体外培养条件下人骨髓间充质干细胞碱性成纤维细胞生长因子基因的转染与鉴定

背景：骨髓间充质干细胞的定向分化需要合适生长因子的调控,利用细胞因子基因转染促进其生长、定向分化和加速骨缺损修复是近年来研究热点。 目的：探讨在体外培养条件下转染碱性成纤维细胞生长因子基因对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响。 方法：将含人pcDNA3.1-bFGF真核表达载体DH-5α菌扩增,用EndoFree质粒抽提纯化试剂盒抽提质粒,并对所提取的pcDNA3.1-bFGF重组表达质粒进行酶切鉴定和测序。利用脂质体将pcDNA3.1-bFGF质粒转染到生长良好的P3代骨髓间充质干细胞,G418筛选获得抗性克隆。采用荧光定量PCR、免疫组化、免疫荧光、Western-blot检测转染后骨髓间充质干细胞碱性成纤维细胞生长因子基因及其产物的表达,流式细胞仪检测细胞增殖周期。 结果与结论：脂质体介导pcDNA3.1-bFGF重组表达质粒转染骨髓间充质干细胞后,转染细胞确实表达碱性成纤维细胞生长因子,且表达部位主要位于胞浆。转染细胞增殖活力加强,处于增殖周期的细胞比例更高(P < 0.05)。提示采用脂质体转染法能将pcDNA3.1-bFGF成功导入体外培养的骨髓间充质干细胞,碱性成纤维细胞生长因子基因转染后可改善骨髓间充质干细胞的生存状态,促进其增殖。     

PRL-3和RhoC在A549细胞中的表达及意义

背景与目的 在前期研究中,我们发现在非小细胞肺癌中PRL-3和RhoC的表达具有相关性,提示两者可能存在相互作用.本研究通过检测两者在A549细胞迁移中的作用以及是否存在相互作用,为进一步研究它们在肿瘤发生发展中的作用机理提供实验依据.方法 应用PRL-3抗体、RhoC抗体分别阻断A549细胞中PRL-3和RhoC的功能,采用细胞划痕实验检测两者对其迁移能力的影响;应用RT-PCR检测PRL-3和RhoC表达的变化.结果 PRL-3和RhoC功能被阻断后,A549细胞迁移能力明显降低;阻断PRL-3的A549细胞中 RhoC表达降低,然而阻断RhoC的A549细胞中 PRL-3表达无明显改变.结论 PRL-3和RhoC 可能具有促进A549细胞远处转移的功能;PRL-3可能具有上调RhoC表达的功能;PRL-3促进癌细胞远处转移的功能可能是通过RhoC及其下游因子实现的,而RhoC对PRL-3的表达可能无反馈性调节作用.     

透明质酸改性的聚乳酸支架

背景：聚乳酸材料不具备细胞外基质材料的良好细胞亲和性能,采用化学方法将透明质酸交联制得的水凝胶具有良好的生物相容性。 目的：以透明质酸对新型多孔隙率聚乳酸支架的进行改性,观察改性后支架的细胞相容性的改变。 方法：采用盐析法制备出高孔隙率聚乳酸支架,采用低浓度NaOH进行表面轻度水解后,利用EDC和透明质酸进行支架的改性。 结果与结论：透明质酸改性聚乳酸支架在扫描电镜下显示为多微孔的三维立体结构,孔壁及界面平滑,孔隙之间可见更细小微孔相连。改性聚乳酸支架水滴渗入较快,改性后多孔支架的保水能力与吸水能力得到明显的改善;透明质酸改性聚乳酸支架上细胞黏附及增殖优于未改性聚乳酸支架。透明质酸改性聚乳酸组软骨细胞生长密度及基质分泌更加旺盛。表明透明质酸改性聚乳酸多孔支架仍保持多孔的三维结构,其水亲和力、吸水能力、保水能力和细胞相容性均得到明显改善。 关键词：透明质酸;聚乳酸;多孔支架;表面改性;水亲和力;吸水能力 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.03.023     

全球肺癌筛查卫生经济学研究的系统评价

目的 了解全球肺癌筛查的卫生经济学评价研究进展,为我国相关研究和筛查工作开展提供参考。方法 系统检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、中国知网及万方数据知识服务平台自建库至2018年6月30日间肺癌筛查卫生经济学研究相关文献,摘录其经济学评价方法及结果等信息,并进行质量评价。成本统一货币单位后计算增量成本效果比（ICER）后计算与当年当地人均GDP比值。结果 共纳入23项研究（1项基于人群随机对照试验,20项完全基于模型评价）,整体质量较好;22项来自发达国家,11项筛查起始年龄为55岁,18项目标人群考虑了吸烟史;评价的筛查技术全部涉及低剂量螺旋CT（LDCT）,筛查频率以每年1次（17项）和终生1次（7项）居多。22项研究可获得与未筛查相比的ICER,其中17项研究报道的ICER低于3倍当年当地人均GDP。各有15项和7项研究可获得每年1次和终生1次的ICER,其中各有12项和7项支持其经济有效,且终生1次略优于每年1次;不同筛查起始年龄和吸烟包年的经济有效性优劣差异不明显。结论 发达国家多开展基于模型LDCT肺癌筛查卫生经济学评价,并结合年龄和吸烟史进行高危人群选择,初步提示该方案经济有效;可为证据有限的欠发达地区提供参考,但实施需结合当地卫生资源现状;预算有限时低频次LDCT筛查更佳,而筛查起始年龄和吸烟史等细节确定需结合人群特征进行精准评价。     

兔颞下颌关节盘纤维软骨细胞分离培养的实验研究

 【目的】探讨颞下颌关节盘纤维软骨细胞的分离及体外扩增的条件，观察关节盘纤维软骨细胞体外培养的生物学特性。【方法】在无菌条件下，切取2周龄新西兰白兔颞下颌关节盘，剪至1．0m^3的碎块，0．5g／mL胰酶消化30min、胶原酶消化4h，200目筛网过滤，获得关节盘纤维软骨细胞。在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率，甲苯胺蓝染色、、胶原免疫组化染色鉴定，测定其生长曲线。透射电镜观察细胞超微结构。【结果】原代培养的关节盘纤维软骨细胞12h可观察到贴壁细胞，48h贴壁细胞逐渐增多，大部分细胞为短梭形，小部分为多角形，第4天可见多个细胞克隆形成，第8天时细胞彼此相连，铺满平底，细胞以梭形为主，部分多角形。传代后12h贴壁率达90％，大部分为多角形，4～5d即可张满瓶底。甲苯胺蓝染色可见异染颗粒，胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒。细胞内线粒体、内质网发达、高尔基体发达。【结论】体外分离培养的兔颞下颌关节盘纤维软骨细胞具有较强的增殖能力。     

清热化湿活血化瘀治疗难治性肾病的临床研究

目的：观察清热化湿、活血化瘀法治疗难治性肾病（湿热瘀血证）的有效性和安全性。方法：采用随机对照临床试验的方法分为二组。治疗组30例,采用清热化湿、活血化瘀法治疗;观察组30例,采用激素加环磷酰胺治疗。观察治疗前后两组临床综合疗效、中医证候积分、24小时尿蛋白、血浆白蛋白、凝血功能、血脂等方面的变化。结果：治疗组总有效率73.3%,对照组总有效率53.3%,两组比较有统计学意义（P〈0.05）。治疗后治疗组血浆白蛋白上升,尿蛋白下降,血脂下降,APTT、PT延长（P〈0.05）;且明显优于对照组（P〈0.05）。治疗组激素、细胞毒药所致副作用病例数减少。结论：清热化湿、活血化瘀法能减少难治性肾病（湿热瘀血证）尿蛋白,升高血浆白蛋白,改善主要临床症状,改善高凝状态,降低血脂,并能减少激素、细胞毒药物副反应。     

中药加电头针为主治疗脑梗死及其后遗症

脑梗死是脑卒中最常见的一种疾病,其临床表现属中医学的中风范畴,其发病或急或缓,多引起言语障碍、口眼歪斜、肢体偏瘫等症状。近年来,笔者运用补气活血中药加电头针治疗脑梗死42例,取得明显疗效。一般资料42例中男28例,女14例。年龄均在38岁以上,其中50～65岁30例。所有患者都出现半身不遂,口眼     

新生儿缺氧缺血性脑病的CT诊断与治疗

新生儿缺氧缺血性脑病是由于各种围产期因素引起的缺氧和脑血流减少或暂停而导致胎儿和新生儿的脑损伤，足月儿多见。轻者预后尚好，严重者可早期死亡或造成不可逆脑损伤。应引起；陆床工作者的高度重视。l材料与方法选择1993年7月到1995年6月间经呼诊断为本病的72例新生儿，均有不同程度的窒息史。AICAR评分2－8不等，其中男性功例，女18例，男女比为3：1，出生时间16h到23do叮机为GEMAX－640型，层距snun－lonun，层厚srnm～10rum，窗宽十80H，窗位26H－28H，全部平扫，其中肥例进行1次一2次CT复扫。2结果2．lgy表现分析本组72例CT…