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目的 构建HO1基因的真核干扰表达载体,评估其转染人胃癌细胞系SGC-7901细胞后对HO1基因的干扰效果及其功能.方法 将外源性重组真核干扰表达载体HO1基因(pS/HO1)转染到人胃癌细胞系SGC-7901内,经G418筛选并建立siRNA表达载体稳定沉默胃癌SGC-7901细胞HO1基因的细胞系,分为SGC-7901-pS/HO1组,转染空质粒细胞(SGC-7901-pS)组和未处理细胞(SGC-7901)组;用实时荧光定量PCR和蛋白印迹验证HO1基因在各组细胞中的表达,并通过CCK-8和克隆形成实验分别观察HO1基因被干扰后细胞的生物学行为.结果 与SGC-7901-pS组相比,SGC-7901-pS/HO1细胞中HO1基因蛋白表达明显减少,降低了5.58倍(0.321±0.051 vs 1.675±0.153,P<0.05);与对照组相比较,SGC-7901-pS/HO1实验组较SGC-7901-pS对照组细胞增殖数量明显减少(P<0.001);与转染pS空载体的SGC-7901-pS细胞对照组相比,SGC-7901-pS/HO1细胞的克隆形成明显减少,降低了3.45倍(8.32±1.142 vs 2.32 ±0.362,P<0.05).结论 HO1基因真核siRNA表达载体筛选成功,为继续深入的研究HO1基因在胃癌中的功能提供了依据. 相似文献
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内皮素-1(endothelin-1,ET-1)是由血管内皮细胞产生的一种生物活性肽,具有广泛的生物学效应,在肿瘤的生长和分化中起着重要的作用。本研究采用放射免疫分析法(radloimmunoassay,RIA)对50例乳腺癌患者和30例乳腺良性病变手术前后及20例正常人血清ET-1的含量进行检测并作比较,以探讨ET-1与乳腺癌发生发展的关系。 相似文献
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摘要:目的 探讨环氧化酶 2(COX 2)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达与胃肠道间质瘤(GIST)的性质、恶性程度及预后的关系。方法 采用免疫组织化学S P法检测54例GIST中的COX 2及VEGF表达情况,并分析它们与GIST临床病理特征的关系及其对预后的影响。结果 COX 2在良性、潜在恶性和恶性中的阳性表达率分别为53.3%,83.3%和96.3%;VEGF则分别为53.3%,75.0%和92.6%;COX 2和VEGF在恶性GIST中的表达明显高于潜在恶性及良性GIST(P<0.05);COX 2与VEGF表达呈显著正相关(r=0.6667);COX 2,VEGF的表达与肿瘤良、恶性的生长方式、肿瘤大小、肿瘤中心有无坏死有明显关系(P<0.05);COX 2,VEGF高表达者5年生存率明显低于低表达者(P<0.01)。结论 COX 2和VEGF表达与GIST生长、浸润转移关系密切;联合检测可以互补并作为判断GIST性质、恶性程度、转移及预后的客观指标。 相似文献
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血红素氧合酶(HO)是生物体内催化血红素分解代谢的限速酶。近年来发现,血红素氧合酶-1(HO-1)在许多重要的生理和病理过程中起调节作用,与肿瘤的发生发展密切相关。本文就HO-1与肿瘤发生发展的关系作一综述。 相似文献
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目的:探讨联合应用罗格列酮(ROS)与维甲酸(ATRA)对人结直肠癌细胞株HCT-15细胞增殖和凋亡的影响。方法:实验分为ROS单药组(ROS浓度分别为6.25、12.5、25、50μmol/L)、ATRA单药组(ATRA浓度为2μmol/L)、ROS与ATRA联合用药组(ROS以上各浓度+2μmol/L ATRA)。在分别或联合应用不同浓度ROS和ATRA干预人结直肠癌细胞株HCT-15不同时间后,MTT法检测药物对细胞生长的抑制作用;流式细胞仪检测细胞发生凋亡和细胞生长周期的变化;免疫细胞化学法检测干预前后细胞COX-2、MMP-7和TIMP-1表达蛋白水平的变化。结果:单独应用ROS可抑制HCT-15细胞的增殖,并呈浓度-时间依赖性,与ATRA联合应用则有明显的协同作用(q〉1.15)。流式细胞术结果显示:单独应用ROS和ATRA可导致G0/G1期细胞比例上升,而S期比例下降明显,诱导HCT-15细胞凋亡;而联合应用对细胞G1期的阻滞作用更强(P〈0.05)。免疫细胞化学结果显示:COX-2、MMP-7和TIMP-1在对照组人结直肠癌细胞HCT-15中阳性表达率分别为66.79%、73.21%、64.08%,联合应用后3种蛋白的表达率为19.33%,20.58%,13.13%,二者差异有统计学意义(P〈0.01)。结论:ROS和ATRA可降低HCT-15细胞中COX-2、MMP-7和TIMP-1的表达,使细胞周期阻滞于G1期,诱导细胞凋亡,从而发挥抑制细胞增殖的作用。 相似文献
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用PCR-SSCP方法对44例乳腺癌患者进行nm23基因第5外显子检测,11例发生突变(25%),将11例突变患都分为两组,一组(6例)加大放疗、化疗剂量,另一组(5例)常规治疗。随访2年,前组6例中仅1例复发,后组5 中3例复发,二者有显著差异。提示检测nm23基因第5外显子对乳腺癌的降预后判断具有重要意义。 相似文献
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