重庆乡村医生综合素质调查分析及对策研究

目的:了解重庆市乡村医生综合素质的现状,提出相应对策.方法:采用问卷调查法对全市39个区县的乡村医生综合素质调查统计,利用Stata统计分析软件进行数据录入与描述.结果:村医以男性为主,年龄31～40岁比例最高,工龄5～14年的比例最大,高中文化为主要学历,执业注册乡村医生为主要执业资格.结论:应该加大女性村医的比例,加大乡村医生培训的经费投入,激励并提高他们的专业水平与执业资格.     

小鼠子宫内膜LIF基因表达与孕激素的关系

白血病抑制因子（Leukemia Inhibitory Factor,LIF)是一种多生物学功能的细胞因子,因其能诱导小鼠M1白血病细胞分化为巨噬细胞和抑制白血病细胞增殖而命名。近年来,关于LIF在胎着床、妊娠维持和胚胎发育中发挥的作用越来越引起国内外学者的重视。小鼠的LIF基因位于染色体的11A1A2区,小鼠胚泡的成功着床LIF基因的表达必不可少,并在受孕第4天（着床期）的小鼠子宫腺上皮细胞中大量转录,然而LIF基因表达的调控机制尚不清楚。有学者认为LIF基因表达受母体调控,子宫内膜LIF基因表达可能受到卵巢激素的调节,为此我们对小鼠子宫内膜LIF基因表达与血清中孕酮水平的关系进行了研究。本实验用本校动物实验中心的NIH小鼠130只,取孕期为4－5d的小鼠子宫内膜及心脏血分别用于检测LIF基因表达和血清中孕酮的水平。其结果显示,在妊娠第4－5d的130只小鼠中,LIF基因表达12只为阴性（阴性组）,118只为阳性（阳性组）,详见附图。阴性组和阳性组血清中孕酮含量的变化水平分别为：0－3.33(ng/ml)和1.43-6.39(ng/ml),阴性组和阳性组孕酮的平均值分别为1．43和2．98,经统计学分析（t检验）,两组间差异极显著（P＜0．01）,即阳性组孕酮水平显著高于阴性组,这说明了孕酮在小鼠LIF基因表达起着重要的调控作用。根据阳性组孕酮的平均水平,小鼠血清中孕酮水平达到1．43ng/ml左右很可能是启动LIF基因表达的一个阈值。综上所述,LIF基因的表达很可能受控于生物体内一个复杂的、多因素的相互制约和协调的调控体系。我们推测孕激素对LIF基因的表达是LIF基因表达调控系统中的一个重要因素。在保证孕激素作用能正常发挥,LIF基因表达的调控相关的调节基因正常和有关细胞因子得到满意的情况下,孕激素水平的高低可起到调节LIF基因表达的作用。     

3918例遗传咨询病人的细胞遗传学研究

我们采用多种显带技术对来自遗传咨询门诊的３９１８例咨询者进行了染色体分析，检出染色体异常者１３９例（占３．５５％）；随体区及异染色质区段变异７８例（占１．９９％）。本文对遗传咨询、产前诊断与优生优教进行了讨论。     

优化高校重点实验室构建体系的思考

高校重点实验室的建设是提升学校综合科研能力的重要保证。本文从高校重点实验室建设的必要性和高校实验室的发展思路来探讨如何加强重点实验室的建设，促进高校科研体系的全面发展。     

矽肺比较蛋白质组学研究中生物样本的选择原则

蛋白质组学是在人类基因组计划研究发展的基础上形成的新兴学科,是一门集中研究蛋白质的学科.比较蛋白质组学是指通过对比一个生物系统2个不同状态的蛋白质表达水平,如比较不同的组织细胞,不同的生长发育阶段,不同生理病理状态下蛋白质的组成(包括种类、含量及修饰加工等)及其差异,明确蛋白质的功能,为进一步研究提供线索[1].     

胚胎细胞MAD2基因表达对染色体分离的影响

目的探讨MAD2基因表达对染色体分离的影响.方法用定量RT-PCR比较RNA干扰前后的胚胎细胞内源性基因MAD2 mRNA表达水平,同时对染色体数目异常率进行比较分析.结果干扰后MAD2基因mRNA拷贝数/GAPDH基因mRNA拷贝数的均值为干扰前的20%,染色体数目异常率均值由干扰前的4.702%上升到28.498%.经统计学分析,RNA干扰后MAD2基因mRNA水平显著下降,染色体数目异常率显著增高.结论MAD2基因表达的降低会导致染色体分离的异常,本研究为染色体分离相关蛋白功能研究建立了新的研究手段和实验评价体系.     

结肠癌中有丝分裂关卡基因hsMAD2表达的分析

目的:研究结肠癌组织中有丝分裂关卡基因HsMAD2的表达.方法:采用定量real-time RT-PCR方法检测18例结肠癌及正常结肠组织中hsMAD2基因表达水平.结果:以hsMAD2基因mRNA拷贝数/GAPDH基因mRNA拷贝数比值为hs-MAD2基因mRNA水平的相对定量值.结肠癌和正常组织中的hsMAD2基因mRNA拷贝数/GAPDH基因mRNA拷贝数比值分别为0.1235±0.0752和0.0312±0.0598.hsMAD2基因的表达水平在结肠癌中显著高于正常结肠组织.结论:hsMAD2基因在结肠癌组织中的高表达,可能与癌细胞的异常增殖有关,是结肠癌发生发展的原因,可为临床结肠癌的治疗提供有效的靶点.     

nm23-M2cDNA的克隆、表达及抗体制备

目的:通过基因工程技术表达和纯化重组nm23-M2蛋白,进而制备高效价、高特异性的抗血清。方法:构建在大肠杆菌中高效表达pQE30/nm23-M2表达质粒,Ni+-NTA亲和层析纯化;用纯化蛋白免疫兔,制备抗血清并纯化,琼脂双向扩散法测效价,免疫组织化学法比较它与抗NM23-H2抗体的特异性。结果:nm23-M2cDNA序列完全正确,表达的17kD可溶性融合蛋白占菌体总蛋白45%,纯化后纯度97%以上,抗血清效价为1∶64-128,提纯后纯度在90%以上,特异性高于抗NM23-H2抗体。结论:成功构建了pQE30/nm23-M2质粒,获得高纯度重组nm23-M2蛋白(rNM23-M2),并制备了高效价、高度特异性的抗血清,为进一步研究nm23-M2基因功能和蛋白作用奠定了基础。     

sgp190与白血病抑制因子对滋养层细胞金属蛋白酶-9及抑制因子-1表达的影响

目的:探讨sgp190与白血病抑制因子(LIF)在妊娠维持中的作用。方法:体外培养滋养层细胞,分别施加LIF和/或sgp190处理后,用RT-PCR法检测金属蛋白酶-9(MMP-9)与金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)mRNA表达情况,免疫印迹法检测细胞MMP-9与TIMP-1蛋白表达水平,ELISA法测定培养上清中MMP-9与TIMP-1的浓度。结果:LIF抑制体外培养滋养层细胞中MMP-9与TIMP-1中mRNA和蛋白表达(P<0.05),而sgp190可抑制LIF的这种作用。sgp190促进MMP-9mRNA与蛋白的表达(P<0.05),但对TIMP-1mRNA与蛋白表达无影响。ELISA分析结果基本与RT-PCR和免疫印迹分析结果相同。结论:LIF和sgp190可能通过调节MMPs和TIMPs表达来影响滋养层细胞的侵袭,而sgp190在LIF功能活性调节中扮演着一定角色。     

临床检验诊断学研究生培养的创新与实践

本文概括了重庆医科大学临床检验诊断学研究生教育从创建到发展20年来，在学科建设、人才培养模式和质量监控体系等方面的探索和改革实践。初步形成了符合我国国情的现代检验医学研究生培养体系。