核因子-κB在小鼠胚泡着床前后子宫表达的初步研究

探讨核因子-κB(NF-κB)在小鼠胚泡着床过程中是否存在的短暂激活。方法:采用免疫组织化学检测小鼠子宫内膜NF-κB的亚基p65蛋白的定位和表达,Western印迹法检测子宫内膜NF-κB的抑制性蛋白IκBα的降解。结果:p65在小鼠胚胎着床前后子宫内膜均有表达,其部位主要在腔上皮细胞和腺上皮细胞的胞浆部分,基质细胞和子宫肌层也有微弱表达。妊娠后子宫内膜p65的表达增加,妊娠d5达最高值,d8仍然维持较高水平;而d5IκBα的降解最明显。结论:NF-κB可能通过其短暂激活来参与调节小鼠胚泡着床。     

microRNA125a-3p对滋养层细胞功能的调控作用及机制

目的 观察microRNA125a-3p(miR-125a-3p)在滋养层细胞中的表达,探讨其对滋养层细胞增殖、侵袭和凋亡的调控及机制。方法 荧光实时定量PCR检测人滋养层细胞系HTR-8/SVneo、绒癌细胞系JAR和JEG-3中miR-125a-3p的表达情况。以HTR-8/SVneo和JEG-3细胞为实验对象,分为3组：空白对照组(CK组),未做任何处理;阴性对照组(NC组),转染NC-inhibitor;实验组(inhibitor组),转染miR-125a-3p inhibitor。以Transwell、流式细胞仪、CCK8法分别检测细胞的侵袭、凋亡及增殖能力。Western blot检测Fyn蛋白表达情况及ERK1/2、STAT3磷酸化水平。荧光实时定量PCR检测Fyn mRNA水平,免疫共沉淀法检测Fyn活性水平。结果 miR-125a-3p mRNA表达水平在HTR-8/SVneo、JAR和JEG-3细胞中依次降低,两两比较均有统计学差异(P<0.01)。抑制HTR-8/SVneo和JEG-3中miR-125a-3p后,细胞的凋亡水平明显降低,侵袭和增殖能力均明显升...     

跨膜蛋白16A对胚胎着床和子宫内膜容受性的影响

目的研究跨膜蛋白16A(TMEM16A)对子宫内膜容受性和胚胎着床的影响。方法体外培养子宫内膜Ishikawa细胞系,分为空白对照组、E_2+P_4组、抑制剂组和E_2+P_4+抑制剂组。分别加药处理后,采用实时荧光定量(qRT-PCR)和免疫印记试验(Western blot)技术检测各组TMEM16A、白血病抑制因子(LIF)和整合素αvβ3mRNA和蛋白的表达水平。采用体外细胞粘附实验检测E_2+P_4组和E_2+P_4+T16Ainh-A01组Ishikawa细胞与人绒毛膜滋养细胞HTR8-SVneo之间的粘附作用。结果 qRT-PCR和Western blot结果显示,E_2+P_4组的TMEM16A、LIF和整合素αvβ3mRNA和蛋白的表达水平最高,在加入T16Ainh-A01后3个基因的表达水平均显著降低(P0.01),但均显著高于空白对照组(P0.01);各组TMEM16A、LIF和整合素αvβ3表达水平均与空白对照组存在显著差异(P0.01)。细胞粘附实验结果显示,E_2+P_4+抑制剂组中Ishikawa细胞与HTR8-SVneo细胞的粘附作用显著小于E_2+P_4组(P0.05)。结论抑制TMEM16A的表达降低着床期LIF和整合素αvβ3的表达,可能影响子宫内膜容受性;抑制TMEM16A可降低子宫内膜细胞与滋养层细胞之间的粘附作用,可能导致胚胎着床失败。     

埃兹蛋白在小鼠围着床期子宫中的表达与意义

目的探讨埃兹蛋白(Ezrin)在小鼠围着床期子宫中的表达与意义。方法以昆明小鼠为实验对象,分别建立小鼠早孕及人工诱导蜕膜化模型,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测小鼠早期妊娠子中Ezrin mRNA水平,免疫组织化学(IHC)SP法检测小鼠早期妊娠子宫中Ezrin的定位。结果 (1)妊娠第1~4天(妊娠第1天记为D1)小鼠子宫Ezrin的表达:RT-PCR结果显示,在D 1~4的小鼠子宫均可检测到Ezrin mRNA表达,随着妊娠天数的增加其表达量逐渐增高(P0.05),以D4更为显著(P0.01);IHC结果显示,D 1~4小鼠子宫内膜的腔上皮与腺上皮均可检测到Ezrin蛋白的表达;IHC半定量分析结果显示,随着妊娠天数的增加Ezrin的蛋白水平逐渐增强(P0.05),以D4更为显著(P0.01)。(2)D5胚胎着床位点小鼠子宫Ezrin的表达:RT-PCR结果显示,在D5子宫着床位点的Ezrin mRNA表达量显著高于非着床位点(P0.01);IHC结果显示,Ezrin在D5着床位点的免疫染色主要位于着床处下方的基质中,在非着床点仅在腔上皮和基质中有较弱的免疫染色;半定量分析结果显示,着床点小鼠子宫Ezrin的蛋白水平较非着床点高(P0.05)。(3)Ezrin在小鼠子宫蜕膜化过程的表达:D8和人工诱导蜕膜化组(蜕膜瘤)小鼠子宫Ezrin mRNA表达量显著高于人工诱导蜕膜化对照组(分别为P0.01和P0.05);D8小鼠子宫Ezrin mRNA表达量高于蜕膜瘤组(P0.05);D8和蜕膜瘤组小鼠子宫Ezrin的免疫染色均位于整个蜕膜区,人工诱导蜕膜化对照组小鼠子宫的Ezrin免疫染色位于腺上皮和腔上皮,基质中未见Ezrin的免疫染色;IHC半定量结果显示,D8和蜕膜瘤组小鼠子宫Ezrin的蛋白水平较人工诱导蜕膜化对照组高(P0.05),D8小鼠子宫Ezrin的蛋白水平较蜕膜瘤组高(P0.05)。结论 Ezrin在小鼠妊娠早期子宫的表达具有时间和空间差异性,可能参与小鼠胚胎着床及蜕膜化过程;激活的胚泡可能促进小鼠Ezrin的表达。     

反复降调后雌激素水平仍高的原因分析及治疗探讨

目的探讨反复垂体降调节后雌激素水平仍高的可能原因及治疗方法。方法回顾性分析我院3例控制性超排卵中反复垂体降调节后雌激素水平仍高患者的临床资料。结果 3例患者中1例因卵巢颗粒细胞瘤行手术治疗后雌激素水平恢复正常;1例反复全量促性腺激素释放激素降调节失败后给予微刺激周期未孕;1例为多囊卵巢综合征给予长方案改超长降调节超排卵后妊娠。结论对反复垂体降调节后雌激素水平仍高的患者应积极寻找原因,对腺外分泌的雌激素水平偏高患者反复降调后适时进行超排卵仍有获得妊娠的可能。     

不同精子参数及来源与ICSI结局的相关性研究

目的:探讨不同精子参数及来源与单精子卵胞浆内注射(ICSI)治疗结局的相关性.方法:回顾分析2010年6月至2011年12月在武汉大学人民医院生殖医学中心行ICSI助孕治疗的413个周期,根据精子质量及来源分为4组,非严重少弱的新鲜射出精子组(A1组,244个周期)、严重少弱的新鲜射出精子组(A2组,61个周期)、睾丸精子组(B组,86个周期)、冻融的射出精子组(C组,22个周期).比较4组的ICSI治疗结局.结果:4组患者的受精率、正常受精率、卵裂率、优胚率、临床妊娠率、胚胎种植率和早期流产率均无显著差异(P＞0.05).结论:精子的质量及来源不影响ICSI治疗的受精及早期妊娠结局.     

不同发育天数囊胚移植策略分析

目的探讨不同发育天数囊胚的最佳移植策略。方法回顾性分析我中心2015年1月至2017年10月间256个新鲜囊胚移植周期和564个冻融囊胚移植周期的数据,比较不同发育天数(D5和D6)囊胚的妊娠结局。结果新鲜周期和冻融移植周期中,D5与D6囊胚组患者的年龄、不孕年限、BMI、不孕原因、受精方式、移植日子宫内膜厚度、胚胎质量均无显著差异(P>0.05),但是D5囊胚组新鲜周期及冻融移植周期的胚胎移植数和双囊胚移植率均显著高于D6囊胚组(P<0.05)。新鲜周期中,D5囊胚组较D6囊胚组的临床妊娠率(50.96%vs. 22.22%)和胚胎种植率(35.92%vs. 15.19%)均显著升高(P<0.05);冻融移植周期中,D5囊胚组与D6囊胚组的临床妊娠率(56.29%vs. 50.00%)和种植率(38.92%vs. 37.19%)相仿(P>0.05)。D5囊胚组冻融移植周期与新鲜周期的临床妊娠率和胚胎种植率相比均无显著差异(P>0.05),但D6囊胚组冻融移植周期较新鲜周期的临床妊娠率(50.00%vs. 22.22%)和种植率(37.19%vs. 15....     

骨桥蛋白对小鼠体外受精及早期胚胎发育的影响

目的 探讨骨桥蛋白（OPN）对小鼠体外受精及早期胚胎发育的影响。方法 120只昆明雌鼠和30只雄鼠,采用体外受精、胚胎培养方法,将小鼠精子、卵子、原核期胚胎和2-细胞期胚胎分别用不同浓度的OPN抗体预处理,观察小鼠受精、卵裂以及早期胚胎发育情况。结果 不同浓度的OPN抗体分别预处理精子和卵子后,与对照组比较,受精率显著降低(P＜0.01)。OPN抗体预处理原核期胚胎后,0.01mg/L OPN抗体组的卵裂率较对照组低,但差异无显著性 (P =0.052),1.00mg/L OPN抗体组的卵裂率低于0.01mg/L 组（P ＜0.01）及0.10mg/L组（P ＜0.05）。不同浓度的OPN抗体预处理2-细胞胚胎后可抑制胚胎发育。1.00mg/L OPN抗体组的4-细胞率和8-细胞率与0.10mg/L OPN抗体组相比差异无显著性(P ＞0.05),但前者的囊胚形成率显著低于后者（P ＜0.01）。1.00mg/L OPN抗体组的4-细胞率、8-细胞率以及囊胚形成率均显著低于0.01mg/L OPN抗体组（P ＜0.01）。结论 OPN可促进小鼠的受精和早期胚胎发育。     

体外受精-胚胎移植后宫内妊娠并发输卵管残端出血——2例临床分析

目的:探讨因输卵管积液等行腹腔镜下绝育术后助孕、宫内成功妊娠而并发输卵管残端出血的病因及预治。方法:回顾性分析2例宫内妊娠并发输卵管残端出血患者的临床资料。结果:2例患者经腹腔镜手术止血成功,并保住了宫内胎儿,获得满意的治疗效果。结论:宫内妊娠并发输卵管残端出血原因可能与前次腹腔镜绝育术中不恰当的电凝导致残端组织愈合不良、宫角受损未予成形缝合以及手术器械使用不当等有关,应采用恰当的手术方式加以防范。     

腹腔镜治疗237例不孕症临床分析

目的:探讨腹腔镜对女性不孕症患者的盆腔疾病进行诊断及治疗的价值。方法:对237例盆腔疾病性不孕患者进行腹腔镜下诊断及治疗,分析患者不孕的原因及对其中230例患者的输卵管进行通液,判断输卵管的通畅性。结果:237例中除7例中转开腹手术外,230例不孕症患者中盆腔炎、盆腔粘连有90(39.1%)例,子宫内膜异位症有54(23.5%)例,多囊卵巢有33(14.3%)例,子宫肌瘤有21(9.1%)例,卵巢肿瘤24(10.4%)例,盆腔正常有8(3.3%)例。在103例原发不孕中子宫内膜异位症占第1位35(15.2%)例,而在127例继发不孕中盆腔炎、盆腔粘连占第1位66(28.7%)例。原发不孕镜下术前与术后输卵管通液通畅率相比,差异有显著性,P<0.05。继发不孕术前与术后输卵管通液通畅率相比,差异有显著性,P<0.05。结论:腹腔镜诊断及治疗盆腔疾病性不孕是安全的、有效的。