抑癌基因MTS1真核表达载体的构建及其在卵巢癌细胞系HO-8910中的表达

目的：构建多肿瘤抑制基因１（ＭＴＳ１）的真核表达载体,将其转入人源性卵巢癌细胞株ＨＯ－８９１０中,并得到稳定表达,为进一步研究其对卵巢癌细胞的影响奠定实验基础．方法：利用ＢａｍＨⅠ与ＥｃｏＲⅠ从ｐＵＣ１９－ｐ１６质粒上切下ＭＴＳ１ｃＤＮＡ片段并克隆到真核表达载体ｐｃＤＮＡ３上,构建成ＭＴＳ１真核表达载体ｐｃＤＮＡ３－ｐ１６;利用脂质体（Ｆｕ－ＧＥＮＥＴＭ６）介导的基因导入法将ｐｃＤＮＡ３－ｐ１６导入人源性卵巢癌细胞株ＨＯ－８９１０中;采用ＡＢＣ法对转染后的不同代数细胞进行免疫细胞化学检测,观察ｐ１６蛋白的表达．结果：成功构建了ＭＴＳ１真核表达载体ｐｃＤＮＡ３－ｐ１６,并进行酶切鉴定;转染后经Ｇ４１８筛选２ｗｋ出现阳性克隆８９１０－ｐ１６,并检测到其中有ｐ１６蛋白的稳定表达．结论：成功构建ＭＴＳ１真核表达载体ｐｃＤＮＡ３－ｐ１６,并可在人源性卵巢癌细胞株ＨＯ－８９１０中得到稳定表达．     

胰岛素样生长因子l及其受体对子宫肌瘤生长的影响

目的 测定胰岛素样生长因子1(IGF 1)及其受体(IGF 1R)在子宫肌瘤患者的子宫平滑肌瘤组织、血清中的表达,旨在探讨IGF 1、IGF 1R在子宫肌瘤发病机制中的作用。方法 采用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法,测定26例子宫肌瘤患者子宫平滑肌瘤、正常子宫平滑肌组织及血清中IGF1、IGF 1R的表达,每例患者充当组织测定的自身对照,选择30例健康妇女作为血清测定的对照组。结果 ①子宫平滑肌瘤组织中IGF 1、IGF 1R的表达较正常子宫平滑肌增强,进行统计学分析,两组差异有显著性(P<0.01)。②子宫肌瘤患者血清中IGF-1表达与对照组差异无显著性(P>0.05);IGF1R表达较对照组增强,两组差异有显著性(P<0.01)。结论 由此推测子宫平滑肌瘤组织中IGF 1、IGF 1R过度表达可能是子宫肌瘤发生的机制之一,IGF 1主要以自分泌、旁分泌作用方式促进肌瘤的生长,IGF 1可能是子宫肌瘤生长的调节因子。     

医学教育中创新能力培养的意义

医学生创新能力的培养是当前高等医学院校素质教育的主要内容.如何培养医学生的创新能力是值得广大医学教育工作者思考的一个重要问题.本文从医疗卫生事业的变革,教师的主导作用与学生的主体作用以及校园环境等方面对医学生创新能力的培养这一问题展开探讨.     

多肿瘤抑制基因对卵巢癌细胞周期的影响

0　引言　多肿瘤抑制基因 1(MTS1)是人们发现的第一个直接参与细胞周期调控的抑癌基因 [1 ,2 ] ,其编码蛋白为 p16蛋白 ,它通过与细胞周期素竞争性结合细胞周期素依赖激酶并使之失活 ,阻止细胞由 G1期进入 S期 ,从而抑制细胞分裂以及向恶变发展 .在以往的研究 [3]中我们构建了 MTS1的真核表达载体并将其转入卵巢癌细胞 .我们进一步探讨了 MTS1基因对卵巢癌细胞周期的影响 .1　材料和方法1.1　材料　 DMEM培养基购自 Gibco公司 ;胰蛋白酶购自Sigma公司 ;胎牛血清购自杭州四季青公司 ;人源性卵巢癌细胞系 HO- 8910由本实验室保存 ,经…     

孕妇血清中DAZ基因含量在21三体产前筛查中的应用

目的：探讨检测孕妇血清中胎儿DNA含量在临床产前诊断21三体综合征的可行性.方法：采用70例孕早期（8～12wk）的妇女作为研究对象,其中10例为孕21三体男胎的妇女,30例为孕正常男胎的妇女,30例为孕正常女胎的妇女,提取其外周血血清中游离DNA,应用TaqMAN探针实时定量PCR技术检测Y染色体上无精症基因DAZ和代表母体及胎儿总游离DNA的β-actin基因的含量.结果：定量PCR检出孕21三体组血清中的胎儿游离DNA含量是正常男胎组的2.2倍.孕正常女胎组血清中未检测到DAZ基因.结论：定量PCR技术检测胎儿游离DNA可以作为产前筛查男胎21三体的重要指标.     

活性氧调控的细胞凋亡信号

ROS一直被认为是毒性代谢的副产物,是一类损伤细胞的毒性物质。然而随着研究的深入,人们发现ROS是细胞信号通路中的重要中介体,在维持细胞内氧化平衡和细胞信号通路的转导上发挥着重要的作用。近年来关于ROS在细胞凋亡信号中的作用也逐渐受到重视,本文就ROS在凋亡信号中的作用机制作一综述。     

Wnt/β-catenin信号通路在肿瘤顺铂耐药研究中的作用

β-连环素（β-catenin,β-cat）作为一种重要的黏附分子,参与细胞间的黏附及Wnt信号通路的传导。Wnt通路中各成分的改变可导致β-catenin的变化,β-catenin稳定入核启动下游原癌基因的表达,在多种恶性肿瘤的发生、发展和预后中都发挥重要作用。对Wnt/β-catenin信号通路的研究有助于进一步揭示肿瘤顺铂耐药机制,有望为治疗恶性肿瘤提供一个新的靶点。现对Wnt/β-catenin信号通路在肿瘤顺铂耐药研究中的作用作一综述。     

子宫内膜异位症患者在位和异位内膜胰岛素样生长因子结合蛋白-3表达的研究

目的 研究子宫内膜异位症（EM）患者在位和异位内膜胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）的表达及其在EM发病机制中的作用。方法采用免疫组织化学法（SP法）对40例EM患者的异位子宫内膜和20例EM患者的在位子宫内膜IGFBP-3表达检测。结果（1）EM患者的在位和异位内膜,IGFBP-3主要表达于子宫内膜间质和腺上皮细胞胞浆和／或胞膜。（2）与对照组比较,EM患者异位内膜在分泌期IGFBP-3表达显著高于对照组（P=0031）。这种高表达只限于EM的Ⅰ期和Ⅱ期,而在Ⅲ期和Ⅳ期则无大的区别（P=O．411）。结论EM患者IGFBP～3显著表达,推测它可能参与EM的病理生理机制。     

Rab25基因siRNA对人卵巢癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,观察Rab25基因siRNA对卵巢癌细胞增殖及诱导凋亡的效果。方法:构建针对Rab25基因的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,通过RT-PCR检测Rab25的表达;MTT法观察细胞增殖,绘制细胞生长曲线;Hoechst33258荧光染色和透射电子显微镜观察细胞凋亡的形态学变化。结果:成功构建Rab25的siRNA,稳定转染靶细胞后可显著降低Rab25的表达,细胞生长速度减慢、增殖能力下降;荧光显微镜和电镜观察到细胞胞质浓缩、核凝聚、核碎裂和凋亡小体形成。结论:Rab25基因的siRNA能抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,为卵巢癌基因治疗开辟新途径。     

妊娠合并左室心肌致密化不全剖宫产术后脑梗死1例

心肌致密化不全(noncompaction of the ventricu-lar myocardium,NVM)是一种罕见的先天性心脏病,是以心室内异常粗大的肌小梁和交错的深隐窝为特征的一种心肌病,易诱发心力衰竭、心律失常、体循环栓塞.妊娠合并心肌致密化不全临床上更是罕见,国内尚未见报道.该病在妊娠期、分娩期及产褥期均可能使患者的心脏负担加重,可致孕产妇死亡.现介绍本院1例妊娠合并心肌致密化不全剖宫产术后脑梗死的病人,以提高对本病的认识.