肿瘤浸润淋巴细胞的研究与应用

<正> 免疫治疗的进展,已有可能使之跻身于手术、放疗、化疗之列,成为肿瘤的第四大疗法。它的目的是在于调动肿瘤病人的免疫功能,增强对化疗药物或放射治疗的耐受能力,或者是在病人经手术或化疗、放疗后,清除体内残存的肿瘤细胞,以防止肿瘤的复发。其中免疫活性细胞的过继免疫治疗(adoptiveimmunotherapy,AIT)越来越受到重视。首先应用于     

重症急性胰腺炎肠系膜微循环变化及加贝酯、长托宁干预的实验研究

目的 探讨长托宁(Penehyclidine Hydrochloride,PH)、加贝酯(Gabexate Mesilate ,GM)对SD大鼠重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)肠系膜微循环的干预机制.方法 SD大鼠160只,随机分为假手术组(SO组)、胰腺炎模型组(SAP组)、胰腺炎GM干预组(GM组)、胰腺炎PH干预组(PH组)、胰腺炎GM联合PH干预组(GM PH组).观测2、6、12、24 h胰腺、腹水量变化,血清一氧化氮(NO)与内皮素(ET)水平及肠系膜微血管(微静脉毛细血管)形态、流态、血管周围状态.结果 SAP组腹水量、NO、ET及肠系膜微血管清晰度、管径、流速、周围血管出血、渗出与SO组比有显著差异(P<0.01).GM、PH、GM PH组与SAP组比较:腹水量、NO、ET、周围血管出血、渗出明显减少(P<0.01);微血管清晰度、管径、流速有显著增加(P<0.05或P<0.01).GM PH组与GM、PH组比较:腹水量、NO、ET、周围血管出血、渗出明显减少(P<0.05);微血管管径、流速有显著增加(P<0.05).结论 PH、GM合用药效增强,有改善SAP肠系膜微循环功能及减轻SAP作用.     

As_2O_3诱导胃癌细胞凋亡时蛋白激酶C及cAMP水平的变化

目的从第二信使角度探讨As2 O3 诱导胃癌BGC 82 3细胞凋亡的作用机制。方法采用免疫组化、流式细胞术 ,观察As2 O3 诱导胃癌细胞凋亡的形态学改变及凋亡率 ;采用放免方法检测As2 O3 诱导胃癌细胞凋亡时环磷酸腺苷、蛋白激酶C水平变化。结果As2 O3 能够显著增加细胞凋亡率 (P <0 .0 5 ) ,诱导细胞出现凋亡形态学改变 ;并上调胃癌细胞内环磷酸腺苷水平 (P <0 .0 1) ,下调蛋白激酶C的水平 (P <0 .0 5 )。结论As2 O3 通过上调环磷酸腺苷水平 ,下调蛋白激酶C水平诱导胃癌细胞凋亡 ,抑制细胞增殖。     

莪术醇联合氟尿嘧啶对裸鼠胃癌移植瘤生长、增殖细胞核抗原和P27表达的影响

目的  观察莪术醇联合氟尿嘧啶对胃癌裸鼠皮下移植瘤的影响。方法  将人胃癌细胞株BGC823接种于裸鼠皮下建立荷瘤裸鼠模型。将荷瘤裸鼠随机分为对照组、莪术醇组、氟尿嘧啶组、联合用药组（莪术醇联合氟尿嘧啶）,记录各组的肿瘤体积和瘤重。应用荧光定量聚合酶链反应（qPCR）和免疫组织化学法检测各组肿瘤组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、P27的表达。结果  对照组肿瘤体积和重量比其他3组升高（P <0.05）;联合用药组肿瘤体积和重量低于莪术醇组（P <0.05）;联合用药组肿瘤体积和重量与氟尿嘧啶组比较,差异无统计学意义（P >0.05）。各实验组肿瘤组织中PCNA的表达均低于对照组（P <0.05）;与莪术醇组和氟尿嘧啶组比较,联合用药组PCNA的表达降低（P <0.05）。各实验组移植瘤组织中P27的表达均高于对照组（P <0.05）;与莪术醇组比较,联合用药组P27的表达增强（P <0.05）;与氟尿嘧啶组比较,联合用药组P27 mRNA的相对表达有升高趋势,但差异无统计学意义（P >0.05）。与莪术醇组和氟尿嘧啶组比较,联合用药组P27蛋白阳性率升高（P <0.05）。结论  莪术醇联合氟尿嘧啶能抑制胃癌裸鼠皮下移植瘤的生长,其机制可能与调节PCNA、P27基因有关。

     

人工智能辅助技术在胃癌新辅助化疗患者HER2表达评估中的价值

背景与目的：胃癌存在较高的肿瘤异质性,部分胃癌患者新辅助化疗（neoadjuvant chemotherapy,NAC）前后人表皮生长因子受体2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)表达明显差异化。为了进一步研究HER2表达的异质性,并减少人为评估的视觉误差,本研究采用人工智能（artificial intelligence,AI）辅助显微镜对胃癌患者NAC前后HER2表达进行评估,评价AI的实用性及可行性,并研究NAC对胃癌患者HER2表达的影响,为后续治疗提供参考。方法：收集来自以河北医科大学第四医院为主的多中心、前瞻性、随机对照Ⅲ期临床试验（NCT01516944）中接受NAC的397例胃癌患者临床资料,NAC前胃镜咬检及NAC后手术标本HER2分别采用传统视觉评估及AI辅助显微镜评估,并设定3名高年资病理科医师综合评估结果为金标准。分析两种评估结果与金标准的一致性,探讨影响NAC前后HER2表达变化的临床病理学特征及表达改变对患者预后的影响。结果：相较于视觉评估,AI评估结果与金标准的一致性更佳（0.766 vs 0.85...     

CIK细胞对裸鼠腹膜移植人胃癌细胞增殖和凋亡影响的实验研究

目的研究细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine inducedkiller,CIK)对裸鼠腹膜移植人胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法体外制备CIK细胞。建立人胃癌细胞裸鼠腹膜移植小鼠模型,模型鼠腹腔注射CIK细胞,透射电镜观察腹膜移植癌组织形态学变化,流式细胞术(FCM)检测癌细胞增殖周期中G0/G1、S、G2/M期细胞比率、增殖指数(proliferationIndex,PI)和细胞凋亡指数(apoptosisIndex,AI)的变化。结果模型鼠腹膜癌组织细胞的超微结构出现不同程度的凋亡形态学改变,FCM检测DNA直方图上呈现有凋亡峰。G0/G1期细胞比率为(70.73±2.02)%～(75.88±2.23)%,AI为(7.50±2.69)%～(13.16±2.58)%,与对照组相比显著增加,P=0.0000,P=0.008,P<0.01;S期细胞比率为(14.96±1.32)%～(15.34±1.30)%,无显著变化,P>0.05;G2/M期细胞比率为(14.31±1.51)%～(8.91±0.86)%,PI为(29.27±2.05)%～(24.12±2.10)%,均显著降低,P=0.000、0.008、0.033、0.043,P<0.01。随CIK细胞注射剂量的增加和作用时间延长,G0/G1期细胞比率和AI逐渐增加,而G2/M期细胞比率和PI下降,差异均有统计学意义,P<0.05或P<0.01。细胞AI与G0/G1期细胞比率正相关,r=0.676,与PI负相关,r=-0.659。结论CIK细胞可以影响胃癌腹膜种植转移细胞的细胞周期,并具有诱导细胞凋亡的作用。     

全机器人下远端胃大部切除、毕Ⅱ＋Braun’s吻合术

全机器人下远端胃大部切除术,术中依次解剖胃右血管,胃小弯前壁,胃网膜右血管,胃网膜左血管,胃左血管后,分别离断胃周血管并完成D2清扫,用直线切割闭合器离断十二指肠,然后保留部分近侧胃并于胃上部以直线切割闭合器离断胃壁;然后用直线切割闭合器分别进行毕Ⅱ+Braun’s吻合。穿过winsiow孔于吻合口周围预防性留置腹腔引流管;适当延长脐下Trocar孔切口取出标本。     

survivin胞浆与胞核表达在原发性和转移性上皮卵巢癌中的意义

0引言卵巢癌是妇科最常见的恶性肿瘤之一,近年来其发病率有增长的趋势。相关研究发现,凋亡抑制蛋白survivin作为一种重要的细胞凋亡、周期调节因子,在肿瘤细胞的胞浆与胞核的表达不同,并可能在肿瘤发生和发展中起不同的作用。其与卵巢癌的关系也尚未明确,为进一步明确两者在卵巢癌中的表达和意义,我们采用免疫组织化学的方法检测了其在卵巢癌中的表达,并分析了其与临床病理特征的关系。     

应用蛋白质组学技术筛选鉴定锌指蛋白139调控的胃癌转移相关蛋白质

目的以胃癌SGC7901细胞原位移裸鼠模型为对象,通过荧光双向差异凝胶电泳（2D-DIGE）结合液质联用（LC-MS）质谱
分析技术鉴定ZNF139 调控的胃癌转移相关蛋白质。方法合成针对ZNF139 的小干扰RNA（ZNF139-siRNA）,以
ZNF139-siRNA转染人胃癌细胞株SGC7901,G418筛选。以ZNF139-siRNA质粒转染的胃癌细胞、阴性质粒转染的胃癌细胞
及普通胃癌细胞分别进行裸鼠胃癌原位移植。造模成功后取出原位移植瘤及腹腔转移淋巴结。荧光双向差异凝胶电泳
（2D-DIGE）技术分别分离ZNF139-siRNA 各组原位移植瘤及腹腔转移淋巴结蛋白质;选定差异点,胶内酶解后,液质联用
（LC-MS）质谱分析技术鉴定蛋白质。蛋白印迹（Western blot）技术验证差异蛋白质的表达。结果转染ZNF139-siRNA质粒后
SGC7901细胞中ZNF139的表达受到有效抑制。与阴性质粒组及空白组比较,阳性质粒组原位移植瘤生长更慢（P<0.05）,且腹
腔淋巴结转移率更低（P<0.05）。蛋白质组学结果发现在阳性质粒组原发灶中Fascin、hnRNPA2/B1表达下调,ANXA1表达上
调;阳性质粒组转移淋巴结中ANXA5表达下调（P<0.05）。Western blot验证结果与蛋白质组学结果相符。结论ZNF139可能
通过调节Fascin、hnRNPA2/B1、ANXA1、ANXA5促进胃癌淋巴结转移。
     

胃癌组织中亲环素A表达与肿瘤细胞体外化疗药物敏感性的关系

目的：分析胃癌组织中亲环素 A(CypA)表达与肿瘤细胞体外化疗药物敏感性及耐药相关蛋白的关系,并探讨其意义。方法磺酰罗丹明 B(Sulforhodamine B,SRB)法检测94例胃癌组织对氟尿嘧啶(5-FU)、奥沙利铂(L-OHP)、阿霉素(ADR)的体外化疗药物敏感性;对相应石蜡标本进行免疫组化染色,检测 CypA 蛋白及耐药相关蛋白 P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(Glutathione S-transferase-π,GST-π)、x-IAP、Survivin 的表达。结果 CypA、P-gp、GST-π、x-IAP、Survivin 阳性表达率分别为72.3%(68/94)、90.4%(85/94)、62.8%(59/94)、66.0%(62/94)、76.6%(72/94),均明显高于癌旁组织(均 P <0.05)。5-FU、L-OHP 对 CypA 强表达的肿瘤细胞抑制率低于弱表达者(均 P <0.05),而 CypA 的表达情况与 ADR 对肿瘤细胞的抑制率无明显关系(P >0.05)。相关分析显示,CypA 蛋白与 P-gp、x-IAP、Survivin 均存在正相关关系(均 P <0.05)。结论胃癌细胞对5-FU、L-OHP 药物敏感性与 CypA 蛋白表达有关,该作用可能是 CypA 调节部分耐药相关蛋白实现的。