自体肿瘤浸润淋巴细胞治疗晚期胰腺癌并发的癌性胸腔积液

癌性胸腔积液是临床常见疾病，但是胰腺癌合并的癌性胸腔积液极少见，且胰腺癌化疗效果不理想，单药有效者只有氟脲嘧啶（5-FU）、丝裂霉素（MMC）、吉西他滨（GEM）等少数几种药物，有效率仅20％～23％。本研究应用自体胸腔积液中的肿瘤浸润淋巴细胞（tumorinnltrating lympholyte，TIL）治疗1例晚期胰腺癌合并的癌性胸腔积液，仅回输1次，达完全缓解。现报道如下。     

11例少见的结外淋巴瘤临床分析及文献复习

本文报道11例少见的结外淋巴瘤,结合国内文献对6种结外淋巴瘤的发生率、临床表现、诊断标准、病理类型及治疗和预防进行临床分析,以期提高对特殊淋巴瘤的认识,以防误诊和漏诊。     

进展期胃癌患者O~6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶蛋白表达与预后的关系

目的 O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA-methylt ransferase,MGMT)是修复烷化剂对DNA损伤的关键酶,同时也是烷化剂类抗肿瘤药物耐药的主要因素之一。p53蛋白是p53抑癌基因的蛋白产物,其基因突变与肿瘤的发生、发展密切相关。文中探讨了MGMT蛋白在进展期胃癌患者肿瘤组织中的表达与临床病理参数及预后的关系,以及MGMT蛋白与p53蛋白在进展期胃癌组织中表达的相关性及对预后的影响。方法采用免疫组织化学法检测158例进展期胃癌切除标本中MGMT的表达水平,并分析其与胃癌临床病理特征及联合分析MGMT蛋白表达和临床检测指标p53蛋白表达与患者预后的关系。结果进展期胃癌组织中MGMT蛋白的阳性率为76.58%(121/158)。MGMT蛋白表达情况与患者的肿瘤部位及大小、肿瘤分期、分化程度、神经是否侵犯、脉管是否存在癌栓均无相关性(P>0.05)。Spearman相关系数分析显示MGMT与p53的表达呈负相关:r=-0.2534,P=0.0023。COX回归多因素分析显示MGMT(相对危险度:1.339,P=0.1363)和p53(相对危险度:1.174,P=0.4082)不能作为生存时间的独立预测指标。MGMT(+)、p53(-)组的总生存期显著长于MGMT(+)、p53(-)组,差异有统计学意义(P<0.05)。p53(+)、MGMT低表达组的总生存期要显著高于p53(+)、MGMT高表达组(P<0.05)。结论 MGMT蛋白的表达缺失及p53蛋白的表达增强可能共同参与了胃癌的发展过程,联合分析MGMT和p53蛋白的表达情况对于进展期胃癌患者的预后评估可能具有一定的参考价值;而MGMT蛋白低表达相较高表达时的总生存期略长可能存在其他影响因素。     

胡桃醌-PLGA纳米粒制备及对A375恶黑细胞的体外抗肿瘤作用

目的:制备胡桃醌(juglone,Jug)聚乳酸-羟基乙酸(poly lactic-co-glycolic acid,PLGA)纳米粒(Jug-PLGA-NPs),并考察其理化性质、体外释放特征及对A375细胞的体外影响。方法:采用乳化挥发法制备Jug-PLGA-NPs,对其粒径、包封率、载药率以及体外释放特征进行考察;荧光显微镜观察PLGA-NPs在体外细胞的摄取情况,小动物活体成像仪观测PLGA-NPs在BALB/c荷瘤裸鼠尾静脉注射后体内的分布;用噻唑蓝(thiazolyl blue tetrazolium bromide,MTT)比色法检测其对A375细胞增殖抑制作用,流式细胞仪进行细胞凋亡率及细胞周期检测;蛋白免疫印迹法检测蛋白激酶B(protein kinase B,Akt),磷酸化-Akt(p-Akt),周期蛋白D1(cyclin D1)的表达情况。结果:制备的Jug-PLGA-NPs平均粒径为(149.6±21.5) nm,包封率为(68.39±2.51)%,载药率(5.07±0.98)%,具有良好的缓释特征。PLGA-NPs在体外细胞摄取和体内活体成像中具有良好的穿透和靶向性能。不同浓度Jug-PLGA-NPs均能明显抑制A375细胞增殖、促进细胞凋亡,呈明显时间浓度依赖性(P0.05),且48 h作用略优于等浓度Jug;其机制可能与调节Akt磷酸化水平,下调cyclin D1表达(P0.05),阻滞细胞于G0/G1期有关(P0.05)。结论:负载Jug的PLGA纳米微粒制备简便,具有良好的药物缓释、肿瘤靶向及抗肿瘤能力,为未来Jug的临床应用提供了一种新的药物剂型。     

PHA对CIK细胞体外扩增影响的研究

目的:观察植物血凝素PHA对细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokineinducedkillercells,CIK)体外扩增的影响。方法:在外周血单个核细胞定向诱导CIK细胞时加或不加PHA,观察细胞增殖的变化,流式细胞仪检测细胞的免疫表型,MTT法测定细胞的杀伤活性。结果:PHA能明显提高CIK细胞的扩增倍数及体外杀伤活性,P=0.041。结论:为CIK细胞的过继性免疫治疗提供一种新方法。     

60Co照射法饲养细胞的制备

目的 :选择合适的60 钴 (60 Co)照射剂量制备饲养细胞。方法 :采用 0Gy、2Gy、5Gy、1 0Gy、2 0Gy、30Gy的60钴 (60 Co)照射人的外周血单个核细胞 (PBMC) ,然后将其继续培养 ,加入CD3 单克隆抗体 (OKT3 )、白细胞介素 - 2(IL - 2 )、植物血球凝集素 (PHA)等 ,观察照射后第 1天、第 7天及第 1 5天细胞的凋亡情况及活细胞的细胞周期分布情况。结果 :γ射线照射剂量的加大会导致PBMC增殖能力的下降、存活细胞 (Annexin -V-/PI-)的减少、凋亡 (Annexin -V /PT-)与死亡 (Annexin -V /PT )的细胞数增加。结论 :采用60 Co照射法制备饲养细胞时 ,1 0Gy的照射剂量可能是最佳照射剂量     

74例皮肤黑色素瘤的预后及影响因素分析

目的 探讨皮肤恶性黑色素瘤的临床病理特征及预后相关因素。方法 回顾性分析南京鼓楼医院2010年1月至2016年6月收治的74例皮肤黑色素瘤患者的临床病理资料。所有入组患者均接受手术治疗,术后辅助治疗分为联合免疫治疗和未联合免疫治疗,免疫治疗方法包括细胞因子治疗和过继性免疫细胞回输疗法,未联合免疫治疗者包括术后未治疗的以及术后仅行辅助放疗或辅助化疗的患者。根据随访资料分析预后情况,并采用Cox比例风险回归模型分析影响预后的因素。结果 全组患者的中位生存期（OS）和无病生存期（DFS）分别为 32.0个月（95％CI： 20.2～43.8个月）和23.0个月（95％CI： 16.4～29.6个月）。Ⅲ期患者术后联合免疫治疗较未联合免疫治疗中位OS延长（38.0个月 vs. 10.0个月,P=0.002）。多因素分析显示,年龄、分期、淋巴结转移、原发灶溃疡和肿瘤Breslow厚度是影响皮肤黑色素瘤OS的独立因子,分期、淋巴结转移、原发灶溃疡和肿瘤Breslow厚度是影响DFS的独立因子。结论 年龄、分期、淋巴结转移、肿瘤Breslow厚度和原发灶溃疡均与皮肤恶性黑色素瘤患者的预后密切相关。Ⅲ期患者术后联合免疫治疗可延长OS。     

环磷酰胺联合热疗抑制血管生成作用的实验研究

目的探讨环磷酰胺联合应用热疗对体外血管内皮细胞的抑制作用。方法采用人微血管内皮细胞(HMVEC),用MTT和记数法观察不同浓度的环磷酰胺对HMVEC的增殖和出芽抑制活性。结果环磷酰胺浓度在0.4mg/mL以下时对内皮细胞存活率无明显影响,0.4～1.6mg/mL时,内皮细胞存活率明显下降并呈剂量依赖性;环磷酰胺以剂量依赖性方式抑制人微血管内皮细胞生成新生血管;环磷酰胺浓度0.1～1.6mg/mL时,对人肝癌HepGⅡ细胞株的细胞无细胞毒作用。结论环磷酰胺浓度0.4～1.6mg/mL时,明显抑制体外血管内皮细胞增殖和迁移,且呈剂量依赖性;与热疗有协同作用。     

COX-2和HER-2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的研究COX-2和HER-2在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测了68例非小细胞肺癌组织中COX-2和HER-2的表达水平,分析两者与临床病理参数之间的关系以及分析两者之间的相互关系。结果非小细胞肺癌中COX-2阳性表达率为54/68(79.41%),COX-2的高表达与病理类型及TNM分期相关(P<0.05);HER-2阳性表达率为26/68(38.24%),HER-2的表达与年龄相关(P<0.05)。HER-2与COX-2的表达强度之间呈显著正相关(r=0.2486,P=0.041)。HER-2阳性/COX-2高表达的NSCLC临床分期晚、淋巴结转移率高。结论COX-2在NSCLC中高水平表达并与HER-2密切相关,检测COX-2与HER-2的表达对NSCLC预后的判断可能具有重要价值。