线粒体在肝细胞凋亡中的作用及中药对其保护作用

肝细胞凋亡在肝纤维化中有着非常重要的作用,而许多促细胞凋亡信号作用于线粒体,能够改变线粒体通透性,继而导致其蛋白释放入胞质,由此构成线粒体介导的凋亡途径.中药及其有效成分能够从抗氧化、稳定线粒体膜流动性、抑制线粒体膜通透性转变及维持线粒体膜电位稳定等方面发挥线粒体保护作用,从而减少肝细胞的凋亡而发挥抗肝纤维化的作用.现就肝细胞凋亡的线粒体途径及中药保护进行综述.     

方剂关键科学问题的思考

针对中药复方的现代研究至今没有取得突破性进展,以及不能回归到临床,指导中医师遣方用药进行思考,通过深入分析中药复方的作用方式及特点,认为合理的复方评价体系还未真正建立,是制约中药复方研究的瓶颈,有必要密切联系生命学科的发展另辟蹊径,创新中药复方的研究思路和方法.     

β2受体激动剂影响糖皮质激素治疗支气管哮喘作用的实验研究

目的通过研究β2受体激动剂(β2AA)对哮喘豚鼠血淋巴细胞糖皮质激素受体(GR)功能的影响,探讨β2AA影响糖皮质激素治疗支气管哮喘的作用.方法50只豚鼠,随机分为对照组(10只),沙丁胺醇组(10只),地塞米松组(10只),地塞米松加沙丁胺醇组(20只).采用放射性配基结合分析法测定哮喘豚鼠血淋巴细胞GR的亲和力(kd)及受体最大结合容量(Bmax),用凝胶阻滞分析法测定GR与糖皮质类固醇反应片段(GRE)的结合能力.结果沙丁胺醇组GR与GRE结合值与对照组比较有极明显升高(P＜0.01),地塞米松组GR与GRE结合值与对照组比较也极明显升高(P＜0.01),沙丁胺醇加地塞米松组(7日,14日)GR与GRE结合值与对照组比较则极明显下降(P＜0.01),具有时间依赖性.结论β2AA可降低GR与GRE的结合能力,削弱糖皮质激素的作用,长期应用β2AA治疗哮喘是不恰当的.     

大鼠海马N-甲基-D天门冬氨酸受体的放射配基结合测定法

利用非标记N－甲基－D天门冬氨酸受体（NMDA）特异性阻断L－犤G－３H犦－谷氨酸与NMDA受体的结合，选择合适的放射配基结合反应时间、温度、放射性配基的浓度，笔者建立了大鼠海马NMDA受体分析方法，现报告如下。１材料和方法１．１动物与试剂SD大鼠，体重２００～３００g，由江苏省实验动物中心提供。０．３２mol／L蔗糖缓冲溶液，５０mmol／LTris－acetate缓冲液（TAB，pH７．４），L－犤G－３H犦－谷氨酸（Amersham公司）比活度１．２２１GBq／mmol，用前TAB稀释，NMDA（Sigma公司），GF／B玻璃纤维滤膜（Whatman公司…     

银耳孢糖增强肿瘤辐射效应的初步探讨

荷S_(180)肉瘤小鼠腹膜腔内注射银耳孢糖(TSP)200mg/kg·d×/d。在第3、5和7天注药后40分钟干荷瘤局部照射X射线5Gy。TSP和照射都能明显抑制肿瘤生长;二者合用的抑瘤率在停药后1、5、10天比照射组提高50.00％、32.52％、6.54%。TSP能提高荷瘤小鼠特別是受照鼠的脾重、脾有核细胞数和胸腺细胞~3H-TdR自发掺入率,并拮抗受照后NK细胞活性的下降。     

枸杞提取物对小鼠视网膜色素上皮细胞下沉积物形成的抑制作用

目的 研究枸杞提取物对高脂饮食及氢醌诱发的小鼠视网膜色素上皮(RPE)细胞下沉积物形成的抑制作用.方法 8个月龄的雌性C57BL/6小鼠40只.8只予正常饮食,作为年龄对照组;32只高脂肪饮食喂养6个月后,饮水中加入氢醌(0.8％)继续饲养3个月,随机分为模型对照组(8只)、治疗组(分高剂量、中剂量、低剂量组,每组8只),治疗组以枸杞浸膏灌胃,高剂量3.75 g/(kg·d)、中剂量2.50 g/(kg·d)、低剂量1.25 g/(kg·d),每日1次,持续3个月.观察期满处死动物,摘取眼球.电镜观察RPE细胞下沉积物及Bruch膜;real time-PCR、western blot检测半胱氨酸组织蛋白酶B(Cat B)、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)mRNA转录及蛋白表达.结果 造模后RPE细胞损害、RPE细胞下沉积物形成均较年龄对照组明显增加,模型对照组Bruch膜较年龄对照组明显增厚,枸杞提取物能减轻RPE细胞损害、减少沉积物的形成、抑制Bruch膜的增厚.Cat B、Cys C mRNA及蛋白表达模型对照组较年龄对照组增强,枸杞提取物能下调模型小鼠视网膜Cat B、Cys C的表达,随剂量的增加而作用加强,具剂量依赖关系,以Cys C表达下调更显著.结论 枸杞提取物能减轻高脂饮食和氢醌引起的模型小鼠RPE细胞损害,抑制RPE细胞下沉积物形成及Bruch膜增厚,机制可能是减少活性氧介质的产生,下调Cat B、CysC的表达,并使这2种酶的综合作用向Cat B作用倾斜有关.     

丹皮酚体外对肝星状细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨丹皮酚对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的影响。方法 HSC加入丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48 h后,MTT比色法和锥虫蓝染色法检测HSC的存活率。HSC与丹皮酚33.2 mg·L-1分别作用6,12,24,36和48 h,锥虫蓝染色法检测HSC的存活率。HSC与丹皮酚1.66～69.7 mg·L-1作用48 h用细胞乳酸脱氢酶(LDH)活性测定试剂盒检测细胞上清中LDH活性。丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1与HSC作用24 h分别用光学显微镜、Hoechst 33258染色和流式细胞术检测HSC细胞形态、细胞凋亡和凋亡率;丹皮酚1.66～49.8 mg·L-1作用48 h用流式细胞术检测细胞周期。结果 MTT实验结果表明,丹皮酚16.6～49.8 mg·L-1对HSC增殖具有明显抑制作用,且具有浓度效应关系(r=0.955,P<0.05),作用48 h时IC50值为105.4 mg·L-1。锥虫蓝染色实验结果表明,丹皮酚对HSC存活率的抑制作用不仅具有浓度效应关系(r=-0.936,P<0.05),浓度为33.2 mg·L-1时还具有时间效应关系(r=-0.965,P<0.05)。丹皮酚16.6～69.7 mg·L-1作用48 h无明显细胞毒性。流式细胞仪检测结果显示,丹皮酚8.3～49.8 mg·L-1作用24 h能显著促进HSC细胞凋亡(P<0.05),且具有浓度效应关系(r=0.920,P<0.05)。丹皮酚33.2和49.8 mg·L-1作用48 h可调节细胞周期,G0/G1期细胞增加(P<0.01),S期细胞减少(P<0.01),具有浓度依赖性(r=0.980,P<0.05)。结论丹皮酚具有促进HSC凋亡和抑制HSC增殖的作用,可能是其抗肝纤维化作用机制之一。     

脂多糖/Toll样受体4信号转导与肝纤维化的研究进展

Toll样受体4(TLR4)是一种模式识别受体,能与革兰阴性细菌细胞壁的主要成分脂多糖结合,启动天然免疫反应和获得性免疫反应,有效对抗病原微生物的感染。肝中所有实质细胞和非实质细胞都能表达TLR4。近年来,越来越多的研究表明,肝中的一些细胞如肝星状细胞、枯否细胞和树突状细胞等能通过各自表面的脂多糖/TLR4信号转导途径,释放多种细胞因子,引起一系列病理变化,共同参与肝纤维化的发生和发展过程。本文就对脂多糖/Toll样受体4信号转导与肝纤维化的研究进展作一综述。     

以中药诱导肿瘤休眠作为肿瘤防治策略的探讨

肿瘤休眠中断引起的转移复发是肿瘤患者死亡的主要原因。肿瘤休眠是肿瘤细胞在宿主体内持续存在又没有明显生长的一种状态,这种状态的打破最终引起肿瘤转移复发。肿瘤休眠使得在无法根除肿瘤细胞的情况下,允许通过诱导其休眠防止肿瘤复发或通过靶定存活机制、耐药机制来诱导残留休眠细胞死亡;休眠标志物的发现还有助于判断预后。因此肿瘤休眠研究日益受到重视。目前肿瘤休眠疗法在临床抗癌治疗中已获得明显的进展。中医药在肿瘤患者术后或放化疗后的无病阶段使用极为普遍,中医药有可能通过诱导或维持肿瘤休眠状态,从而防止肿瘤复发。