DEHP对3β-羟类固醇脱氢酶表达水平的影响

目的：研究邻苯二甲酸二（2-乙基己）酯（DEHP）对MCF-7细胞中3β-羟类固醇脱氢酶（3β-HSD）表达的影响。方法：采用不同浓度（0.05、0.1、0.2、0.4、0.8 mmol/L） DEHP对体外培养的MCF-7细胞分别染毒12、24和48 h,或同一浓度（0.8 mmol/L）染毒不同时间（3、6、12、24、48 h）后,荧光定量PCR检测各组MCF-7细胞3β-HSD mRNA表达水平,Western blot检测3β-HSD蛋白表达水平。结果：DEHP 0.1~0.8 mmol/L分别染毒细胞12~48 h,3β-HSD mRNA表达水平均较对照组升高,差异有统计学意义（P < 0.01）;DEHP 0.05 mmol/L染毒细胞48 h,3β-HSD mRNA表达水平比对照组升高,差异有统计学意义（P < 0.05）。DEHP 0.8 mmol/L染毒细胞6~48 h,3β-HSD mRNA表达水平均较对照组升高,差异有统计学意义（P < 0.01）。DEHP 0.2~0.8 mmol/L染毒细胞24 h,3β-HSD蛋白表达水平较对照组升高,差异有统计学意义（P < 0.05或P < 0.01）。结论：DEHP可引起3β-HSD mRNA和蛋白表达水平升高,推测DEHP可能通过影响类固醇激素合成过程中3β-HSD表达水平的变化,从而产生生殖毒性作用。     

细胞色素p450 2E1基因在鼻咽组织中的表达及多态性分析

鼻咽癌 (ＮＰＣ)的化学病因主要涉及亚硝胺类化合物 ,这类物质需经体内细胞色素ｐ450 2Ｅ1 (ＣＹＰ2Ｅ1 )等酶代谢活化后方具致癌潜能。我们曾单独用二亚硝基哌嗪 (ＤＮＰ)体外诱导人鼻咽上皮细胞 ,获得恶性转化表型 ,而对ＤＮＰ的活化过程却不明确。方法和结果 :采用ＲＴ -ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ方法检测了正常鼻咽上皮细胞 ,首次发现ＣＹＰ2Ｅ1在鼻咽部的表达 ,提示ＤＮＰ在体外作用于鼻咽细胞后可能被ＣＹＰ2Ｅ1代谢活化而致细胞癌变 ,为ＮＰＣ的化学病因提供了重要证据。另有研究提示在ＣＹＰ2Ｅ1基因上游 5’ -侧端区调控序列…     

基于斑马鱼胚胎进行化学品毒性评价的方法

目的 建立应用模式生物斑马鱼胚胎进行化学品毒性鉴定的方法。方法 将健康亲代成熟斑马鱼进行交配产卵,产卵后收集斑马鱼胚胎,于受精后6 h将斑马鱼胚胎暴露于梯度浓度的甲醛(0、0.005%、0.010%、0.012%、0.014%、0.016%、0.018%、0.020%)、乙醇(0、1.0%、1.2%、1.4%、1.6%、1.8%、2.0%、2.2%、2.4%)、三氯异氰尿酸(0、2μg/m L、4μg/m L、6μg/m L、8μg/m L、10μg/m L、12μg/m L、14μg/m L、16μg/m L、18μg/m L、20μg/m L)、甲醇(0、0.6%、0.9%、1.4%、2.0%、3.0%、4.5%),在暴露后24 h、48 h、72 h、96 h、120 h观察斑马鱼胚胎的死亡情况。结果 甲醛、乙醇、三氯异氰尿酸、甲醇暴露后,随着剂量的升高,斑马鱼胚胎在各观察时间点出现死亡明显升高,甲醛、乙醇、三氯异氰尿酸、甲醇对受精后6 h斑马鱼胚胎的96 h LD50分别为0.001 6 mol/L、0.333 0 mol/L、7.514 0μg/m L、0.401 0 mol/L。结论 斑马鱼胚胎可用于化学品暴露的安全性评价,应用模式生物斑马鱼胚胎进行化学品毒性鉴定是未来可发展的毒理学替代方法之一。     

瓣叶折叠在小儿二尖瓣成形中的应用

目的 提供一种基于儿童先天性二尖瓣反流(mitral regurgitation,MR)解剖异常特点的,相对简单化、可重复性高的标准化二尖瓣成形(mitral valvuloplasty,MVP)策略,并报道单中心的近期结果.方法 回顾性分析2016～2018年在本中心接受标准化MVP策略手术74例患者的临床资料,其中...     

邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯对大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达的影响

目的:探讨邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯(DEHP)对大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达水平的影响。方法:将80只5周龄SD大鼠,雌雄各半,随机分为对照组(玉米油)、DEHP低剂量组(100 mg/kg)、DEHP中剂量组(500 mg/kg)、DEHP高剂量组(1 500 mg/kg),每组雌雄各10只,每周染毒5 d,每天灌胃染毒1次,连续6周。末次染毒24 h后处死动物,提取睾丸或卵巢组织蛋白,应用Western blot分别检测睾丸组织中3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)、促性腺激素释放激素受体(GnRHR)、卵泡刺激素受体(FSHR)及卵巢组织中黄体生成素受体(LHR)和GnRHR的蛋白表达水平。结果:与对照组比较,雄鼠睾丸组织在DEHP 500和1 500 mg/kg剂量时3β-HSD蛋白表达水平均显著升高(P均<0.01);GnRHR蛋白表达水平在1 500 mg/kg剂量组显著下降(P均<0.01);FSHR蛋白表达水平在500和1 500 mg/kg组显著下降(P<0.05或P<0.01)。雌鼠卵巢组织在DEHP 100 mg/kg剂量组时LHR和GnRHR蛋白表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05),在DEHP 500和1 500 mg/kg剂量组LHR表达水平比对照组下降25%~35%,GnRHR下降60%~80%(P<0.05或P<0.01)。结论:DEHP染毒可引起大鼠睾丸和卵巢组织激素相关蛋白表达水平的改变,干扰大鼠体内性激素的代谢,推测此作用与DEHP的生殖毒性存在密切关系。     

深圳市基于污水流行病学的新型冠状病毒奥密克戎变异株感染者来源追踪案例分析

污水流行病学(WBE)是一门新兴学科, 已被应用于药物滥用追踪和传染病病原体监测。在新型冠状病毒(简称新冠病毒)感染疫情期间, WBE被应用于监测疫情流行趋势和提供早期预警。为了及时发现隐匿的新冠病毒感染者, 防止其在社区的传播, 深圳市于2022年7月26日至11月30日在福田、南山、罗湖和盐田区的口岸地带、城中村、居民小区等重点场所布设369个污水采样点位, 覆盖193万人口, 开展污水监测新冠病毒的工作。每日在用水高峰时段进行3 h连续采样, 采用聚乙二醇沉淀法和RT-qPCR进行污水病毒富集浓缩及新冠病毒核酸检测, 并形成了阳性水样处置流程。本文旨在介绍深圳市基于城市污水开展新冠病毒感染者来源追踪的相关案例, 在罗湖区洪湖水质净化厂污水监测有效发挥了早期预警作用并实现感染者来源追踪;在福田区福田南路阳性水样处置中获得监测点位布设的重要经验;在南山区南山村污水监测中揭示了隐匿感染者的存在。分享基于WBE的新冠病毒监测和感染者追踪, 避免新冠病毒感染者在社区传播的经验, 总结污水监测的优势和应用前景, 为未来具有肠道排毒的新发或再发传染病病原体监测提供新的研究思路。     

HCMV-IE1基因siRNA真核载体的构建及其效率研究

目的 采用RNA干扰技术研究在体外对人巨细胞病毒即刻早期Ⅰ基因(HCMV-IE1)表达的沉默作用.方法 根据HCMV-IE1基因表达框,设计siRNA干扰序列,重组至带U6启动子真核表达载体,构建针对HCMV-IE1基因的siRNA真核表达载体(pHCMV-IE1i);经测序鉴定后,脂质体法转染HEL细胞HCMVAD169株,应用荧光显微技术、流式细胞术和RT-PCR法检测分析pHCMV-IE1i对HCMV-IE1基因的表达干扰效果.结果 测序结果显示针对HCMV-IE1基因的pHCMV-IE1i构建成功;荧光显微结果表明pHCMV-IE1i转入HEL细胞后可以特异抑制细胞中HCMV-IE1基因的表达;流式细胞术结果显示对照细胞组HCMV-IE1基因表达阳性率达60%以上,干扰细胞组HCMV-IE1基因表达阳性率仅达10%左右(P＜0.05);RT-PCR检测结果发现pHCMV-IE1i能显著抑制HCMV-IE1基因的表达(P＜0.05).结论 采用RNAi技术能有效抑制HCMV-IE1基因在细胞内的表达,对探讨其在防治HCMV感染疾病中的作用与意义提供了科学的实验依据.     

深圳市南山区医院医务人员2021—2022年流感流行季流感疫苗接种干预效果评价

目的 评价以非强制性的具体接种率要求对提高医务人员流感流行季流感疫苗的干预效果。方法 采用非随机分组的社区干预试验设计,对深圳市南山区7家医院进行分组,干预组4家医院共4 599人,对照组3家医院共2 139人。于2021年10月—2022年4月,对干预组实施“免费接种+现场接种+宣传提醒+接种率目标要求”的干预模式,对照组实施“免费接种+现场接种+宣传提醒”的干预模式;干预组高风险科室以80%的接种率作为目标,低风险科室以60%作为接种目标,采用调整比估计量的Pearson χ²检验对干预组和对照组的基线接种率以及干预后的接种率进行检验。结果 2021—2022年流感流行季,干预后干预组高风险科室医务人员当季流感疫苗接种率为62.67%,对照组接种率为23.71%,2组绝对率差(absolute rate difference,ARD)为38.96%(P <0.05,95%CI=14.17%～63.75%);干预组低风险科室医务人员当季流感疫苗接种率为34.57%,对照组接种率为22.96%,干预组所有医务人员流感疫苗接种率为43.90%,对照组接种率为2...     

低剂量亚砷酸钠诱导人THLE-3细胞增殖hormesis效应与IL-6mRNA表达变化CSCD

目的 探讨低剂量亚砷酸钠诱导人THLE-3细胞增殖毒物兴奋(hormesis)效应与IL-6 mRNA表达改变。方法 常规培养THLE-3细胞至对数生长期,调整细胞浓度至2×105个/ml,分别运用较低浓度(0、1. 5、3和4. 5μmol/L)的亚砷酸钠处理各组细胞4 h;以CCK-8分析细胞增殖速度;以实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)分析IL-6 mRNA表达;以Pearson相关分析探讨细胞增殖及IL-6 mRNA表达与染毒浓度的关系。结果 随着亚砷酸钠浓度的升高,THLE-3细胞增殖增强,细胞IL-6 mRNA表达增加,二者与亚砷酸钠染毒浓度呈现正相关关系(r1=0. 6964,P1<0. 05;r2=0. 8756,P2<0. 05)。结论 低剂量亚砷酸钠能诱导THLE-3细胞增殖性状的hormesis效应,且IL-6 mRNA表达同时增加,二者与亚砷酸钠染毒浓度正相关。     

细颗粒物对斑马鱼胚胎发育的影响

目的：探讨细颗粒物对斑马鱼胚胎发育的影响。方法：采集深圳市某小学楼顶雾霾天气的大气细颗粒物样本,将斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的细颗粒物（0、5、20、80、320、800 μg/mL）混悬溶液中,在不同时间（0、2、4、6、8、16、24、48、72、96 h）于体式显微镜下观察斑马鱼胚胎的孵化与存活情况。结果：与对照组相比,细颗粒物暴露48 h后,各剂量组均有胚胎死亡发生,并且在80、320、800 μg/mL剂量组胚胎死亡率明显升高（死亡率均为100%）,而胚胎孵化率则呈现随着剂量升高而降低的趋势,其中80 μg/mL剂量组有较多胚胎出现不出膜现象,800 μg/mL剂量组的胚胎在染毒48 h后全部死亡。经统计分析,细颗粒物对斑马鱼胚胎的半数致死量为（56.6±2.8）μg/mL。结论：细颗粒物可能影响斑马鱼胚胎发育,导致孵化失败和死亡。