白血病过继免疫治疗时外周血T淋巴细胞诱导培养后的克隆性变化

本研究分析白血病细胞免疫时自体树突细胞（DC）和多种细胞因子诱导外周血淋巴细胞后T细胞克隆性的变化。采集21例化疗缓解后行细胞免疫治疗的白血病患者的骨髓和外周血,加入细胞因子培养,获得树突细胞（DC）和激活T细胞。用RT—PCR扩增代表T细胞克隆性的T细胞受体β链可变区（T—cellreceptorβvariable region,TCRBV）,用TCRBV基因扫描的方法观察培养前后T细胞克隆的特征性变化;对T细胞克隆的TCRBV进行序列分析。流式细胞术（FCM）检测CD3＋、CD4＋、CD8＋、CD56＋和CD4＋CD25str＋FOXP3＋,确定其细胞毒T细胞、辅助T细胞、调节T细胞和NK—T细胞的比例变化。结果表明：临床缓解后的白血病患者的T细胞呈寡克隆分布,分属在24个TCRBV家族中一些TCRBV基因家族的淋巴细胞克隆消失,仅少数保持多克隆分布,其中TCRBV24基因家族均为克隆性的分布（100％）。分析患者的TCRBV24基因序列特征时发现,3例在CDR3区共用motifVAG,2例共用GGG,表明这些TCRBV24有可能识别同一抗原,其中1例（例5）患者除TCRBV24在CDR3区有motifGGG外,TCRBV8也有GGG,也可能会识别同一抗原。外周血淋巴细胞经过13天的体外抗原和细胞因子培养后,培养前出现的一些寡克隆以及克隆完全缺失的状态随即出现了明显变化,培养后都出现完整多克隆分布。将培养前后T细胞进行流式细胞术分析显示,培养后淋巴细胞数目为培养前的3．38±1．20倍,CD3＋数培养前为（71．1±11．8）％细胞,培养第13天后为（95．4±3．2）％,明显增加;C1M＋数培养前为（26．7±11．4）％,培养第13天后为（27．0±13．1）％,无明显变化（P〉0．01）;CD8＋数培养前为（35．7±12．9）％,培养第13天后为（55．5±13．8）％,明显增加（P〈0．01）;CD3＋CD56＋数培养前为（3．1±1．6）％,培养第13天后为（9．8±6．1）％,增加2倍多（P〈0．01）;CIM＋CD25str＋FOXP3＋数培养前为（0．12±0．1）％,培养第13天后为（0．22±0．18）％（P〈0．01）。结论：T淋巴细胞诱导培养方法的主要作用是促进CTL和NK细胞增殖,缓解后白血病患者体内淋巴细胞群往往呈寡克隆增殖,一些克隆会共用同样的TCRBVCDR3模体,识别同样的抗原,细胞因子联合诱导与DC共培养后淋巴细胞恢复多克隆免疫状态,产生以CTL和NK—T为主的效应细胞。     

用抗原特异性树突状细胞激活的淋巴细胞治疗复发难治性非霍奇金淋巴瘤

本研究探讨负载自身肿瘤裂解物的树突状细胞(dendritic cells,DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killers,CIK)共培养后,治疗复发难治性非霍奇金淋巴瘤患者的临床免疫学疗效、毒副反应。选择9例复发难治性非霍奇金氏淋巴瘤患者,分离外周血单个核细胞,贴壁细胞体外经GM-CSF和IL-4诱导产生DC,并负载自体肿瘤细胞裂解物,悬浮淋巴细胞经IFN-γ、IL-2、抗CD3单克隆抗体、IL-1α体外诱导产生CIK细胞。7天后将负载抗原的DC与CIK共培养,12天后回输体内。利用流式细胞术、T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白(Ag-NORs)的检测及ELISA双抗夹心法检测过继免疫生物治疗前后各项免疫指标的变化,并观察临床疗效。结果表明:经细胞治疗后患者外周淋巴细胞Ag-NOR的IS值明显增高,呈上升趋势;CIK细胞培养后可见CD3+CD8+和CD3+CD56+细胞较培养前显著增加(p0.01),负载肿瘤抗原的DC致敏后CD3+CD8+和CD3+CD56+的表达较之单纯的CIK进一步明显提高(p0.01);将负载自身肿瘤抗原的DC与CIK共培养后,上清液中IFN-γ、IL-12的水平显著高于单独CIK对照组(p0.05)。5例患者通过影像学复查显示肿瘤较治疗前明显缩小;除一过性发热、畏寒外未见其它不良反应。结论:负载自身抗原的DC-CIK细胞的具有特异性杀伤淋巴瘤细胞的能力;外周淋巴细胞Ag-NOR的IS值明显增高,分泌细胞因子水平高于单纯CIK细胞,临床治疗效果令人满意。     

急性脑血管病患者血清和脑脊液三碘甲状腺原氨酸、甲状腺素及促甲状腺激素含量的变化及其临床意义

对６５例急性脑血管病（ＡＣＶＤ）患者血清与脑脊液（ＣＳＦ）中三碘甲状腺原氨酸（Ｔ３）、甲状腺素（Ｔ４）及促甲状腺激素（ＴＳＨ）的含量进行了测定，发现脑出血组与脑梗塞组血清与ＣＳＦ中Ｔ３、Ｔ４明显低于正常对照组（Ｐ均＜０．０１），ＴＳＨ则明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）；且脑出血组Ｔ３、Ｔ４明显低于脑梗塞组，ＴＳＨ则高于脑梗塞组；病情轻重与甲状腺激素的变化明显相关（Ｐ＜０．０５）；治疗前后甲状腺激素水平明显不同，治疗后Ｔ３、Ｔ４明显升高（Ｐ均＜０．０５），以Ｔ３升高最明显（Ｐ＜０．０１）。作者并就其改变机制及临床意义进行了初步讨论。     

综合康复治疗农村脑卒中患者肢体运动功能障碍的2年随访研究

为了改善脑卒中患者的预后,提高患者的生存质量,减少废用及误用综合征的发生,实现病而不残,残而不废,最大限度地减轻患者家庭和社会的负担。2年来我们对一组农村脑卒中患者进行综合康复治疗并跟踪随访,发现治疗组疗效明显优于对照组。1 对象与方法1.1 对象自1998年1月～2000年2月共观察本院住院的农村脑卒中患者76例,均经头颅CT确诊。其中脑出血32例,脑梗死44例,参照1989年中华医学会第二次全国脑血管病学术会议第三次修订的《各类脑血管疾病诊断要点》确诊。76例患者分为两组：对照组38例,男26例,女12例;年龄37～78岁,平均58…     

复方硫酸双肼屈嗪片的含量均匀度考察

目的:建立复方硫酸双肼曲嗪的含量均匀度方法,评价药品质量。方法:采用Aglient Eclipse XDB-CN柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.01 mol·L-1庚烷磺酸钠溶液(用20%磷酸调节pH至2.7)(55∶45),流速为0.8 mL·min-1,检测波长316 nm。结果:硫酸双肼屈嗪在34.38～343.8 mg·L-1的范围内线性关系良好(r=0.9999,n=6),测得平均回收率为100.1%(RSD=0.70%);氢氯噻嗪在25.70～257.0 mg·L-1的范围内线性关系良好(r=0.9999,n=6),测得平均回收率为100.9%(RSD=0.33%)。结论:本方法简便、快速,专属性强,可用于复方硫酸双肼屈嗪片的质量控制。     

微波消解-ICP-OES法测定水獭肝中的铁、锌、铜和镁含量

目的建立水獭肝中Fe、Zn、Cu和Mg 4种无机元素含量的分析方法。方法采用微波消解电感耦合等离子体原子发射光谱法(ICP-OES)法测定水獭肝中4种重金属元素,用国家生物成分分析标准物质黄芪验证方法的准确度。结果该方法线性良好,相关系数均≥0.999 9,相对标准偏差(n=6)≤2.0%,回收率在97%~103%之间,标准物质黄芪的测定值与标准值基本吻合。结论该方法快速、准确、灵敏度高,可以用于水獭肝中的铁、锌、铜、镁的测定。     

胸外科围手术期抗生素的规范使用与术后感染病原菌耐药性分析

目的探讨胸外科围手术期抗生素的规范使用与术后感染病原菌耐药性。方法选取医院胸外科手术执行预防用药规范后6个月住院并接受手术治疗的52例患者作为观察组,另选取规范执行前1年同期(2017年6月-2017年12月)的52例患者作为对照组,采用t检验和χ2检验,比较两组围手术期抗生素使用情况、住院治疗时间,患者用药后炎症因子改善情况及用药不良反应情况。分析胸外科术后感染口感染病原菌分布及耐药性。结果观察组抗生素使用时间(35.14±6.28)h、住院时间(9.27±1.35)d、抗生素费用(1352.37±245.69)元,均低于对照组(t=6.756, 6.176, 18.061,P<0.001);两组术后各炎性因子水平均出现明显升高,但观察组术后hs-CRP、IL-6等炎性因子水平均低于对照组(t=8.667, 23.992, 12.478, P<0.001);观察组并发症发生率为7.69%,低于对照组的23.08%;差异有统计学意义(χ2=4.727,P<0.05)。两组患者共发生术后感染16例,共培养出20株病原菌,常见病原菌有金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺...     

2006年成都市青羊区乙肝血清流行病学调查分析

[目的]调查我区城镇居民HBsAg携带率和乙肝感染率,14岁以下乙肝疫苗接种率,评价我区乙肝计划免疫管理工作的效果,为制定科学免疫策略提供依据。[方法]采用多级抽样的方法抽取青羊区城区4个社区943名1～59岁人群进行的乙肝血清流行病学调查。采集调查对象静脉血2～4ml,用ELISA法对标本进行HBsAg、HBsAb、HB-cAb检测。[结果]调查人群HBsAg、HBV感染率分别是6.64%、28.31%。14岁以下人群乙肝疫苗接种率94.70%。[结论]成都市青羊区2002年开展乙肝疫苗接种以来,人群乙肝流行病学特征发生了改变,HBsAb阳性率、HBV感染率均有不同程度的下降,15岁以下儿童下降更为明显。     

银杏达莫联合奥扎格雷钠治疗急性脑梗死32例疗效观察

目的观察银杏达莫联合奥扎格雷钠治疗急性脑梗死的疗效.方法将62例急性脑梗死患者,随即分为两组,治疗组应用银杏达莫联合奥扎格雷钠,对照组应用血塞通联合维脑路通,静脉滴注治疗.治疗2周后,分析对比两组的疗效及治疗组治疗前后血流变学指标的变化.结果治疗组总显效率、总有效率明显高于对照组(P<0.05);血液流变学指标两组治疗后与治疗前比较,均有显著性差异(P<0.01或P<0.05),两组治疗后比较有显著性差异(P<0.01 或P<0.05).结论银杏达莫、奥扎格雷钠联合治疗急性脑梗死,疗效显著,而且无出血等并发症.     

三叶半夏组培苗生长情况调查

目的为半夏快速繁殖技术体系的建立提供理论依据。方法通过一步成苗法获得半夏组培苗后进行移栽实验,并进行形态学观察和产量统计。结果半夏组培苗三种不同叶形的叶柄上均可萌生珠芽,块茎越大的植株大多出现三出复叶的时间较早,其产生的珠芽数也越多,且在移栽的当年就可长出佛焰苞;在一个生长期之后,母块茎的收获重量可达到栽种量的31.7倍;两批半夏组培苗的无性繁殖系数分别达到了12.8个/株和10.1个/株。结论半夏组培苗具有生长速度快,繁殖系数高的特点。