乙肝全基因组转基因小鼠肝组织病理及部分免疫学特征

目的:研究C57-TgN(HBVadr2.0) SMMU“3号”品系乙型肝炎转基因小鼠肝脏的组织病理学及部分免疫学特征.方法:通过对130例SPF级乙型肝炎转基因小鼠和30例同龄正常C57BL/6小鼠肝组织进行免疫组织化学染色、HE染色和浸银染色分析,研究转基因小鼠HBsAg的表达以及病理改变情况.选取15例肝组织有单个核细胞浸润的转基因小鼠检测白细胞分化抗原的表达情况.结果:60.77％(79/130)的转基因小鼠肝脏组织中出现了不同程度的肝组织病理性改变,包括肝细胞变性、单个核细胞浸润和纤维组织增生,且与月龄正相关,而与性别、病毒蛋白的表达无相关性.选取出现单个核细胞浸润的肝组织进行免疫组织化学检测发现,肝组织中浸润的单个核细胞大多为CD3+、CD4+T细胞.结论:C57-TgN (HBVadr2.0) SMMU“3号”品系乙肝全基因组转基因小鼠肝脏产生类似慢性无症状HBV携带者的病理学变化,病理改变与病毒蛋白表达无相关性,与小鼠月龄呈正相关性.     

单一术者机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术术中指标影响因素分析

目的 探究行机器人辅助腹腔镜前列腺癌根治术（RALP）手术时间、术中出血量以及神经保留的影响因素。方法 收集2016年1月1日至2017年10月1日184例于海军军医大学（第二军医大学）长海医院泌尿外科由单一术者完成RALP的局部或局部进展性前列腺癌患者的手术资料及临床信息,分析患者年龄、前列腺体积、术后病理Gleason评分、盆腔淋巴结切除范围、穿刺方式等对手术时间、术中出血量和神经保留的影响。对手术时间和术中出血量的影响因素进行多因素线性回归分析,手术时间与前列腺体积的相关性采用线性相关分析,不同盆腔淋巴结切除范围的患者RALP手术时间的比较采用LSD-t检验。对RALP术中神经保留影响因素的分析采用多因素logistic回归分析。RALP术中未保留、保留单侧与保留双侧神经患者年龄的差异采用单因素方差分析,术后病理Gleason评分、盆腔淋巴结切除范围和穿刺方式的差异采用Kruskal-Wallis H检验。结果 多因素线性回归分析结果显示前列腺体积和盆腔淋巴结切除范围是RALP手术时间的独立影响因素（P均<0.01）;前列腺体积与手术时间呈正相关（r=0.201,P=0.006）;盆腔淋巴结扩大切除患者的RALP手术时间长于闭孔切除者,且盆腔淋巴结闭孔切除者的手术时间长于未切除者（P均<0.01）;患者年龄、前列腺体积、术后病理Gleason评分、盆腔淋巴结切除范围、穿刺方式等对RALP术中出血量无明显影响（P>0.05）。多因素logistic回归分析结果显示,年龄、术后病理Gleason评分、盆腔淋巴结切除范围和穿刺方式是RALP术中神经保留的独立影响因素（OR=0.949,95% CI：0.906~0.995,P=0.027;OR=0.742,95% CI：0.551~0.999,P=0.049;OR=0.540,95% CI：0.322~0.903,P=0.019;OR=0.457,95% CI：0.230~0.905,P=0.025）。RALP术中未保留、保留单侧和保留双侧神经的前列腺癌患者分别为108、20、56例,3组患者的年龄、术后病理Gleason评分、盆腔淋巴结切除范围和穿刺方式的差异均有统计学意义（P均<0.05）。结论 前列腺体积大以及进行盆腔淋巴结切除的前列腺癌患者手术时间较长,年龄大、术后病理Gleason评分高、进行盆腔淋巴结切除以及经直肠穿刺不利于RALP术中神经保留。     

乙型肝炎病毒X蛋白在肝细胞癌发生中的作用

乙型肝炎病毒是引起包括肝细胞癌在内的慢性肝脏疾病的重要致病因素,但HCC的发病机制仍不清楚.最近研究发现,乙型肝炎病毒x基因(HBx)是HBV复制和扩散所必需的基因,在乙肝慢性化和肝细胞癌的发生中具有重要作用.HBx基因是HBVDNA中最小的一个基因,全长465 bp,表达产物为17 kDa的X蛋白.X蛋白具有多种功能:可对多种病毒和细胞的启动子、增强子成分发挥反式激活作用;可与P53蛋白结合;可参与多条信号转导通路;具有抑制DNA切除修复的作用;参与细胞周期调控和细胞凋亡;具有蛋白激酶和蛋白酶抑制剂功能;可与胰岛素样生长因子Ⅱ相互作用.在乙肝慢性化和HCC的发生中,X蛋白参与了多条途径,本文将就X蛋白在肝细胞癌发生中的几种可能作用机制作一综述.     

医学细胞生物学实验教学改革的探索与实践

突出细胞生物学实验课教学的主体地位,实验课课程设置以验证性实验、综合性实验及创新性实验相结合,激发学生的积极性和主观能动性,培养学生的创新思维和分析问题解决问题的综合实践能力,取得了良好的教学效果.     

医学细胞生物学课程体系改革探讨

细胞生物学的理论知识已经渗透到医学科学的各个领域,是医学科学的基本组成部分,也是医学科学高水平发展的重要基础.随着医学科学和细胞生物学本身的快速发展,医学教育对于细胞生物学的需求日益增加,为了使医学细胞生物学教学体系适应我国医学教育的发展,第二军医大学细胞生物学教研室本着培养创新型人才、提高教育质量的思想,建立了一种新的医学细胞生物学课程体系.该教学体系的核心内容是将细胞生物学从内涵上融入医学科学教育,既有利于学生的学,又有利于教师的教,保证了"教"与"学"的有效性.     

肥胖基因及其产物

肥胖基因（ｏｂｅｓｅｇｅｎｅ，ｏｂｇｅｎｅ）及其产物Ｌｅｐｔｉｎ在肥胖的发生中起重要作用，人们已定位克隆了ｏｂ基因并对ｏｂ基因及其调控序列、ｏｂ基因的产物及其功能，各种因素对ｏｂ基因及其产物表达的影响等方面作了深入研究，并提出了机体调节体重的可能途径。本文就以上几个方面作一综述。     

单细胞多组学技术和应用

单细胞多组学技术是指结合多种不同的生物学技术,对单个细胞进行多方面的分析和研究,从而获得更全面、更准确的单细胞数据。该技术包括单细胞基因组学、单细胞转录组学、单细胞蛋白质组学、单细胞表观组学等。单细胞多组学技术的发展为我们提供了一种更加精确理解生物体内复杂的细胞类型和功能的方式,尤其是对于异质性细胞群体中少数的特殊细胞类型如干细胞或罕见癌细胞,具有非常重要的应用价值。通过融合不同技术获得的信息,单细胞多组学可以更准确地描述单个细胞在多个生命事件和过程中的状态与变化,为生命科学的研究提供更加全面和深入的视角。本文系统概述了目前代表性单细胞多组学技术的发展现状,总结了其在生物学研究中的重要应用和巨大潜力。     

乙型肝炎转基因小鼠品系C57-TgN(HBV adr2.0)SMMU的生物学特征

目的：评价乙肝转基因小鼠品系C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU生物学特征的稳定性。方法：以F6代乙肝转基因小鼠C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU为研究对象，采用基因组DNA PCR，血清ELISA检测，Western印迹分析，免疫组织化学，血清DNA PCR，透射电镜和H－E染色的方法分析HBV基因在转基因小鼠中的整合，表达，复制和组织这变化。结果：F6代乙肝转基因小鼠基因组中稳定整合有HBV基因，肝组织中可检测用HBsAg,HBcAg和X蛋白3种病毒蛋白，血清中HBsAg和HBeAg的表达率分别为19．54％和3．39％，且在血清和肝组织中存在病毒NA和病毒样颗粒；长期的病毒DNA整合，表达和复制可以引起转基因小鼠肝，肺等组织的病理性损伤。结论：乙肝转基因小鼠品系C57－TgN(HBV adr2.0)SMMU具有基因组中稳定整合病毒DNA，血清和肝组织中有病毒蛋白表达和病毒复制的特征，并具有一定的组织这变化，作为生物医药研究的实验动物模型具有推广应用价值。     

视蛋白基因启动子-绿色荧光蛋白融合基因转基因小鼠模型的建立

目的：从小鼠基因组中克隆小鼠视蛋白基因启动子（ROP）并建立ROP－绿色荧光蛋白（GFP）融合基因转基因小鼠模型。方法：用PCR法从基因组内扩增ROP，通过基因重组的方法构建pmROP-EGFP表达载体，并用限制性内切酶消化和DNA测序进行鉴定。纯化的pMOP-EGFP表达质粒经Not I酶切线性化后，用原核显微注射的方法将其注射入小鼠受精卵雄原核，制作转基因小鼠。新生鼠通过PCR检测在基因组水平筛选首建小鼠，基因组表达阳性的小鼠与正常小鼠交配传化后，取眼球进行冰冻切片，在荧光显微镜下观察视网膜下GFP的表达。结果：从基因组内扩增出了2.1kb的小鼠ROP，成功构建了小鼠ROP－GFP融合基因表达载体pmROP-EGFP。获得了3只转基因小鼠首建，分别命名为C57－TgN(mROP-EGFP)SMMU21,C57-TgN(mROP-EGFP)SMMU26,C57-TgN(mROP-EGFP)SMMU27。结论：成功建立了视网膜表达GFP蛋白的C57－TgN(mROP-EGFP)SMMU转基因小鼠，它们可用于研究脑和视网膜发育以及视网膜病变机制，还可为进行视网膜移植实验提供哺乳类动物模型。     

谈研究生细胞生物学课程的改革

为使医学研究生建立利用和改造细胞的现代细胞物理学知识体系和技术能力,我们将研究生的细胞生物学课程改为细胞生物学与细胞工程课程,从教学的主导思想、教学内容、教学方式等方面做了一系列的改革,使学生学完该课程后既能掌握该学科的基础知识和基本技能,又能了解学科发展的前沿知识和高新技术,并将所学的知识运用到自己的专业领域中去,进行一些创新性的工作。