恙虫病东方体58kDa热休克蛋白与47kDa外膜蛋白的基因嵌合及58-47嵌合基因在大肠杆菌中的表达

采用PCR方法 ,从恙虫病东方体Karp株基因组DNA中扩增 5 8kDa热休克蛋白的基因 ,将该基因分别与原核表达载体pQE30及 4 7kDa外膜蛋白的基因重组质粒 (pQE30 4 7)连接 ,构建pQE30 5 8及pQE30 5 8 4 7重组质粒 ,用重组质粒转化大肠杆菌。SDS PAGE显示 ,pQE30 5 8和pQE30 5 8 4 7转化的大肠杆菌分别产生一 5 8kDa重组蛋白和一 90kDa的双抗原 (5 8- 4 7)融合蛋白。免疫印迹分析显示Karp株免疫血清能特异识别 5 8kDa重组蛋白和 90kDa融合蛋白 ,90kDa融合蛋白既与 4 7kDa重组蛋白也与 5 8kDa重组蛋白的免疫血清特异反应 ,5 8kDa与 4 7kDa重组蛋白也被 90kDa融合蛋白免疫血清所识别。研究结果证明 5 8 4 7融合蛋白具有恙虫病东方体Karp株 4 7kDa外膜蛋白和 5 8kDa热休克蛋白的抗原特性     

一种用于温针灸的防烫保护装置

温针灸即在留针过程中将艾条段或艾炷固定在毫针针柄施灸,是治疗寒湿类疾病的常用方法。针对温针灸临床中易出现意外烫伤这一问题,我们设计了一种适用于身体任意部位的温针灸防烫保护装置。本装置分为艾药筒和夹持器两部分,两者呈一体化结构。艾药筒(包括半圆筒、铰链轴、凸耳、限位条、夹持臂、连接臂、扭簧、隔热垫、通孔)可以全方位地包裹燃烧的艾条段或艾炷,防止艾灰掉落而烫伤患者皮肤,并能有效地收集燃尽的艾灰;夹持器可以协助艾药筒固定于毫针上,增加温针灸操作的稳定性。本装置操作方便,设计新颖,可有效减少临床治疗中烫伤事故的发生,并节省时间和人力,兼具经济效益与生态效益,有助于温针灸的推广与使用。     

针灸治疗对躯体病增敏性疼痛干预的探讨

通过对躯体病增敏性疼痛临床特点、产生机理、治疗原则的认识,从现代医学和祖国传统医学病理、病机的角度来探讨针灸治疗对躯体病增敏性疼痛的干预,寻求针灸对躯体病增敏性疼痛干预有效性的科学理论依据。     

针刺配合盒灸治疗Hunt面瘫疗效观察

目的:观察针刺配合盒灸治疗Hunt面瘫的临床疗效。方法:将48例患者随机分为2组各24例,对照组采用单纯针刺方法,治疗组在普通针刺基础上,在患侧耳部加用盒灸。观察临床疗效与镇痛时间。结果:2组周围性面瘫、带状疱疹治愈率分别比较,差异均有显著性意义(P0.05),提示治疗组疗效优于对照组。镇痛起效时间治疗组明显短于对照组(P0.01),疼痛缓解平均时间治疗组明显少于对照组(P0.05),提示治疗组在镇痛方面优于对照组。结论:针刺加盒灸治疗Hunt面瘫疗效显著。     

口服碳酸钙制剂对孕产妇骨密度的影响

目的探讨孕产妇补充碳酸钙制剂对其骨密度的影响。方法36例孕第一胎妇女从孕20周开始通过膳食、膳食干预及碳酸钙补充摄入不同剂量的钙至产后45天。监测并比较孕中、孕末及产后期的血钙、碱性磷酸酶、尿羟脯氨酸、骨钙素及产后骨密度的差异。结果(1)传统膳食加40g／d奶粉补充的孕产妇产后骨密度虽优于传统膳食组,但明显低于奶粉加碳酸钙组;(2)奶粉加碳酸钙补充组的产妇腰椎骨密度明显高于奶粉组和传统膳食组,并维持至正常非常非孕同龄妇女的水平;(3)奶粉加碳酸钙补充组在孕末期、产后期的碱性磷酸酶活性、尿羟脯氨酸水均明显低于传统膳食组而骨钙素含量明显高于传统膳食组。结论(1)我国传统膳食钙摄入量约450mg／d,孕期的低钙摄入可导致产后骨密度下降;(2)孕期在传统膳食基础上补充40g奶粉／d,可使其产后骨密度优于传统膳食组,但不能维持骨密度至正常的水平;(3)奶粉加碳酸钙的联合补充,可使孕产妇产后骨密度明显高于传统膳食组和奶粉补充组,并维持其骨密度至正常水平。     

颈部肌群等长抗阻训练配合针刺及牵引疗法治疗颈型颈椎病的临床研究

目的:探讨颈部肌群等长抗阻训练配合针刺加牵引疗法治疗颈型颈椎病生理曲度异常的临床疗效。方法:将符合纳入标准的84例颈型颈椎病患者按照随机化原则平均分为2组,2组均给予针刺、牵引治疗,观察组另外给予颈部肌群等长抗阻训练。结果:治疗10次、20次后,2组症状体征积分、VAS、NDI评分均较治疗前明显降低(P0.01),观察组治疗10次、20次后状体征积分、NDI评分更低于对照组(P0.05,0.01),治疗10次后,2组VAS评分差异无统计学意义,治疗20次后,观察组VAS评分更低于对照组(P0.05)。2组颈椎生理曲度测量值较治疗前均明显增加(P0.05),观察组更大于对照组(P0.05)。2组临床疗效比较,观察组临床愈显率明显优于对照组(P0.05)。结论:颈部肌群等长抗阻训练有利于颈椎生理曲度异常的恢复或纠正。     

保存温度和时间对全血及血清中腺苷脱氨酶稳定性的影响

目的 探讨非抗凝全血未及时离心对血清中腺苷脱氨酶(ADA)活性的影响,以及离心后血清中ADA活性在不同温度和时间保存时的稳定情况,以指导ADA标本的合理留存.方法 非抗凝全血标本在不同保存时间(30min和1,2,3,4,6,8,24h)离心分离血清,测定ADA活性.另收集新鲜混合血清20份,分装后分别随机取1管,立即测定作为参考标准(即0h组),其余分别密封避光保存于室温(约22℃),2～8℃,-20℃和-80℃,按预定时间测定.全血组、血清组分别以30min组、0h组作为参考,求平均百分偏差,并与实验室最大允许变异(5.9%)比较,判断ADA活性在全血及血清的稳定情况.结果 非抗凝全血标本采集后以未离心状态保存于室温时,1h组ADA的活性偏倚为-4.17%,在5.9%的最大允许变异范围内,而2h组即升高至17.95%,8h组高达32.52%,呈升高趋势.离心后血清放置室温时,4h偏倚为-1.26%,8h偏倚为0.26%,在最大允许范围内;2～8℃保存时,8h组下降至-2.27%,16h组下降至-5.74%.之后各组ADA偏倚均超过-5.9%;-20℃保存24h组、-80℃保存15d组的ADA活性下降均超过最大允许变异.血清中的ADA活性随时间延长而呈下降趋势.结论 全血标本中ADA活性随时间延长而活性升高,在1h内进行离心分离血清为佳.离心后血清中ADA活性随时间延长呈下降趋势,标本离心后应尽快测定,血清室温保存时建议在8h内完成测定,血清2～8℃保存应在16h内完成测定.-20℃及-80℃冷冻保存并未能明显延长ADA活性的稳定性.     

改良后的长春恒晓脂蛋白相关磷脂酶A2活性检测试剂性能验证

目的评价改良后的长春恒晓脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)活性检测试剂在Beckman AU5800自动生化分析仪上的分析性能。方法收集2017年9~10月北京协和医院110例患者及40例表观健康人临床检测剩余血清,分别用于Lp-PLA2方法学比对及参考区间验证。参考CLSI相关文件,评价精密度、线性范围及常见干扰(结合胆红素、游离胆红素、血红蛋白和乳糜)。结果 Lp-PLA2活性测定试剂重复性CV(%)和实验室内不精密度CV(%)分别为1.2%~4.4%和1.5%~5.1%;线性范围为40~550U/L,相关系数(r)为0.998。低Lp-PLA2活性混合血清在试验浓度内的四种干扰物(乳糜≤1 000FTU,游离胆红素≤40mg/dl,结合胆红素≤40mg/dl,血红蛋白≤8g/L)对该试剂无干扰;高Lp-PLA2活性混合血清在试验浓度内的三种干扰物(乳糜≤3 220FTU,游离胆红素≤38.2mg/dl,结合胆红素≤38.2mg/dl)对该试剂无干扰。方法学比对中回归方程的决定系数R2为0.995,相关系数(r)为0.997。该实验室初步临床评估建立的LpPLA2活性的参考区间为68~374U/L。结论改进后的Lp-PLA2活性测定试剂的基本性能明显提高。     

早幼粒细胞白血病蛋白在髓系白血病细胞中的表达及对细胞增殖的影响

目的 探讨早幼粒细胞白血病(promyelocyte leukemia,PML)蛋白在髓系白血病中的表达及其对人慢性粒细胞白血病细胞系K562细胞增殖的影响.方法 采用实时荧光定量PCR技术检测了30例慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者及24名健康对照者外周血单个核细胞中PML mRNA水平的差异.构建PML的真核表达载体,转染K562细胞后筛选出稳定表达PML的细胞株,以稳定表达空载体的细胞为对照.四甲基偶氮唑盐(MTT)法和流式细胞术分别检测PML过表达对细胞增殖和细胞周期的影响,并进一步用反转录-PCR(RT-PCR)和蛋白质印迹技术(Westernblot)检测增殖相关因子c-myc和p27kip1(p27) mRNA水平以及蛋白表达水平的改变.最后检测了CML患者及健康对照者外周血单个核细胞中c-myc和p27 mRNA水平的差异.结果 CML患者外周血单个核细胞中PML mRNA表达水平(△Ct=9.02±0.74)明显低于健康对照组(△Ct =7.91 ±0.34),差异有统计学意义(t =5.07,P＜0.001).PML过表达能明显抑制K562细胞增殖,引起细胞周期G0/G1期阻滞.PML稳定表达的K562细胞中,c-myc的mRNA和蛋白表达水平降低,p27的mRNA和蛋白表达水平升高.CML患者外周血单个核细胞中c-myc的mRNA表达水平(△Ct =7.13 ±0.43)显著高于健康对照组(△Ct =9.35 ±0.82),差异有统计学意义(t=6.78,P＜0.001),而p27的mRNA表达水平(△Ct =4.56±0.58)则显著低于健康对照组(△Ct=3.29±0.92),差异有统计学意义(t=2.93,P＜0.01).结论 PML在CML患者中低表达,PML可能通过调节c-myc和p27的表达从而抑制白血病细胞的增殖.     

红外线及磁场对兔膝骨关节炎滑膜损伤的影响

目的 探讨红外线及磁场对兔膝关节骨性关节炎所造成的滑膜炎症的治疗效果。方法 24只健康雄性新西兰成年白兔采用管型石膏伸直位固定右后肢法复制膝骨关节炎模型。6周后解除石膏固定并随机分为模型组、红外线治疗组（红外组）、磁疗组及红外线和磁场联合治疗组（联合组），每组6只。解除石膏后即开始行物理因子治疗（模型组不作任何处理），分别于治疗开始后1、2、3周每组各处死2只动物，观察关节周围滑膜组织的大体改变，并切取造模肢体关节腔内滑膜组织行组织病理学检测。结果 联合组动物的滑膜病变及增生程度减轻，与红外组和磁疗组有显著性差异（P〈0．05），而红外组与磁疗组之间无显著性差异（P〉0．05）。结论 联合应用红外线和磁场能有效抑制骨关节炎的滑膜炎症，减轻组织破坏。