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目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定5种马兜铃属药材中马兜铃酸A、B、C、D含量的方法。方法:采用Agilent Zorbax Extend C18色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 8μm),电喷雾离子源,多反应监测(MRM)模式,正离子检测,定量离子对为马兜铃酸A:m/z359. 1→298. 1;马兜铃酸B:m/z 329. 0→268. 0;马兜铃酸C:m/z 345. 2→282. 0;马兜铃酸D:m/z 375. 0→212. 0;内标金合欢素:m/z 285. 0→242. 0。结果:马兜铃酸A在0. 06~12μg/mL范围内呈现良好的线性关系(r=0. 9967);马兜铃酸B在0. 055~11μg/mL范围内呈现良好的线性关系(r=0. 9980);马兜铃酸C在0. 065~13μg/mL (r=0. 9969)范围内呈现良好的线性关系;马兜铃酸D在0. 06~12μg/mL (r=0. 9982)范围内呈现良好的线性关系。马兜铃酸A、B、C、D平均加样回率分别为89. 95%、92. 06%、91. 06%、92. 18%,RSD分别为3. 88%、3. 97%、4. 79%、4. 76%。结论:该方法快速、灵敏度高、专属性好,可作为马兜铃属药材的一种质量控制评价方法。 相似文献
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肝癌细胞膜上转铁蛋白受体和去唾液酸糖蛋白受体数量的变化 总被引:3,自引:2,他引:3
研究肝癌细胞膜摄取转铁蛋白受体的变化。采用免疫组化及配体受体结合法分别测定正常肝脏,肝 癌组织及癌旁肝组织转铁蛋白受体及去唾液酸糖蛋白受体的含量。该变化有利于肝癌细胞对转铁蛋白的有效摄取,也增加了肝癌细胞对高度唾液酸化的转铁蛋白的相对特异性摄取。 相似文献
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目的 利用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)研究马兜铃酸IVa(aristolochic acid IVa,AA IVa)与2''-脱氧核苷在溶液中的反应,检测可能的加合物,为进一步研究奠定基础。方法 马兜铃酸IVa与2''-脱氧腺嘌呤核苷或2′-脱氧鸟嘌呤核苷在锌尘存在下37℃孵育,通过LC-MS/MS中性丢失模式筛选反应产物,再通过质谱碎裂方式和高分辨质谱进行验证。结果 马兜铃酸IVa与2''-脱氧腺嘌呤核苷或2''-脱氧鸟嘌呤核苷的反应较为复杂,产生多种产物。根据预期的加合物分子量(分别为558和574)以及是否具有明显的[MH-116]+子离子,分别筛选到3种和4种可能的2''-脱氧腺嘌呤核苷和2''-脱氧鸟嘌呤核苷加合物。同时,还发现了非“常规”的加合物。在马兜铃酸IVa与2''-脱氧腺嘌呤核苷反应混合物中,发现了1种分子量572的可能加合物,而在马兜铃酸IVa与2''-脱氧鸟嘌呤核苷反应混合物中则发现了3种分子量590的可能加合物。结论 马兜铃酸IVa与2''-脱氧腺嘌呤核苷或2''-脱氧鸟嘌呤核苷体外条件下能够发生反应形成可能的加合物,但加合物结构尚需通过核磁共振光谱确定。 相似文献
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分泌抗人原发性肝癌单克隆抗体杂交瘤的制备及专一性分析 总被引:3,自引:1,他引:2
研制抗人原发性肝癌特异性单抗,为肝癌的导向诊断与治疗奠定基础。用人PHC细胞系HepG2免疫BALB/c小鼠,聚其脾细胞与同源骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接免疫荧光染色加流式细胞仪筛选及专一性鉴定,单抗经ProteinA法纯化。用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度测定。 相似文献
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为了解双特异性单克隆抗体(BiMcAb)能否在体外介导人T细胞对肝癌的免疫杀伤效应,本文通过杂交-杂交瘤方法将分泌抗原发性肝癌单抗杂交瘤(αGP95 )与抗人T细胞CD3单抗杂交(αCD3)融合后获得双功能单抗(CP95 × CD3),后者既能与T细胞CD3结合又能与肝癌细胞表面相关抗原结合.用人外周血淋巴细胞(PBL)作为效应细胞(E),以国人原发性肝癌细胞株7721作为靶细胞(T).杀伤试验采用~51Cr释放试验.研究共分5组:G1:7721 GP95 × CD3,G2:7721十PBL,G3:7721 PBL GP95×CD3,C4:7721 PBL GP115×CD3(抗人结肠癌双功能单抗作对照),G5:7721 PBL αGP95 αCD-3.结果:G1 组因无效应细胞存在,即为自然释放率. 相似文献
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Telomeresaretheendstructureofeukaryoticlinearchromosomes.HumantelonlericDNAiscomposedofsequencesoftandemarraysof(TTAGGG)n.[fiTelomerase,aribonucleoprotein,synthesizestelomerlcDNArepeatsequencesdenovoandexertsRNA--dependentDNApolymeraseactivity[':.Recently,lelomereandtelomerasereceivedmuchattentioninthebiologicalresearchfieldduetotheirinvolvementincellsenescenceandtumorigenesis.Detectionofthetelomeraseactivityisessentialintelomerasestudyandmayhavesomeclinicaldiagnosticsignificance.Telom… 相似文献
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目的;研究内皮细胞选择素及其配体在肝癌转移中的作用。方法;采用地高辛标记探针原位杂交的方法,检测了正常肝脏、肝癌组织及癌旁肝中内皮细胞选择素及其配体合成的关键酶岩藻糖转移酶(Fuc-T)的转录水平。结果;E-Selectin的转人局限于内皮细胞,且在肝癌及正常肝组织之间没有差别,但Fuec-T的转录水平在肝癌与正常肝组织之间明显高于 相似文献
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作者改进了鞘糖脂糖基转移酶的检测方法,用SephadexG-50Fine成功地分离了酶反应的同位素标记产物与底物。从而缩短了酶活性的测定时间,简化了操作步骤,并减少了同位素的污染机会。在此基础上系统检测了二乙基亚硝胺诱发肝癌大鼠及正常大鼠各脏器(肝、脾、肾、心、脑、肺、胃)GD3合成酶(CMP-NeuAc:GM3唾液酸转移酶;ST2)及目前报道的其他4种鞘糖脂唾液酸转移酶(ST1、3、4、5)的活性,企图从中选择一种ST2含量高、活性高的组织作为酶分离纯化的材料。结果表明,ST2在二乙基亚硝胺诱发肝癌大鼠肝癌组织中特异性升高,从而提示此组织可用作ST2分离纯化的最佳材料。 相似文献