其构成要素、发生过程与拓扑结构特征进行验证,结果表明,脾气虚证候与脾阳虚证候的构成要素存在着与临床数据不相符合的地方,主要是构成要素的缺少,证候的发生过程与拓扑结构特征、临床数据与理论研究结果相吻合,运用临床数据修正后的证候点集拓扑结构表达公式可以用F(证候)=YyV(Yy+Yx)V(Yy+Xy)V(Yy+Yx+Xy)V(Yy+Xy+Xx)V(Yy+Yx+Xx)V(Yy+Yx+Xy+Xx)进行表达。运用这一方法,可以指导并进行中医证候生物学意义上结构的研究,而且可以使证候"数学结构→物理结构→生物结构"的研究路径更为清晰,并且为主要中医理论的现代语言描述提供新的概念。     

石见穿总酚酸对大鼠肝纤维化的治疗作用及其机制研究

目的观察石见穿总酚酸对大鼠实验性肝纤维化的治疗效果,探讨其作用机理。方法采用复合造模法造成大鼠肝纤维化模型,观察石见穿总酚酸对实验性肝纤维化大鼠肝纤维化血清标志物透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)含量及病理形态学的影响以及血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)以及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)活性的变化。结果在治疗肝纤维化大鼠30 d后,血清HA,LN,PⅢNP含量明显降低,肝组织病理损害明显减轻,胶原纤维明显减少,肝细胞坏死明显减轻,与未治疗组组比较有显著性差异(P<0.05)。在治疗15 d和30 d后,各个组别的各种酶的活性均趋向正常组。结论石见穿总酚酸对实验性大鼠肝纤维化有一定的治疗作用,有望开发成为具临床应用价值的新药,其可能通过改变体内氧化还原状态而起作用,为进一步研究治疗肝纤维化的有效机制提供依据。     

维泰醇对小鼠宫颈癌U14细胞抗肿瘤作用的研究

目的:研究维泰醇对宫颈癌U14细胞的抑制增殖与诱导凋亡作用,以探讨维泰醇的抗肿瘤作用机制。方法:采用MTT法检测维泰醇对宫颈癌U14细胞增殖抑制率的影响;采用AO/EB双染色法观察细胞凋亡形态并计算其凋亡率;免疫细胞化学法检测U14细胞内Bcl-2,Bax、Survivin蛋白表达水平。结果:维泰醇对U14细胞增殖有明显的抑制作用,呈剂量及时间依赖性;维泰醇能引起细胞凋亡,并出现典型的凋亡形态。维泰醇下调U14细胞内Bcl-2、Survivin蛋白表达水平,上调Bax蛋白表达水平。结论:维泰醇可抑制宫颈癌U14细胞增殖并诱导细胞凋亡;维泰醇抗宫颈癌的作用机制可能与其下调Bcl-2、Survivin蛋白的表达及上调Bax蛋白的表达有关。     

基于QbD理念的安宫牛黄丸整体混合终点评价方法研究

大品种中药-安宫牛黄丸混合终点判断是关键的技术问题。基于质量源于设计(QbD)理念的控制策略,研究提出一种整体混合终点的判断方法,为含矿物质中药混合提供方法学。采用激光诱导击穿光谱(LIBS)技术获得安宫牛黄丸混合中间体的光谱数据。结合移动窗相对标准偏差法(MWRSD)法,朱砂、雄黄和珍珠粉为整合研究指标,通过比较相邻混合时间光谱的差异,快速评价整体混合过程。雄黄、朱砂和珍珠粉3个药味的混合过程并非完全一致,但在混合的最后一个阶段,3个药味均达到了混合均匀;得到建议混合终点。采用LIBS过程技术建立的微区时序分析方法,实施过程控制。所建立的方法无需标准光谱库,具有分析快速、近似无损、无需复杂的样品前处理的等特点,为大品种中药制剂的质量研究提供新思路。     

科研思维融入药理学实验教学的实践

目的 将科研思维融入中医学专业本科生药理学实验教学中,评价创新教学实践对学生科研能力的提升情况,并对此次创新教学实践进行深入思考和展望。方法 作者在这次实践教学中,采取多种举措：改变教学方式,介绍最新科研成果;提供实验主题,鼓励学生自行设计实验;改变药理学实验课的考核方式,旨在将科研思维引入药理学实验课的教学中。结果 发现将科研思维融入药理学实验教学的创新实践对于提高学生的自学能力、分析和解决问题的能力,培养独立思考的能力及创新的思维有积极的作用。同时,这种教学方法极大地丰富了实验课教学内容,有助于调动学生学习的积极性。结论创新教学不仅促使学生掌握了扎实的理论基础,还培养了学生严谨的科研态度和科研诚信思想,为学生未来从事相关工作打下了坚实的基础。     

双参宁心胶囊通过调控线粒体ATP敏感性钾通道减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的:观察双参宁心胶囊通过调控线粒体三磷酸腺苷(ATP)敏感性钾通道来减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤。方法:成年雄性SD大鼠56只,随机分为假手术组(sham),模型组(model),双参宁心组(SSNX)给予SSNX 90 mg·kg-1,线粒体ATP敏感性钾通道(MitoKATP)通道抑制剂组(SSNX+5-HD),给予SSNX 90 mg·kg-1和5-HD 5 mg·kg-1;每组各14只。除假手术组外其余3组均阻断冠状动脉左前降支(LAD)45 min,分别于再灌注后3 h后处死,氯化2,3,5-三苯基四氮唑(TTC)染色观察心肌缺血和梗死面积,苏木素-伊红(HE)染色观察心肌组织损伤程度。试剂盒检测血清乳酸盐脱氢酶(LDH),肌酸激酶(CK)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)的活性。透射电镜下观察心肌细胞线粒体及线粒体自噬超微结构变化,荧光探针法检测心肌细胞中线粒体膜电位水平的变化。结果:与sham组比较,model组心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率明显增大,心肌组织排列紊乱,疏松,个别心肌纤维断裂,心肌细胞坏死,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著升高(P0. 01),线粒体膜电位显著降低(P0. 01),透射电镜观察线粒体结构破坏明显。与model组比较,SSNX组心肌组织排列有序,少数区域细胞水肿轻度变性,心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率显著降低,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著降低(P0. 01),线粒体膜电位升高(P0. 01),SSNX+5-HD组心肌组织排列轻度无序,部分区域细胞水肿轻度变性,心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率显著降低,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著降低(P0. 01),线粒体膜电位升高(P0. 01)。而SSNX+5-HD组较SSNX组,血清中CK,CK-MB,LDH活性显著升高(P0. 01),心肌梗死面积与心肌缺血面积百分率显著增大,线粒体膜电位有所降低(P0. 05)。结论:双参宁心胶囊通过开放线粒体ATP敏感性钾通道来保护大鼠心肌缺血再灌注损伤。     

丹参素对低氧低糖损伤神经细胞的影响

目的 评价丹参素对低氧低糖诱导人拟神经元细胞SH-SY5Y损伤的影响.方法采用细胞培养于人工无糖培养基、1.5% O_2和5% CO_2环境建立低氧低糖损伤SH-SY5Y细胞模型.以SRB方法测定存活细胞数,相差和荧光显微镜观察细胞凋亡,采用细胞培养上清乳酸脱氢酶(LDH)活性反映细胞受损伤程度,并测定了细胞内脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性以反映细胞氧化胁迫状态.结果 低氧低糖损伤24h,存活细胞数量明显减少,SH-SY5Y细胞皱缩、吖啶橙和溴化乙啶双染可见明显核皱缩、碎裂及凋亡小体出现,细胞培养上清LDH水平明显升高,细胞内MDA含量明显升高,SOD水平降低,表明细胞受到严重的氧化胁迫损伤.丹参素可抑制细胞内SOD活性的降低,对上述各损伤指标均有明显的干预作用,且具有浓度依赖性.结论 丹参素对低氧低糖所致SH-SY5Y神经瘤细胞损伤有明显保护作用,有望成为有临床应用价值的神经保护剂.     

姜黄素降低环磷酰胺致微核形成率

目的 研究姜黄素对化疗药物环磷酰胺所致微核形成的影响,测定了小鼠血清超氧化物歧化酶、丙二醛、总抗氧化能力、还原型谷胱甘肽等指标的变化。方法 50只小鼠随机分成5组,即正常组,模型组,高剂量组（50mg／kg）,中剂量（10mg／kg）,低剂量（2mg／kg）。正常组即阴性对照组,只喂基础饲料;模型组为环磷酰胺阳性对照组,单次尾静脉注射环磷酰胺1mL／只,浓度为100mg／kg;试验组在环磷酰胺给药前后24h尾静脉注射姜黄素各1次1mL／只,浓度分别为50、10、2mg／kg。末次给药24h后将小鼠拉颈处死,每只小鼠取股骨1枚作微核观测,并眼眶取血,经离心分离制得小鼠血清作其他指标检测。结果 姜黄素对环磷酰胺所引起的微核发生率有着显著的抑制作用。血清中超氧化物歧化酶活性和丙二醛含量明显降低,总抗氧化能力和还原型谷胱甘肽含量明显提高。结论 提示姜黄素不仅能改善环磷酰胺在肿瘤治疗中所导致的氧化还原状态的失衡,而且能减少由环磷酰胺所诱发的微核形成。