鼠颊黏膜干细胞的分离及鉴定

目的 探讨鼠颊黏膜干细胞的体外分离和培养方法,以获得稳定生长的黏膜干细胞.方法 DispaseⅡ酶和Trypsin-EDTA两步法分离昆明小鼠颊黏膜上皮细胞,接种于以小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞为滋养层的培养板中.达尔伯克氏必需基本培养基(Dulbecco's minimum essential medium,DMEM)培养24 h后换用角质细胞无血清培养基(keratinocyte serum-free medium,K-SFM)继续培养,部分细胞72 h后行成骨、成脂诱导和改良型Kaplow碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色鉴定;部分细胞继续培养5 d后,消化转移至Ⅳ型胶原预包被的培养板中,加入黏膜干细胞培养基培养,观察细胞克隆形成和成骨、成脂诱导、兔抗鼠角蛋白和ALP染色结果.结果 初次分离的上皮细胞群83.96%处于G0或G1期,培养72 h后可见克隆样生长细胞,成骨、成脂诱导和ALP染色均呈阳性;细胞在Ⅳ型胶原包被的培养板上快速贴壁,呈圆形或卵圆形,胞体小,折光性强,克隆样生长,兔抗鼠角蛋白、ALP染色和成骨、成脂诱导均呈阳性.结论 运用滋养层细胞培养法获得大量干细胞样上皮细胞后,Ⅳ型胶原黏附结合K-SFM与NIH3T3培养上清液混合培养法可实现鼠颊黏膜干细胞的初步纯化和快速培养.     

体外培养条件下人骨髓间充质干细胞碱性成纤维细胞生长因子基因的转染与鉴定

背景:骨髓间充质千细胞的定向分化需要合适生长因子的调控,利用细胞因子基因转染促进其生长,定向分化和加速骨缺损修复是近年来研究热点.目的:探讨在体外培养条件下转染碱性成纤维细胞生长因子基因对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响.方法:将含人pcDNA3.1-bFGF真核表达载体DH-5α菌扩增,用EndoFree质粒抽提纯化试剂盒抽提质粒,并对所提取的pcDNA3.1-bFGF重组表达质粒进行酶切鉴定和测序.利用脂质体将pcDNA3.1-bFGF质粒转染到生长良好的P3代骨髓间充质干细胞,G418筛选获得抗性克隆.采用荧光定量PCR、免疫组化、免疫荧光、Westem-blot检测转染后骨髓间充质干细胞碱性成纤维细胞生长因子基因及其产物的表达,流式细胞仪检测细胞增殖周期.结果与结论:脂质体介导pcDNA3.1-bFGF重组表达质粒转染骨髓间充质干细胞后,转染细胞确实表达碱性成纤维细胞生长因子,且表达部位丰要位干胞浆.转染细胞增殖活力加强,处于增殖周期的细胞比例更高(P<0.05).提示采用脂质体转染法能将pcDNA3.1-bFGF成功导入体外培养的骨髓间充质干细胞,碱性成纤维细胞生长因子基因转染后可改善骨髓间充质干细胞的生存状态,促进其增殖.     

总胆固醇与男性肺癌发病关系的前瞻性队列研究

目的 探讨基线TC与中国男性肺癌发病风险的关联及其强度。方法 自2006年5月,以开滦集团全体在职及离退休男性职工为调查对象,建立开滦集团男性动态队列并随访。基线调查时收集研究对象的社会人口学、个人疾病史、身体测量指标和TC等基线信息,并利用随访收集肺癌发病结局信息。参考《中国成人血脂异常防治指南》与研究人群TC分布特征,TC按照五分位数进行分组：<160、160～、180～、200～、≥240 mg/dl,以TC 160～mg/dl组为参比组,利用Cox比例风险模型分析基线TC与男性肺癌发病风险的关联性、限制性立方样条曲线分析其非线性关系。结果 截至2014年12月31日,109 884名男性进入队列,共计随访763 819.25人年,随访时间M=7.88年,收集肺癌新发病例808例。调整年龄、文化程度、收入、吸烟、饮酒、粉尘暴露史、FPG、BMI后,以160～mg/dl组为对照,TC偏低（<160 mg/dl）和TC升高（≥240 mg/dl）组男性肺癌发生风险分别升高34%（HR=1.34,95% CI：1.04～1.72）和45%（HR=1.45,95% CI：1.09～1.92）。剔除随访2年内肺癌新发病例及有高血脂病史者后,结果无显著变化。结论 TC与男性肺癌发生相关,TC过高或过低男性的肺癌发病风险均升高,保持适当的TC水平可能是预防和控制肺癌的有效措施之一。     

基线高敏C-反应蛋白水平与男性吸烟人群肺癌发病风险队列研究

目的 探讨高敏C-反应蛋白（high sensitivity C-reactive protein,hsCRP）与男性吸烟人群肺癌发病的关联性。方法 以参加2006年7月开滦集团体检的男性吸烟人群建立队列,收集基线调查资料和hsCRP实验室检测结果。通过每2年1次的体检和每年1次的目标人群健康状况相关信息数据库检索,收集肺癌发病和死亡等结局信息。采用多因素Cox比例风险回归模型分析男性吸烟人群基线hsCRP水平与肺癌发病风险,调整变量包括年龄、吸烟程度、饮酒、体质指数和糖尿病史情况。结果 至2014年12月31日,纳入队列38 099人,随访期内共收集新发肺癌333例。hsCRP<1 mg/L组、hsCRP 1~3 mg/L组和hsCRP >3 mg/L组中新发肺癌8年累积发病率分别为727/10万、995/10万和1 344/10万,组间差异具有统计学意义（χ2=23.79,P<0.001）。调整年龄、吸烟程度、饮酒、体质指数和糖尿病史后,hsCRP 1~3 mg/L组和hsCRP>3 mg/L组患者肺癌发病风险分别是hsCRP< 1 mg/L组的1.37倍和1.69倍,差异均有统计学意义（95% CI:1.06~1.77,P=0.017;95% CI:1.29~2.23,P<0.001）。结论 基线hsCRP水平升高增加了男性吸烟人群肺癌发病风险。     

颌骨嗜酸性肉芽肿的临床特点——文献复习及1例报告

目的分析颌骨嗜酸性肉芽肿的临床特点。方法报告1例多发性颌骨嗜酸性肉芽肿,并复习相关文献。结果检索收集中文文献15篇,英文文献61篇。颌骨嗜酸性肉芽肿主要发生在下颌骨,男女比大约2∶1,临床表现和X线片改变与病变的发生部位有关。治疗以外科刮除为主,必要时可行放疗或化疗。有一定的复发率。结论颌骨嗜酸性肉芽肿,临床积极治疗和密切随访十分必要。     

新生儿缺氧缺血性脑病的CT诊断与治疗

新生儿缺氧缺血性脑病是由于各种围产期因素引起的缺氧和脑血流减少或暂停而导致胎儿和新生儿的脑损伤，足月儿多见。轻者预后尚好，严重者可早期死亡或造成不可逆脑损伤。应引起；陆床工作者的高度重视。l材料与方法选择1993年7月到1995年6月间经呼诊断为本病的72例新生儿，均有不同程度的窒息史。AICAR评分2－8不等，其中男性功例，女18例，男女比为3：1，出生时间16h到23do叮机为GEMAX－640型，层距snun－lonun，层厚srnm～10rum，窗宽十80H，窗位26H－28H，全部平扫，其中肥例进行1次一2次CT复扫。2结果2．lgy表现分析本组72例CT…     

针药并用治疗脑梗死后遗症之偏瘫

脑梗死是当今社会中老年人常见的疾病,发病率较高,致残率亦高.笔者2004～2007年,采用电头针为主配以中药益气通脉法治疗脑梗死后遗症偏瘫118例,疗效满意,现报道如下.     

浅谈短暂性脑缺血的中西医防治

本文对短暂性脑缺血的临床诊断要点和具体特征症状以及常见症状做了详尽的要点描述，力求使医者在症状诊断上确切和审慎，既不延误病情诊断，又能及早进入治疗阶段。强调短暂性脑缺血之短暂为24h之内，多数仅为数分钟或数十分钟，可以频发，并指出颈动脉系统和椎动脉系统症状特点。治疗上提出中西医防治方法，把现代医学扩管和扩容作为常规疗法，重点应用中药防治五法：先以活血益气通络，进而平肝息风、祛痰除湿滋养肝肾，步步推进，邪去而正复。最终使得患者症状得以明显控制和缓减，减少再发。