血小板生成素基因注射促血小板生成作用的实验研究

目的：研究血小板生成素（ＴＰＯ）基因注射法对健康小鼠血板的促生成作用。方法：将带有ｈＴＰＯ ｃＤ－ＮＡ的ｐｃＡＮＤ３质粒按６μｇ／只剂量注射至７５只昆明小鼠后肢内侧肌肉内，每天断尾采血计数白细胞和血小板，观察不同时间的骨髓和脾脏组织学变化。周期末注射小鼠做为对照组。结果：在基因注入后的３ｄ起即出现血小弧和巨核细胞增多。在所观察的２７ｄ内，血小板有一可持续１周的高水平期，平均约为同期对照的１８４％，     

血小板生成素基因注射促血小板生成作用的实验研究

本文研究了 ＴＰＯ 基因注射法对健康小鼠血小板的促生成效果。将带有 ＴＰＯ ｃＤＮＡ 的ｐｃＤＮＡ３ 质粒按６０μｇ／只剂量注射到昆明小鼠后肢内侧肌肉内，每天断尾采血，对白细胞和血小板计数。一定时间内采股骨骨髓推片，计数单位面积内的巨核细胞数。以同期未注射的小鼠作为对照组。结果显示，在基因注入后的第三天起即出现血小板和巨核细胞增多。在所观察的三周内，血小板有一可持续一周的高水平期，平均约为同期对照的１８４％ ，最高可达三倍以上。计数高峰后血小板计数在高于对照水平上呈波动状态。小鼠脾脏出现以巨细胞增生和内皮细胞活化为特点的组织学变化，提示ＴＰＯ 具有刺激免疫功能的作用     

荧光抗体标记技术的改进

<正> 用荧光标记抗体,事先需将抗体纯化。而我们在实践中发现,直接标记全血清也会产生满意的效果,现报告如下。 取驴抗兔血清2ml,用pH7.4的0.01mol/LPBS稀释一倍后装入透析袋,放入FITC溶液(2.5mg FITC溶于200ml pH9.5的0.1mol/L碳酸盐缓冲液)中,4℃,24小时,继而通过Sephadex G-25(柱体积为70ml,洗脱液为pH7.4的0.01mol/L PBS)层析,除去游离荧光素和其他未标记成份,如此即得所需的标记抗体。     

ELEMENTAL STUDY OF GENE THERAPY WITH THROMBOPOIETIN

ＥＬＥＭＥＮＴＡＬＳＴＵＤＹＯＦＧＥＮＥＴＨＥＲＡＰＹＷＩＴＨＴＨＲＯＭＢＯＰＯＩＥＴＩＮＬｕＣｈｅｎｇｒｏｎｇ陆承荣ＺｈａｏＪｉａｎｚｅｎｇ赵建增ＷａｎｇＸｉａｏｐｉｎｇ王小平Ｌｉｕｌｉ刘丽ＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒｏｆＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌ...     

外源血小板生成素基因体内导入对循环免疫因子水平的影响

研究外源ＴＰＯ基因由质粒载体导入后,小鼠体内一些细胞因子的变化规律。方法：用脂质体将表达人ＴＰＯ的真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３／ｈＴＰＯ包裹后,注射到Ｂａｌｂ／ｃ鼠的后肢肌肉内,用ＥＬＩＳＡ法检测小鼠血 多种细胞因子的水平。     

大肠杆菌表达的新型肿瘤坏死因子衍生物中试发酵工艺的研究

基于肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）在体内外可以特异性地对多种肿瘤细胞产生杀伤作用［１］，但因其在治疗剂量下毒副作用大而限制了它的广泛应用［２］，我们利用基因工程技术获得了一种在大肠杆菌中高效表达的新型ＴＮＦ衍生物［３，４］，经药效学、急性毒性和慢性毒性等一系列动物实验研究证明，该ＴＮＦ衍生物（ｒｈＴＮＦαＤ１１ａ）与原型重组人ＴＮＦα（ｒｈＴＮＦα）相比，生物学活性大大提高，毒副作用显著降低，故很有可能成为临床治疗肿瘤的一种新型基因工程药物。为了给ｒｈＴＮＦαＤ１１ａ的进一步研究和应用打基础，我们对它的…     

血小板生成素cDNA转导减弱环磷酰胺对小鼠的毒性作用

本研究的目的在于了解利用TPO基因转导降低化学治疗的毒性作用进而增加治疗剂量的可能性。以编码人血小板生成素的真核表达质粒pcDNA3,空载体或生理盐水注射到小鼠体内,3天后给予环磷酰胺,检查动物的血像、精神状态以及大体解剖学改变。结果发现,接受TPO基因转导的小鼠的血小板计数明显高于对照组,未表现出像绝大多数对照鼠那样的脱毛现象,并且耐受了环磷酰胺的二次攻击。对照鼠在接受Cy第一疗程注射后再次攻击,约44％(8/18)的动物死亡。但是,TPO基因转导小鼠的血小板计数在此两周后的攻击之下与对照鼠已无明显差异。病理剖检发现,多数TPO基因转导鼠和未发生脱毛的对照鼠的胸腺体积增大,提示T淋巴细胞参与了对化疗相关的毛发脱落的预防。本研究说明,TPO基因转导能有效地减弱化学治疗的毒性作用。     

血小板生成素过量表达对T淋巴细胞增殖和分化的影响

目的　探讨ＴＰＯ（血小板生成素）基因导入对Ｔ 细胞增殖和分化影响的规律。　方法　将编码人ＴＰＯ 的质粒６０μｇ 用脂质体包裹后，经肌肉途径转导入Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠体内。用ＣＤ４和ＣＤ８的特异性抗体标记小鼠各种免疫组织中的Ｔ 细胞，借助流式细胞术分析它们的组成和变化。　结果　发现ＴＰＯ 基因导入使（１）骨髓中的成熟和未成熟Ｔ 细胞数量在经过短期下降后全部大幅度增多；（２）胸腺未成熟Ｔ细胞增加；（３）脾脏和血液循环中成熟Ｔ 细胞增多，特别是在血液中ＣＤ４阳性细胞的增加最为明显。这些特点大约在基因导入后两周内形成，并持续至少两周以上。　结论　提示ＴＰＯ 是一种免疫促进分子，ＴＰＯ 基因导入后小鼠血液中多种淋巴因子的升高与它过量表达对Ｔ 细胞的刺激有关。     

硫酸镁抑制神经生长因子基因在大脑皮质的过量表达

目的检查疼痛刺激神经生长因子基因（NGFmRNA）在大脑的变化,探讨硫酸镁对疼痛刺激时大脑皮质NGFmRNA表达的影响。方法32只成年Balb/c雌鼠随机分为A,B两组,A组每只腹部皮下注射10%MgSO