没食子酸对人正常肝细胞LO2的体外细胞毒性研究

目的:探讨抗肿瘤单体没食子酸(GA)对正常人肝细胞(LO2)的体外细胞毒性。方法:采用MTT实验、流式细胞术、Hoechst-33258荧光染色法和电镜检测。结果:GA作用24h后,0,6.25,12.5,25,50,100,200μmol/L用药组出现不同程度的细胞增殖抑制现象,抑制率分别为0,18.2%,25.5%,42.0%,42.5%,51.8%,60.6%;流式细胞仪检测0,25,50,100μmol/L用药组凋亡率分别为1.37%,4.63%,4.64%,12.53%;荧光染色和电镜检测提示100μmol/L组细胞有形态改变,细胞核固缩、碎裂。结论:抗肿瘤单体GA对LO2细胞增殖也有抑制作用,并能诱导LO2细胞凋亡。     

中医研究生基础医学实验课程的研究

阐述了中医研究生实验教学存在的问题,并对实验课程如何适应中医科研的需要进行了研究。明确了研究生实验课程应注重突出学科交叉性、先进性、实用性和研究性的理念。据此理念建立了融物理学、生物化学、分子生物学、病理学等多学科系列化、综合性、研究性的基础医学实验教学课程。     

纳米雄黄抑制肿瘤细胞增殖的体内外研究

目的观察雄黄粒径与抑制肿瘤细胞增殖效应之间的相关性。方法传统方法制备水飞雄黄,气流粉碎机制备气流雄黄,微射流制粒机制备微射流雄黄,对3种雄黄颗粒进行电镜观察、粒度测定和X射线衍射测定;显微镜观察3种粒径雄黄对SMMC7721肝癌细胞生长形态的影响;MTT法观察雄黄对SMMC7721细胞增殖的抑制作用;成功建立HepA小鼠实体瘤模型,以生理盐水灌胃作为对照,观察3种粒径雄黄给HepA小鼠灌胃后移植瘤块的质量和坏死率。结果 3种方法制备的雄黄颗粒粒子直径的d50分别为49.26、4.88和0.28μm,以微射流方法制备的样品粒度最小,达到纳米级别;3种颗粒均可使SMMC7721细胞形态发生凋亡变化;MTT法测得的A值分别为0.402±0.036、0.278±0.024和0.183±0.021,对照组为0.634±0.036,F=430.900,P<0.001;瘤块质量分别为(0.425 8±0.230 8)、(0.348 2±0.153 1)和(0.307 7±0.116 8)g,阴性对照组为(0.634 7±0.208 5)g,F=3.76,P=0.028;瘤块坏死率分别为(25.5±19.8)%、(32.7±12.4)%和(37.2±11.8)%,阴性对照组为(18.0±6.5)%,F=2.94,P=0.041。结论雄黄在体内外均对癌细胞有抑制生长和促进凋亡的作用,且随着粒度的降低,作用逐渐增强。     

甘麦大枣汤治疗抑郁症50例

抑郁症是临床上的常见病、多发病,属于中医郁证范畴.笔者应用甘麦大枣汤加味治疗抑郁症50例,收到良好效果,现报道如下.     

中医药院校生物化学实验教学探索与优化

生物化学实验是中医药院校一门重要的实验基础课,也是培养学生实验技能和创新能力的重要途径。为提升生物化学实验课的学习效果,教师有必要在课程内容设置上进行有益探索,即紧盯中医院校各专业发展需求,大幅度增加实验课时,并整合优化基础性实验内容,增加综合设计性实验比重,同时利用多媒体和网络新技术来改进实验教学方法,综合评定学生成绩来完善实验考核方法,吸纳学生参加预实验和推行课外开放实验教学模式,引培并举加强教师队伍建设并完善带教老师考评奖励机制等具体措施,取得了显著的教学效果,可为其他探索生物化学实验课改革的教师提供一些有价值的参考。     

麻黄连轺赤小豆汤三方对H2O2诱导损伤的L-O2人肝细胞的保护作用

目的 研究麻黄连轺赤小豆汤三种组方(简称“三方”)对体外肝细胞损伤的保护作用及其机制。方法 培养L-O₂人肝细胞,采用H2O₂(100 μmol·L-1)体外诱导肝细胞损伤,检测细胞上清中天门冬氨酸转换酶(AST)和丙氨酸氨基转换酶(ALT)、丙二醛(MDA)的含量及超氧化物歧化酶(SOD)活力,cck-8法检测细胞活性。结果 与阴性对照组比较,H2O₂(100 μmol·L-1)可抑制肝细胞活性,增加MDA的生成和ALT、AST的水平,降低SOD的活力(P＜0.01,P＜0.05);与模型组比较,麻黄连轺赤小豆汤三方均可拮抗H2O₂对肝细胞的损伤作用,可促进细胞增殖,显著降低细胞上清ALT(除楸树皮方低剂量组)和AST水平(除楸树皮方高剂量组)及MDA含量(除梓白皮方低剂量组),明显提升SOD活力(P＜0.01,P＜0.05)。结论 麻黄连轺赤小豆汤三方对体外肝细胞损伤均有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。     

抗癌扶正方对人肝癌细胞SMMC-7721 PI3K/AKT信号通路的影响

目的:研究抗癌扶正方(KFP)对肝癌抑制作用的分子机制.方法:体外培养人肝癌细胞5MMC-7721,分别予以9.72,19.44,38.88 g·L-1的3个质量浓度的KFP作用于细胞,采用MTT法检测KFP对人肝癌细胞SMMC-7721生长增殖的影响,并通过Western Blot法检测KFP对人肝癌细胞SMMC-7721 PI3K/AKT通路凋亡相关蛋白表达的影响.结果:KFP以浓度及时间依赖的方式抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖;Western Blot显示KFP作用于人肝癌细胞SMMC-7721后,人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN),caspase-9的活性增强,p-AKT的表达降低,且呈剂量依赖性.结论:KFP能增加入肝癌细胞SMMC-7721 PTEN的表达,进而抑制PI3K/AKT信号通路的激活,继之激活下游caspase-9促凋亡分子的表达,诱导人肝癌SMMC-7721发生凋亡.该研究表明PI3K/AKT信号通路在KFP诱导的人肝癌细胞SMMC-7721凋亡中起了重要作用.     

山茱萸环烯醚萜苷对D-GalN/TNF-α损伤肝细胞的保护作用研究

目的研究山茱萸环烯醚萜苷(CIG)对D-Gal N联合TNF-α造成的肝细胞损伤模型的保护作用。方法提取并分离、制备CIG;体外培养人源性肝细胞L-02,建立D-Gal N/TNF-α致L-02细胞损伤模型,以总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、细胞内钙离子浓度为指标,观察CIG对损伤肝细胞的保护作用;Western blot检测p-PERK、p-e IF-2α、caspase-3蛋白的表达,进行机制研究。结果44 mg·L^-1D-Gal N联合100μg·L^-1TNF-α可作为细胞损伤模型的剂量。CIG高、中、低剂量预保护组可明显提高损伤细胞的活性,明显提高损伤细胞的SOD活性、T-AOC能力,与模型组比较差异具有显著性(P<0.05),降低MDA活性,但低浓度组对MDA活性的降低不明显;Western blot结果显示,CIG不同浓度组可以明显降低内质网应激关联蛋白p-PERK、p-e IF-2α、凋亡关联蛋白caspase-3表达。结论山茱萸环烯醚萜苷对D-Gal N/TNF-α造成的肝细胞损伤具有保护作用,其作用机制可能与增强细胞的抗氧化能力,降低内质网应激造成的损伤,降低凋亡相关蛋白的表达有关。     

脑膜瘤组织中 IGF-1、FⅧ-RAg 的表达变化及意义

目的：观察脑膜瘤组织中胰岛素样生长因子1（IGF-1）和第八因子相关抗原（FⅧ-RAg）的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化法检测Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级脑膜瘤组织及正常硬脑膜组织中IGF-1、FⅧ-RAg,并分析两指标间的相关性。结果Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级脑膜瘤组织（ A、B、C组）及正常硬脑膜组织（ D组） IGF-1阳性表达率分别为16．1％±12．1％、48．2％±12．1％、63．1％±12．2％、0,两两比较,P均＜0．05;FⅧ-RAg在相对应组别中的微血管密度（MVD）值分别为16．6±6．2、21．5±6．5、27．8±6．2、5．6±0．8,C组与其他各组比较,A、B组与D组比较,P均＜0．05。 MVD与IGF-1表达呈正相关（ r＝0．7943,P＜0．05）。结论不同病理分级脑膜瘤中IGF-1、FⅧ-RAg的表达强度不同,IGF-1有促脑膜瘤血管生成的活性,在脑膜瘤的发生、发展过程中起一定作用。     

六味地黄汤对环磷酰胺遗传毒性的拮抗作用

以小鼠骨髓细胞微核和姐妹染色单体互换为指标,观察六味地黄汤对环磷酰胺遗传的拮抗作用,同时以小鼠血清中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）为指标,进行作用机理初探,结果表明：六味地黄汤对环磷酰胺所致微核率及姐妹染色单体互换增高有明显抑制作用,其机理可能与提高机体ＳＯＤ活性,加强对自由基的清除有关。