AML-M1相关TCR Vβ克隆性增殖T细胞的研究

目的：了解急性髓细胞白血病M1亚型（AML－M1）患者外周血TCR Vβ亚家族T细胞的克隆性分布特点。方法：采用RT－PCR扩增9例M1患者外 周血的单个核细胞的TCR Vβ24个亚家族基因，分析其TCR Vβ亚家族的利用情况。PCR产物进一步经基因扫描分析，了解其CDR3长度以判断T细胞的克隆性。结果：不同标本中可检测到2－5个Vβ亚家族T细胞，以Vβ2、Vβ3、Vβ17和Vβ19为常见，并在Vβ2、Vβ3、Vβ5、Vβ8、Vβ9和Vβ19中发现克隆性生长T细胞。结论：M1病人外周血TCR Vβ亚家族T细胞表达呈现明显的选择性和克隆性增殖情况，这可能与M1细胞相关抗原有关，且克隆性增殖Vβ亚家族分布以个体特异性为主。     

血栓性血小板减少性紫癜3例及文献复习

血栓性血小板减少性紫癜(TTP)是一种罕见的致命性疾病。我们收治了3名TTP患者,现报告并行文献复习如下。1 病例介绍 病例1 患者,女,58岁,退休工人,因头痛、阵发性意识障碍、红茶色尿18天,疑为“爆发型肝炎”于1993年8月8日入本院传染病科。体查:T     

AML-M2a细胞体内外诱导TCR Vβ亚家族T细胞克隆性增殖情况的研究

为了解AML-M2a细胞体外诱导TCRVβ亚家族T细胞的表达和克隆性增殖情况，利用混合淋巴细胞/肿瘤细胞培养（MLTC）体外获取AML-M2a细胞诱导的T细胞，并以RT-PCR扩增4例M2a患外周血单个核细胞和4例AML-M 2a细胞诱导的T细胞中的24个TCRVβ亚家族基因的互补决定区3（CDR3），阳性产物进一步经基因扫描分析从而确定AML-M2a细胞体内外诱导的TCRVβ亚家族T细胞的克隆性增殖情况，结果显示：4例AML-M2a细胞体内外诱导的Vβ亚家族T细胞表达情况相似，其中3例AML-M2a细胞体内外诱导的一个或两个Vβ亚家族T细胞呈克隆性增殖特点，结论：AML-M2a细胞体内外选择性诱导不同的TCRVβ亚家族T细胞克隆性增殖可能是患T细胞对AML-M2a细胞相关抗原刺激所产生的一种特异性细胞免疫反应，体内外环境的不同对Vβ亚家族T细胞的克隆性增殖情况有一定的影响。     

CD3+、CD4+和CD8+ T细胞Vβ亚家族中PD-1免疫表型检测方法的建立

 目的：建立分析CD3⁺、CD4⁺和CD8⁺ T细胞Vβ亚家族中免疫抑制性受体程序性细胞死亡蛋白1（PD-1）分子免疫表型的方法,从而了解人体外周血T细胞谱系中PD-1表型细胞的分布频率。方法：收集健康个体（HI）外周血10例,利用抗CD45、CD3、CD4、CD8、PD-1等多色荧光流式单抗,以及T细胞受体（TCR）Vβ谱系试剂盒[IOTest^® Beta Mark TCR Vβ Repertoire Kit,共8管,每一管均为FITC和PE偶联的复合抗体（A~H）,每一管复合抗体包含3个TCR Vβ亚家族的抗体],检测T细胞亚群TCR Vβ亚家族中PD-1的分布情况。结果：在10例HI的检测中,CD3⁺、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺ T细胞亚群中检测的24个TCR Vβ亚家族总和符合试剂盒所提供的Quick Reference Card数据,初步结果显示,HI中CD3⁺ T细胞主要优势TCR谱系是Vβ2、Vβ3、Vβ8、Vβ9、Vβ5.1、Vβ13.1和Vβ13.2;而在CD3⁺CD4⁺ T细胞中的优势利用主要集中在Vβ2、Vβ3、Vβ8、Vβ9、Vβ5.1和Vβ13.1;在CD3⁺CD8⁺ T细胞中则主要为Vβ1、Vβ2、Vβ3、Vβ9、Vβ13.1和Vβ13.2等亚家族。进一步分析显示PD-1⁺细胞在HI的CD3⁺、CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺ T细胞24个TCR Vβ亚家族中均可以检测到,PD-1⁺细胞在T细胞各亚群中分布频率有个体差异,在CD4⁺ T细胞中,以Vβ5.2⁺ T细胞的分布频率较高,而在CD8⁺ T细胞中,以Vβ11⁺和Vβ13.6⁺ T细胞的分布频率较高。结论：本项工作利用健康人样本成功建立了多色荧光流式细胞术检测T细胞亚群TCR Vβ谱系中免疫抑制性受体PD-1分子免疫表型的方法,为进一步应用于分析白血病等病人TCR Vβ谱系的免疫抑制特点提供了新方法。     

TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病病人T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点

目的了解TCRζ缺陷的急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)病人外周血T细胞中Elf-1、Zap-70和FcεR Iγ基因的表达特点。方法采用SYBR GreenⅠ荧光定量PCR和相对定量分析法检测10例TCRζ缺陷的AML病人外周血CD3+T细胞中Zap-70、Elf-1和FcεR Iγ基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,10例健康成人作为对照;采用相对定量公式:2-△Ct×100%,计算Zap-70、Elf-1和FcεR Iγ基因的表达水平。结果 TCRζ缺陷的AML病人外周血T细胞中Elf-1基因的表达水平(中位数8.526%)明显低于健康对照组(中位数33.237%)(P<0.001),而FcεR Iγ基因的表达水平(中位数2.571%)则高于健康对照组(中位数0.958%)(P=0.019),Zap-70基因在两组中的表达水平没有显著性差异,但均与TCRζ基因的表达水平呈正相关。结论 TCRζ缺陷的AML病人T细胞中Elf-1基因的低表达可能是导致AML病人TCRζ基因缺陷性表达的原因之一,而FcεR Iγ基因的高表达则可能是在一定程度上缓解了TCRζ基因缺陷性表达所带来的T细胞免疫异常。     

自身免疫性溶血性贫血病人T细胞的寡克隆性

自身免疫性溶血性贫血 (ＡＩＨＡ)是机体免疫功能紊乱所引起的溶血性贫血 ,主要由于体内存在自身抗体而诱发。近年有研究发现ＡＩＨＡ病人的Ｔ细胞激活有异常[1,2 ] ,但有关资料甚少。本文利用ＲＴ ＰＣＲ和基因扫描 (Ｇｅｎｅｓｃａｎ)等方法分析Ｔ细胞受体(ＴＣＲ)Ｖβ 2 4个     

HLA不相合异基因骨髓移植后早期造血功能障碍一例

我们曾遇到 1例接受异基因骨髓移植 (ａｌｌｏ ＢＭＴ)的慢性粒细胞性白血病患者在移植物植活、造血功能重建后早期出现造血功能障碍 ,经加大环孢素Ａ(ＣｓＡ)的用量 ,并联合应用糖皮质激素和粒细胞刺激因子 (Ｇ ＣＳＦ)治愈 ,随访至今已 2年 ,患者带慢性局限型移植物抗宿主病 (ＧＶＨＤ)存活 ,现将本例报道如下。一、病例报告1.一般资料 :患者为男性 ,2 0岁 ,1997年 12月确诊为慢性粒细胞性白血病 (ＣＭＬ)慢性期。经用羟基脲治疗 2个月 ,ＭＡ(米托恩醌 ,阿糖胞苷 )及ＨＯＡＰ(三尖杉酯碱 ,长春新碱 ,阿糖胞苷 ,泼尼松 )方案一疗程 ,血象及…