中性粒细胞凋亡与急性肺损伤

急性肺损伤时,中性粒细胞是造成过度性、失控性炎症反应的主要因素.中性粒细胞凋亡异常引起的功能和数量上的改变,可能是参与过度炎症反应的重要机制之一.中性粒细胞凋亡涉及到多基因、多因素的综合作用.深入了解Au时PMN凋亡的规律及调控机制,不仅有助于进一步阐明ALI发病机制,而且可能为治疗ALI提供新的思路和手段.     

紫杉醇对不同p53基因型肺癌细胞作用的研究

目的:观察紫杉醇对3种不同p53基因型肺癌细胞的作用。方法:以不同浓度紫杉醇(0.1、1.0、10、100、1 000nmol/L)分别作用肺癌细胞A549、H322、H1299不同时间(4、12、24、48、96 h),实验同时设阴性对照组(不加紫杉醇)和空白对照组(只加细胞培养液)。采用MTT、流式细胞术、Western blotting检测细胞的生长及细胞周期、凋亡、乙酰化微管蛋白、p53蛋白等指标变化。结果:紫杉醇对3株肺癌细胞的生长抑制作用均随着作用时间的延长而增强(P0.05);不同浓度紫杉醇对3株细胞生长的影响也存在差异(P0.05)。3株细胞中A549细胞半数抑制浓度相对较低,但3株细胞间对紫杉醇敏感性的差异无统计学意义(P0.05)。紫杉醇10 nmol/L作用时,3株细胞G2/M期变化趋势基本一致,1 000 nmol/L作用时,A549细胞G2/M期比例与作用时间呈正相关(P0.05),H322和H1299的G2/M细胞于24 h达高峰,作用后期H1299出现异常多倍体;同浓度紫杉醇作用的各株肺癌细胞的凋亡呈时间依赖性,但1 000 nmol/L组诱导的细胞凋亡比10 nmol/L组更晚出现。浓度依赖性实验中,10 nmol/L诱导凋亡比例最高;紫杉醇浓度≤100 nmol/L时,G2/M期比例随浓度增加而增高(P0.05);紫杉醇浓度≥100 nmol/L时,各肺癌细胞株G2/M期比例间的差异无统计学意义。凋亡和G2/M期阻滞无相关性(P0.05)。紫杉醇作用后,A549细胞p53蛋白呈浓度和时间依赖性增加,H322细胞p53蛋白无明显变化。3株细胞乙酰化微管蛋白均较对照组显著上升(P0.05)。结论:紫杉醇对不同p53基因型肺癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性。紫杉醇可增加野生型p53蛋白表达,诱导p53依赖和非p53依赖的两种凋亡途径,p53基因型影响了高浓度紫杉醇对肺癌细胞的周期阻滞作用,但对紫杉醇化疗敏感性无显著影响。     

慢性阻塞性肺疾病诊治进展

慢性阻塞性肺疾病(COPD)仍然是一个重要的公共卫生问题,也是病死率呈上升趋势的少数慢性疾病之一.近几年COPD发病机制、全身效应、急性发作和治疗等方面都有许多新的进展.目前COPD已被定义为可以预防、可以治疔的疾病,除了肺部病变的特点外,还伴有一些与患者疾病严重性相关的显著的肺外效应.本文从定义、诊断、病情评估和治疗...     

生存素及其在肿瘤研究中的意义

生存素(survivin)是凋亡抑制蛋白家族成员,同时参与细胞周期和凋亡的调节,在决定细胞生存中起重要作用。人类基因组中survivin是肿瘤最为特异性的基因之一,与临床不良预后密切相关,并因在肿瘤靶向治疗中的优势而倍受关注。本文从分子生物学、功能、在肿瘤诊治中的意义等方面对survivin作一简述。     

几项生物学指标与肺癌患者5年生存率的相关性分析

目的：评估p53蛋白、p21，CD44v，P-糖蛋白及常用临床病理指标对判断肺癌患者预后的意义。 方法：收集北京协和医院胸外科1998—02／07收治的肺癌患者30例，所有患者在术前均未接受过化疗或放疗。采用流式细胞术检测30例冻存的肺癌及10例相应远离肿瘤部位的正常肺组织中p21，CD44v，P-糖蛋白、p53蛋白的表达，结合临床病理指标，与患者术后5年生存率及生存期进行单因素和多因素分析。计数资料采用精确概率法进行检验，同时用Cox比例风险模型对患者的预后进行多因素分析。 结果：①肺癌组织中p53蛋白、p21，CD44v，P-糖蛋白的阳性率明显高于远癌肺组织（P〈0．01）。②p53蛋白,CD44v，P-糖蛋白阳性表达者5年生存率显著低于阴性表达者（P〈0．05）。吸烟患者5年生存率亦明显低于不吸烟的患者（12％比62％，P〈0．05）。随着病理分期的增加、肿瘤直径的增大和分化程度的降低，患者5年生存率亦呈下降趋势（P〈0．Ol或0．05）。③单因素分析表明，影响患者术后5年生存率的因素为p53蛋白、CD44v、P-糖蛋白的异常表达、患者是否吸烟及手术时p-TNM分期、肿瘤大小和分化程度（P〈0．05或0.01）。④多因素分析则显示，仅p53的异常表达、患者是否吸烟及p-TNM分期是影响患者术后生存期的独立预后指标。 结论：p53蛋白、CD44v、P-糖蛋白的异常表达、患者是否吸烟、p-TNM分期、肿瘤大小及分化程度对肺癌预后有重要意义，其中p53蛋白的异常表达、患者是否吸烟和p-TNM分期可能是更有价值的预后指标。     

海水和淡水淹溺致肺损伤的比较

目的 比较海水和淡水淹溺动物造成肺损伤作用的差异.方法 42只新西兰兔随机分成对照组(n=18)、淡水组(n=12)和海水组(n=12).经气管插管灌注2 ml/kg淡水或海水制备淹溺动物模型.连续监测血压、心率(HR)、呼吸、血气分析、电解质等指标变化;计算肺湿/干重(W/D)比值、肺通透指数(LPI);检测肺组织髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)活性;用酶联免疫吸附法(ELISA)分析肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平;同时进行病理学检查,并计算肺损伤评分.结果 3组间电解质、HR差异无统计学意义(P均>0.05).淡水组呼吸频率(RR)迅速升高(P<0.05),氧合指数(PaO2/FiO2)0.5 h略低于300 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),此后迅速升至300 mm Hg以上,并于2 h接近起点水平;血气分析显示pH值虽无差异,但动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、剩余碱(BE)持续低于起点(P<0.05或P<0.01);平均动脉压(MAP)仅于5 min呈一过性升高;肺大体标本局部可见淤血灶,显微镜下以肺泡塌陷,微血管充血为主;肺W/D比值、LPI无明显变化,肺损伤评分显著高于对照组(P均<0.01);肺组织MPO、MDA、TNF-α和IL-1β的升高及SOD的降低差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01).海水组动物症状比淡水组重,肉眼可见肺充血、水肿严重,体积明显增大,重力依赖区呈暗红色肝样变,显微镜下以炎细胞浸润和肺泡水肿为主;W/D比值、LPI明显升高(P均<0.01),RR、MAP、PaO2/FiO2、PaCO2、BE及肺组织炎症介质升高或降低的程度均比淡水组显著而持久,海水6 h组肺损伤评分也显著高于淡水组及海水3 h组(P<0.05或P<0.01).结论 海水或淡水淹溺不仅会直接损伤肺实质细胞,还会激活急性炎症反应;海水淹溺引起的肺损伤比淡水严重.     

老年肺癌住院死亡患者肺部感染影响因素分析

目的 探讨晚期老年肺癌住院患者死亡原因及肺部感染影响因素。方法 回顾性分析88例晚期老年肺癌住院患者死亡病例临床资料。结果 本组肺癌患者均≥65岁,功能状态评分>2分者占81.82%,90%以上至少有一处转移,基础病多,住院期间侵入性操作多,肺部感染是最主要的并发症,预后差,占死亡原因68.18%。病原菌以革兰氏阴性菌为主,常伴有真菌感染。3种以上抗肿瘤治疗、胸腔积液、肺部转移、住院时间长是肺部感染的危险因素。结论 肺部感染是晚期老年肺癌患者主要并发症和死亡原因。尽早发现转移灶,有效处理肺部及胸膜转移,减少易感因素,根据痰培养结果及时控制感染,是提高晚期老年肺癌患者治疗效果的关键。     

海水淹溺型肺损伤后一氧化氮的表达及地塞米松的干预作用

目的 观察海水淹溺型兔肺损伤后一氧化氮(NO)的变化及不同剂量地塞米松的干预作用,了解地塞米松对海水淹溺型兔肺损伤的作用.方法 兔经气管注入海水,制备海水淹溺型肺损伤兔模型.将35只健康雄性新西兰大白兔随机分为5组:对照组、海水淹溺组、地塞米松低剂量(0.5 mg/kg)、中剂量(1 mg/kg)、高剂量(5 mg/kg)组.海水淹溺组、地塞米松各剂量组于手术稳定20 min后经气管插管注入配方海水(2 ml/kg),对照组气管切开后注入等量生理盐水,地塞米松各剂量组同时经颈动脉注入不同剂量的地塞米松.注射地塞米松后1、3、6 h取血,测血清NO浓度,并于注射地塞米松6 h后处死动物,迅速取出肺脏,测定肺湿/干重比、肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量、肺组织中丙二醛(MDA)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性、超氧化物歧化酶(SOD)活性,在光镜下观察肺形态结构的变化.结果 海水淹溺可以使肺湿/干重比、肺泡灌洗液内蛋白含量、血浆中NO含量、肺组织中NOS活性升高,使MDA含量增加、SOD活性降低,引起肺形态结构的病理变化.地塞米松可减轻海水淹溺引起的肺损伤,但地塞米松各剂量组与海水淹溺组之间未见明显差异.结论 海水淹溺可明显升高兔血清中的NO含量,地塞米松可减轻海水淹溺性肺损伤.     

胸部开放伤后海水浸泡对犬肺损伤程度的影响及肺表面活性蛋白A、B的变化

Objective To compare the extent of acute lung injury (ALl) and changes in surfactant proteins A (SP-A) and B (SP-B) induced by seawater and freshwater immersion following open chest injury in dogs. Methods The animal model was established by seawater and freshwater injection into the thoracic cavity after open chest injury. All the experimental animals were observed for 6 hours, during which blood gas analysis, levels of TNF-α and IL-8, contents of SP-A and SP-B in the lung and blood serum were measured at different time points. Pulmonary histopathology and SP-B immuno-histochemistry were measured after the animals were sacrificed at the end of the experiment. Results Both seawater immersion and freshwater immersion could induce hypoxemia, with the extent of hypoxemia for the seawater immersion group (SG) being obviously much severer than that of the freshwater immersion group (FG) (P < 0.05). The levels of IL-8 and TNF-α in blood serum and BALF of both experimental groups were significantly higher than those of the control group (CG) (P<0.05). Pulmonary pathological lesion was noted in both SG and FG, with that of SG being severer than that of FG. The levels of SP-A and SP-B in BALF in SG and FG all decreased significantly(P <0.05) ,while the levels of SP-A and SP-B in blood serum increased gradually (P < 0.05). Type Ⅱ alveolarepithelial cells with SP-B positive in the lung decreased in both experimental groups, with grey scale values being significantly lower than that of CG. And significant deviation was observed between SG and FG (P <0.05). Conclusions Pulmonary lesion induced by seawater immersion after open chest injury was severer than that induced by freshwater immersion.     

紫杉醇对人肺腺癌细胞系A549生长抑制作用的研究

目的:评价紫杉醇对肺腺癌细胞A549的生长抑制作用,以及诱导凋亡与G2-M期阻滞的关系。方法:紫杉醇不同浓度、不同时间分别处理A549细胞,采用MTT试验和流式细胞术进行检测及分析。结果:紫杉醇对A549的细胞毒性呈时间依赖性(P<0.05),10~1 000 nmol/L的浓度对A549生长的影响差异不显著(P>0.05)。紫杉醇浓度≤100 nmol/L时,G2-M期细胞的比率随浓度增加而增高(P<0.05);凋亡的比例在低浓度范围内(0.1~10 nmol/L)呈浓度依赖性,浓度进一步增加,反而降低。10 nmol/L作用时,凋亡的发生呈时间效应;1 000 nmol/L作用时,G2-M期阻滞表现出时间效应,但不如低浓度诱导凋亡出现的早。紫杉醇诱导的凋亡和G2-M期阻滞无相关性(P>0.05)。结论:紫杉醇对A549的生长抑制作用呈时间依赖性,但在一定浓度范围内剂量效应不明显;低浓度紫杉醇虽然对G2-M期阻滞的影响较小,但却能比高浓度更早诱发凋亡,延长作用时间亦可达到有效抑制肿瘤细胞增殖的目的。