蛋白激酶C表达上调与KBV200细胞多药耐药的关系

目的:探讨蛋白激酶C(PKC)的表达上调与肿瘤多药耐药的关系.方法:32P掺入法测定多药耐药KBv200细胞株的PKC活性;Western blotemg法检测PKC亚型表达和亚细胞分布;MTT法检测细胞耐药性;实验组应用200nmol/L佛波酯(PMA)预孵育KBV200细胞.结果:PMA可提高KBV200细胞的PKC总活性和膜组分PKC活性,降低浆组分PKC活性(P＜0.01);使膜组分PKCα表达增加,浆组分PKCα表达降低,膜组分PKCβ无明显变化,浆组分PKCβ的表达稍增强;PMA可升高长春新碱(VCR)、阿霉素(ADR)对KBV200细胞的IC50值(P＜0.01).结论:PMA使KBV200细胞耐药性增加,可能与PKC表达上调有关.     

FasL基因转染对人乳腺癌MCF-7细胞药物敏感性的上调效应

目的:探讨FasL基因转染对肿瘤细胞化疗敏感性的调节效应,方法:LjpofectAMINE介导建立FasL基因修饰的乳腺癌细胞系MCF-7(?)FL,MTT法检测化疗药物对转染细胞的杀伤效应,半定量RT-PCR分析化疗药物作用前后转染细胞Fas mRNA表达水平变化,结果:经C418筛选,RT-PCR和免疫组化鉴定,建立FasL稳定表达MCF-7/FL,ADM在0.625～2.5μg′ml之间.MTX在3～6μg′ml.CDDP在1.25～10μg ml间对MCF-7FL的杀伤效应均明显高于MCF-7和转染空载体的MCF-7Vt而F(ab’)_2-APO-LMcAb可部分抑制这—增强效应,半定量RT-PCR显示上述化疗药物作用后MCF-7/FL Fas mRN水平表达显著增强,结论:外源FasL基因导入可上调肿瘤细胞对多种化疗药物的敏感性,其机制可能与化疗药物上调Fas表达从而增强瘤细胞FasL-Fas凋亡通路效应有关     

靶向逆转KB细胞多药抗性时c-myc基因表达的改变

哺乳动物细胞接触某种治疗药物后可获得对其它非相关药物的广泛耐药性 ,这种现象称为多药耐药性 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ,ＭＤＲ)。近期研究发现ｃ ｍｙｃ与多药耐药基因ＭＤＲ1密切相关[1] 。ＭＤＲ特性的出现与ＭＤＲ1基因的过度表达及其基因产物Ｐ糖蛋白有关。本研究通过监测人口咽腔表皮样癌细胞株 (ｈｕｍａｎｏｒａｌｃａｖｉｔｙｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃａｒｃｉｎｏｍａＫＢｃｅｌｌｌｉｎｅ ,ＫＢ细胞 )在逆转ＭＤＲ表型前后ｃ ｍｙｃ表达的改变 ,以了解ｃ ｍｙｃ基因是否影响了细胞内ＭＤＲ1基因调控水平以及细胞…     

抗肿瘤多药抗性核酶转录质粒的构建及其体外切割研究

目的 探讨体外核酶对肿瘤多药抗性相关基因ｍｄｒｌ ｍＲＮＡ的锤头状核酶（ｒｉｂｏｚｙｍｅ），并构建抗ｍｄｒｌ－ｒｉｂｏｚｙｍｅ和靶分子的体外转录质粒，进行体外切割实验。结果 发现抗ｍｄｒ１－ｒｉｂｏｚｙｍｅ能较好地切割ｍｄｒｌ－ｍＲＮＡ。结论 抗肿瘤多药性核酶的体外研究为基体内应用提供了参考，ｒｉｂｏｚｙｍｅ有可能成为逆转肿瘤多药抗性的新药物。     

蛇凝血素酶引起过敏性休克2例

例1男,55岁,主诉1997年底无诱因出现尿频尿急,夜尿增多,尿后余沥不尽,每晚小便5～10次,因无其它不适,未做任何治疗.1999年12月19日因腰痛10余天伴头痛加剧、大便秘结入院检查.入院时T 37℃,P 78次·min-1,BP 135/83mmHg,颈椎拍片及脑电图检查未见异常,入院诊断为前列腺增生,头痛腰痛待查.诊断明确,有手术指征,于1999年12月27日下午3:30,在镜检室骶麻下行尿道前列腺汽化电切术,手术顺利,术中有小静脉渗血,经压迫气囊后出血止.术后抗感染治疗,于18:00静滴头孢曲松(凯噻欣)2.0g加5%葡萄糖注射液500ml,并维持膀胱冲洗至20:00,冲洗液已变清,血压平稳.40min后,静滴5%葡萄糖注射液加止血芳酸0.4、止血敏2.0,为加强止血,又静注蛇凝血素酶(立止血Reptilase)1KU,5～6min后,患者突然感觉胸闷、头晕,出冷汗,伴心悸,面色苍白,四肢冰凉,HR 44次·min-1,BP 68/41mmHg,并出现恶心、呕吐胃内容物300ml.考虑可能是立止血引起的过敏性休克反应,立即予以地塞米松10mg,iv,多巴胺100mg静滴,心电监护,输氧,并行配血,输血,经上述处理,患者血压回升至120/75mmHg,12月28日,患者已无头晕、胸闷、心悸、出冷汗等现象.血常规示血红蛋白128 g·L-1,可除外失血引起的低血容量休克,考虑上述反应系立止血引起的过敏性休克.     

依达拉奉对原代培养大鼠海马神经元放射性损伤的保护作用

目的:研究依迭拉奉对原代培养大鼠海马神经元放射性损伤的保护作用.方法:30 Gy的X射线单次照射培养至12 d的海马神经元,用DAPI染核方法检测海马神经元凋亡情况,用MDA含量及SOD活性试剂盒测定细胞培养液MDA含量及SOD活性.结果:各组之间核固缩分数差异有统计学意义(P＜0.01),30 Gy组在照射后24 h核固缩百分数为(25.2±4.02)%,较0 Gy组差异有统计学意义,P＜0.01;30 Gy+依达拉奉100 mol/L组在照射后24 h核固缩百分数为(7.68±2.31)%,较30 Gy组及0 Gy组差异均有统计学意义(P＜0.01).各组之间MDA含量及SOD活性差异有统计学意义(P＜0.01).结论:依达拉奉通过降低自由基水平而对放射损伤的大鼠海马神经元起到保护作用.     

人参皂甙Rg1对NOS的调控在海马神经元放射性损伤防护中的意义

目的 研究人参皂甙Rg1对原代培养大鼠海马神经元放射性损伤的保护作用及机制,为放射性脑损伤的预防提供理论依据及新的方法.方法 30Gy的X射线单次照射培养至12d的海马神经元,用DAPI染核方法检测海马神经元凋亡情况,用NOS测定试剂盒测定细胞培养液NOS活性.结果 30Gy组在照射后24 h核固缩百分数为(25.3±3.57)%,较0Gy组(1.95%±0.78%)有显著性差异(P<0.01);30Gy+人参皂甙Rgl 20 mol/L组在照射后24 h核圆缩百分数为(7.43±1.51)%,较30Gy组(P<0.01)及0Gy组(P<0.01)均有显著性差异.30Gy组在照射后24 h细胞培养液NOS活性为(6.46±0.95)U/ml,较0Gy组[(3.20±0.70)U/ml]有显著性差异(P<0.01),30Gy+人参皂甙Rgl 20 mol/L组在照射后24hNOS活性为(3.85±0.69)U/ml,较30Gy组(P<0.01)及0Gy组(P<0.05)均有显著性差异.结论 应用人参皂甙可以通过降低X线照射后NOS活性而显著减少神经元的凋亡. 核圆缩百分数为(7.43±1.51)%,较30Gy组 P<0.01)及0Gy组(P<0.01)均有显著性差异.30Gy组在照射后24 h细胞培养液NOS活性为(6.46±0.95)U/ml,较0Gy组[(3.20±0.70)U/ml]有显著性差异(P<0.01),30Gy+人参皂甙Rgl 20 mol/L组在照射后24hNOS活性为(3.85±0.69)U/ml,较30Gy组(P<0.01)及0Gy组(P<0.05)均有显著性差异.结论 应用人参皂甙可以通过降     

Ribozyme基因对人肿瘤细胞株MCF—7／Adr多药抗药性的靶向逆转

设计合成能切割人ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ的Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因并构建成真核细胞表达克隆（ｐＨβＡｐｒ－１ｎｅｗ／５ｍＲ３），以靶向切割耐药癌细胞株（ＭＣＦ－７／Ａｄｒ）的ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ，抑制Ｐ－糖蛋白的表达，逆转多药抗药性。方法将含Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因的真核细胞表达克隆转染ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞，采用斑点杂交和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术测得Ｒｉｂｏｚｙｍｅ能在细胞中稳定表达，并使细胞中ｍｄｒ－１ｍＲＮＡ降解８３．５％，Ｐ－糖蛋白表达明显下降（ＡＢＣ法）。结果Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因转染的ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞耐药性下降至敏感细胞的６倍，而无Ｒｉｂｏｚｙｍｅ基因转染的ＭＣＦ－７／Ａｄｒ耐药性是敏感细胞的１０００倍。结论这种基因调控技术介入可能将为肿瘤耐药的治疗开辟一个新领域。     

不同剂量放射线对小鼠畸变产物耳声发射和外毛细胞Prestin蛋白表达的影响

目的 探讨单次不同剂量放射线照射对小鼠畸变产物耳声发射(DPOAE)和耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达的影响及放射线照射导致感音神经性聋的可能机制.方法 选取48只健康的Balb/c小鼠随机分成4组,每组12只(耳),分别给予0(对照组)、8(第1组)、12(第2组)、16 Gy(第3组)放射剂量的放射线照射,在照射后第7天对4组小鼠行DPOAE检测,同时分别采用Western-Blot分析和荧光实时定量中PCR检测4组小鼠耳蜗组织Prestin蛋白及Prestin mRNA表达的变化情况.结果 放射线照射第7天时,第1、2和3组小鼠3、4、6、8、10和12 kHz DPOAE幅值均较正常对照组小鼠明显降低(均P<0.05),正常对照组、第1、2和3组小鼠3、4、6、10、12 kHz DPOAE幅值依次减小(均P<0.05);第1、2和3组小鼠耳蜗组织Prestin蛋白及Prestin mRNA的表达均较正常对照组小鼠下降(均P<0.05),正常对照组、第1组、第2组和第3组小鼠耳蜗组织Prestin蛋白及Prestin mRNA的表达依次下降(均P<0.05).结论 单次放射线照射可损伤小鼠的听觉功能,使小鼠耳蜗外毛细胞Prestin蛋白及Prestin mRNA的表达下调,下调程度与照射剂量的大小呈正相关性;放射线致感音神经性听力损失可能与其导致耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达下调有关.     

调强放疗同步两种方案化疗治疗宫颈癌近期疗效及不良反应对比分析

目的:对宫颈癌IMRT同步两种不同化疗方案进行对比研究,探讨更佳化疗方案.方法:56例初治宫颈癌同步放化疗的患者分为单药顺铂化疗组(DDP组)30例和顺铂联合氟尿嘧啶化疗组(PF组)26例,对同步放化疗后1月、3月近期疗效及不良反应进行对比研究.结果:DDP方案组同步放疗后1月、3月有效率分别为86.67％和90.0％,PF组同步放化疗后1月、3月有效率分别为88.46％和92.31％,两组近期疗效比较,差异无统计学意义(P＞0.05).急性不良反应评价,两组方案Ⅲ-Ⅳ度骨髓抑制率分别为40.0％(DDP组)和15.38％(PF组),差异有统计学意义(P＞0.05).两组均未发生Ⅲ-Ⅳ级急性上、下消化道及急性泌尿系统反应,Ⅰ-Ⅱ级反应在两组中相似,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:在宫颈癌同步放化疗的化疗方案中,DDP方案与PF方案近期疗效无明显差别,两种化疗方案非血液学急性不良反应相当,DDP方案同步IMRT导致Ⅲ-Ⅳ度骨髓抑制明显高于PF方案同步IMRT.远期疗效及慢性不良反应有待进一步观察.