TRAIL基因修饰联合阿霉素对大肠癌细胞株RKO作用的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子(tumor necrsis factor,TNF)相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)基因联合阿霉索后,应用于人大肠癌细胞株RKO基因治疗的实验研究.方法:将重组腺病毒载体(Ad)介导的TRAIL基因作用于大肠癌细胞株RKO,并联合低剂量的阿霉素协同作用.通过MTF比色法与流式细胞仪研究分析其对RKO细胞的作用效果,并以RT-PCR检测联合应用阿霉素前后TRAIL基因的表达水平.结果:病毒载体对RKO细胞的生长有轻微的抑制作用,作用4 d抑制率为11.9%,但不增加RKO细胞的凋亡率.TRAIL对RKO细胞的生长抑制率及凋亡诱导率分别为50.1%和19.8%.联合阿霉素后,TRAIL对RKO细胞株的生长抑制率及凋亡率均有显著的增强作用,分别达60.3%及49.0%.RT-PCR结果提示联合应用阿霉素后,TRAIL基因的表达并未增强.结论:TRAIL能有效抑制RKO的生长,联合阿霉素后,其对RKO的生长抑制作用及凋亡诱导作用均明显增强.阿霉素不是通过增加TRAIL基因的表达来实现上述作用的.     

阿帕替尼联合程序性死亡受体1抑制剂治疗晚期结直肠癌患者的应用价值

目的 探讨阿帕替尼联合程序性死亡受体1(PD-1)抑制剂用于晚期结直肠癌(CRC)患者的治疗效果,为临床治疗提供参考。方法 选取2021年1月至2023年1月北京市第二医院收治的40例晚期CRC患者为研究对象,依据随机数字表法分为对照组(采用PD-1抑制剂治疗,20例)和观察组(采用阿帕替尼联合PD-1抑制剂治疗,20例)。观察两组患者临床疗效、CD3⁺T淋巴细胞百分比、CD4⁺T淋巴细胞百分比、CD8⁺T淋巴细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺比值、无进展生存时间(PFS)、总生存时间(OS)及不良反应发生情况。结果 观察组患者客观缓解率高于对照组,但组间比较差异无统计学意义(P<0.05);观察组患者疾病控制率高于对照组(P<0.05)。治疗后,观察组患者CD3⁺及CD4⁺T淋巴细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺比值均高于对照组,CD8⁺T淋巴细胞百分比低于对照组...     

RNA干扰介导的Adrml基因沉默对大肠癌细胞增殖的抑制作用

目的 探讨RNA干扰使Adrml基因沉默后对大肠癌细胞增殖的影响.方法 构建靶向Adrml基因的shRNA真核表达载体,转染大肠癌细胞RKO,筛选Adrml基因沉默的稳定克隆.实验细胞分为3组,即稳定转染Adrml-shRNA的实验组、仅含大肠癌RKO细胞的空白对照组和转染空载体的阴性对照组.采用Western blot法检测Adrml蛋白的表达水平.通过软琼脂细胞集落形成实验观察3组细胞的集落形成能力.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和原位末端标记(TUNEL)法检测细胞的增殖和凋亡水平.应用流式细胞仪检测细胞周期的变化情况.结果 实验组大肠癌RKO细胞中,Adrml蛋白的表达受到明显抑制.实验组细胞的非贴壁依赖生长能力明显下降,偶见个别集落形成.实验组细胞的凋亡百分率为(12.4±1.1)%,明显高于阴性对照组[(1.3±0.2)%,P＜0.05].实验组G_0/G_1期和S/G_2期细胞所占的比例分别为(41.2±1.1)%和(58.8±1.1)%,实验组细胞被阻滞在G_1期.Adrml基因沉默能明显增强5-氟尿嘧啶(5-Fu)对大肠癌RKO细胞的生长抑制作用,并引起大肠癌RKO细胞大量凋亡.结论 RNA干扰介导的Adrml基因沉默能诱导大肠癌细胞发生凋亡并出现细胞周期阻滞,从而抑制肿瘤细胞的增殖.对于Adrml基因高表达的大肠癌患者,RNA干扰Adrml基因的表达并结合传统化疗有望成为新的治疗手段.     

2020年山东省保健食品生产企业体系检查情况分析

目的:分析保健食品生产企业体系检查中存在的主要问题,为有针对性地制定监管措施和企业改进提升提供技术参考.方法:对山东省20家保健食品生产企业体系检查缺陷项目进行统计,找出共性缺陷问题,分析成因,并提出解决对策.结果 与结论:缺陷项目多集中在设施设备管理、批生产记录管理、检验管理、原料质量管理等方面.建议企业应重视存在的...     

大肠癌中蛋白酶体亚基PSMA7的高表达与肝转移的关系

目的 探讨蛋白酶体亚基PSMA7在大肠癌中的表达及意义.方法 应用免疫组化法检测手术切除的62例原发大肠癌组织、34例转移淋巴结和13例肝转移组织中PSMA7的表达.并分析PSMA7的表达与临床病理之间的关系.结果 PSMA7在正常大肠组织中均为阴性或弱阳性,而在38.7%(24/62)原发大肠癌组织、52.9%(18/34)转移淋巴结和100%(13/13)肝转移组织中高表达,且原发大肠癌组织的PSMA7高表达与肝转移密切相关(P=0.028).PSMA7高表达组的患者生存率明显低于PSMA7低表达组(P=0.0008).在生存率多因素分析中,PSMA7表达为影响患者预后的独立因素(P=0.004,相对危险度5, 057,95%可信区间为1.682-15.201).结论 PSMA7可能在大肠癌的进展中起重要作用,评估原发大肠癌组织中PSMA7的表达水平对判断是否继发肝转移有一定指导意义.     

化妆品生产许可现场检查情况分析

目的 分析山东省化妆品生产企业在实施《化妆品生产许可工作规范》过程中存在的问题,为今后制定个性化的监管对策和全面推进规范的实施提供技术参考。方法 对111家次化妆品生产企业现场检查中发现的缺陷项目进行分析、统计,找出化妆品生产企业在执行质量体系中存在的主要、共性问题,分析成因,提出建议。结果与结论 企业应提高自律意识,逐步建立完善的质量管理体系;注重物料和细节管理;确保培训的针对性和实效性,提高员工执行力。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因对肝癌细胞杀伤作用及旁观者效应研究

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因在诱导肝癌细胞凋亡时是否存在旁观者效应，以及旁观者效应的可能机制。方法 构建表达TRAIL基因的双腺病毒载体系统Ad／GT-TRAIL Ad／PGK-GV16，通过293包装细胞产生的病毒上清液将TRAIL基因转入肝癌细胞SMMC7721细胞中，RT-PCR检测TRAIL基因的表达，以MTT法检测细胞生长抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率；不同比例混合培养SMMC7721／TRAIL和SMMC7721细胞，检测混合细胞生长抑制率来评价TRAIL基因的旁观者效应，并以滤去细胞成分的转染细胞培养液培养未转染细胞，观测可溶性因子在TRAIL基因旁观者效应中的作用。结果 TRAIL基因对SMMC7721细胞的生长抑制率与PBS、LacZ基因和Bax基因比较，差异有显著性(P＜0．05)；SMMC7721细胞的凋亡率，TRAIL基因与PBS、LacZ基因和Bax基因比较，差异有显著性(P＜0．05)；混合细胞的生长抑制率，以SMMC7721／TRAIL占0％时为0，占5％时为15．9％，占25％时为67．0％，占50％时为80．2％，占100％时为87．7％；以PBS对SMMC7721的生长抑制率为0，则滤去细胞成分的转染细胞培养液对SMMC7721的生长抑制率为4％，两者差异无显著性。结论 双腺病毒载体系统介导的TRAIL基因对肝癌细胞有明显的抑制生长和促凋亡作用，并存在旁观者效应，可溶性因子在TRAIL的旁观者效应中不起作用。     

端粒酶启动子肿瘤靶向基因抗大肠癌的研究

目的探讨端粒酶 (hTERT)启动子驱动的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF relatedapoptosis inducingligand ,TRAIL)基因在大肠癌细胞DLD1的表达及肿瘤杀伤作用。方法通过腺病毒载体系统将hTERT启动子驱动的TRAIL基因转入大肠癌细胞DLD1,流式细胞仪检测GFP/TRAIL的表达和DLD1细胞凋亡率。结果端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL基因和CMV启动子驱动的GFP(绿色荧光蛋白 )基因在DLD1内的表达率分别达 4 1 6 3%和 5 4 0 7% ;GFP/TRAIL基因对DLD1细胞的生长抑制率和凋亡率分别达 93 5 0 %和 5 6 97% ,与PBS和Ad/hTERT LacZ的差异有显著性 (P <0 0 5 )。结论端粒酶启动子驱动的GFP/TRAIL融合基因在大肠癌细胞中能够有效地表达 ;TRAIL基因对大肠癌细胞DLD1有明显的抑制生长和促凋亡作用。     

甲硝维参阴道膨胀栓在妇科围手术期应用对预防术后感染疗效与安全性的Meta分析

目的评价甲硝维参在围手术期/围检测期应用对预防术后感染的疗效与安全性。方法纳入甲硝维参在围手术期/围检测期应用的随机对照试验进行质量评价和数据分析,采用RevMan 5.0软件进行meta分析其对妇科围手术期、围检测期预防感染疗效与安全性。结果甲硝维参膨胀栓显著降低围手术期术后一周内感染发生率[1.6%vs8.4%,OR=0.18,95%Cl(0.12,0.15),P0.01];显著增加I+II度阴道清洁度比率,改善阴道清洁度,有利于术前准备[94.5%vs81.4%,OR=4.12,95%Cl (3.37,5.03),P0.01];显著减少患者白细胞10.0×109/L发生比率,有利于降低患者术后炎症反应[0.5%vs2.3%,OR=0.23,95%Cl (0.13,0.41),P0.01]。结论甲硝维参膨胀栓围手术期应用,改善阴道清洁度,有助于术前准备,同时显著降低术后感染发生率。