肺癌的多项肿瘤标志物诊断研究

肺癌的多项肿瘤标志物诊断研究陈书盘，关赛芳，陈复华，耿沁上海市肿瘤研究所（２０００３２）迄今，尚未确认单项肺癌（ＬＣ）相关标志物具有足够高的灵敏度（ｓｅ）和持异性（Ｓｐ）可满足临床确诊ＬＣ的要求。多项肿瘤标志物联合检测被认为是克服这一困难的一种可能的...     

人肺腺癌干细胞源自肺脏细支气管肺泡干细胞的初步研究

背景与目的已有的研究提示肺腺癌源自肺脏细支气管肺泡干细胞(BASC)的恶性转化,但该假说在人体中尚未得到证实。本研究旨在对人肺腺癌干细胞的BASC特征进行分析。方法人肺腺癌干细胞经流式细胞纯化或无血清悬浮培养获得,所得细胞采用免疫荧光检测BASC特征性标志并经尾静脉注射至免疫缺陷小鼠观察肿瘤转移。结果人肺腺癌细胞A549和SPC-A1均表达Ⅱ型肺泡细胞标志SP-C,但少数细胞表达支气管非纤毛柱状细胞标志CCSP和胚胎干细胞基因OCT4,提示此类细胞属于BASC样癌干细胞。采用流式细胞分选技术纯化其中的CD24 CD22 肺腺癌干细胞后,发现此类细胞属于CCSP SP-C OCT4 细胞,其表型与BASC相同。此外,肺腺癌细胞在无血清培养条件下经EGF/IGF-1/FGF-10刺激能够形成悬浮生长的球体,这类肺球体细胞的特征也与BASC相同。肺球体细胞在含血清条件下培养2周即发生分化,表现为CCSP和OCT4表达丢失。动物实验揭示肺球体细胞具有高转移能力。结论人肺腺癌干细胞具有BASC特征并表达胚胎干细胞基因OCT4,此类肺癌细胞可能与小鼠肺腺癌一样,源自肺脏BASC的恶性转化。     

人肺腺癌干细胞的分离及鉴定

目的：从人肺腺癌细胞株中分离及鉴定具有干细胞特征的高致瘤性癌干细胞。方法：采用磁性细胞分选（magnetic activated cell sorting，MACS）技术将肺腺癌细胞分成多个亚群，然后应用流式细胞及RT-PCR技术检测干细胞相关标志表达，通过NOD-SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果：在A549和SPC-A肺腺癌细胞中发现一个新颖的癌细胞亚群，此类癌细胞的表型特征为CD24^＋IGF-1R^＋，具有高侵袭性和高致瘤性，在NOD-SCID小鼠中仅需移植100个细胞即可形成肿瘤，其致瘤能力是上述标志阴性细胞的1000倍。此外，这些细胞表达胚胎干细胞标志（OCT4和Bmi-1）及肺干细胞标志（CCSP，SP-C，TTF-1和Gremlin），类似小鼠肺脏细支气管肺泡干细胞（bronchioalveolar stem cells，BASC），并具有自主生长特性，能够在无血清条件下长期培养。结论：人体肺腺癌中CD24^＋IGF-1R^＋细胞属于BASC样癌干细胞。     

中医药对乙型肝炎患者肝癌前期状态的干预研究

目的:探讨中药对乙型肝炎相关性肝癌的干预作用. 方法:在慢性乙型肝炎患者中,筛选出肝癌高危患者30 例,治疗组17例根据审因论治的原则,以中药制剂对其进行为期2 a的肝癌干预治疗;对照组13例以中西药进行常规保肝治疗．治疗过程中每月随访临床症状、体征、肿瘤标志物、肝功能、病毒载量及T细胞亚群等项目,定期进行B超和CT检查．结果:中药干预组肿瘤标志物甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体和γ-谷氨酰转肽酶同工酶Ⅱ的转阴率分别为86％(6／7)、 83％(5／6)和82％(9／11),对照组中所有病例肿瘤标志物持续阳性,无1例转阴．2 a期间中药干预组累计肝癌发生率为 12％(2／17),对照组为85％(11／13),两者比较差异具有极显著性(P<0．0 001)．结论:中医“养正徐图”治则能有效降低肝癌高危患者肿瘤标志物水平,并能延缓或阻止肝癌的发生．     

人肺腺癌干细胞对顺铂和卡铂的药物敏感度分析

目的:分析人肺腺癌干细胞(lung adenocarcinoma stem cell, LASC)对顺铂(cisplatin,DDP)和卡铂(carboplatin,CBP)的药物敏感度.方法:人肺腺癌细胞SPC-A1、AG及CPA-Y2经DDP和CBP作用后,应用CCK-8(cell counting kit-8)比色法检测细胞存活率,应用免疫荧光检测法测定药物生存细胞(drug surviving cell,DSC)的表型特征.通过磁性细胞分选技术分离肺腺癌干细胞,应用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)示踪技术检测DSC中的肿瘤干细胞,分析DSC对DDP和CBP的药物敏感度.结果:LASC具有细支气管肺泡干细胞(bronchioalveolar stem cell, BASC)表型(OCT4~+CCSP~+SP-C~+).将此类癌干细胞(CD221~+)与肺腺癌分化细胞(CD221~-)混合后检测DSC发现,后者具有OCT4~+BASC表型.DSC对铂类药物具有显著抗性.结论:肺腺癌干细胞对DDP和CBP具有显著耐药性,可能是化疗后肿瘤复发的根源.     

肺癌干细胞的球体形成与致瘤性分析

目的：从人肺腺癌细胞株SPC—A1中诱导球体形成，对其中的肺癌干细胞进行鉴定并评估其致瘤能力。方法：无血清条件下培养肺癌细胞，采用表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、重组人胰岛素样生长因子-1（insulin—like growth factor-1，IGF-1）和重组人成纤维细胞生长因子-10（fibroblast growth factor—10，FGF-10）等细胞生长因子诱导球体形成，球体细胞采用RT—PCR及免疫荧光技术检测干细胞相关标志的表达，并通过NOD—SCID小鼠移植评估其致瘤性。结果：SPC—A1肺腺癌细胞经培养5—10d后，即可形成悬浮生长的细胞球体（肺球体）。RT—PCR检测显示肺球体细胞表达肺癌干细胞表面标志CD24和CD221．细支气管肺泡干细胞标志Clara细胞分泌蛋白和肺泡活性蛋白C，胚胎干细胞主干基因OCT4、Nanog和Bmi-1，以及肺干细咆主干基因甲状腺转录因子-1。采用免疫荧光检测其中3个标志的蛋白表达，证实80％以上的肺球体细胞呈Clara细胞分泌蛋白、肺泡活性蛋白C和OCT4染色阳性。肺球体细胞具有高致瘤性，在NOD—SCID小鼠中移植5103个细胞即可形成肿瘤。结论：肺球体细胞中肺癌干细胞高度富集并具有致瘤性。