绞股蓝皂甙与银杏内脂黄酮对HL-60细胞增殖的影响

目的:探讨并比较绞股蓝皂甙(Gypenosides,GP)与银杏内脂黄酮影响急性髓性白血病(HL-60)细胞增殖的作用.方法:分别以不同浓度绞股蓝皂甙与银杏内脂黄酮,不同作用时间处理HL-60细胞株,用MTT法观察绞股蓝皂甙与银杏内脂黄酮对(HL-60)细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞增殖周期情况.结果:绞股蓝皂甙与银杏内脂黄酮在0.025～0.8 mg/ml终浓度范围内,对HL-60细胞增殖的抑制作用显著,并随药物浓度及作用时间的增加而增强(P＜0.05).两药均可显著减少G2/M 期细胞,增加G0/G1期细胞,并诱导凋亡细胞峰出现.结论:绞股蓝皂甙与银杏内脂黄酮均能显著的影响HL-60细胞增殖,两种药物抑制HL-60细胞增殖的机制与干扰细胞增殖、分裂,诱导凋亡有关.     

Klinefelter综合征X染色体着丝粒区α-卫星DNA变异

目的从DNA分子水平建立研究X染色体着丝粒区域的α-卫星DNA变异的方法,发现Klinefelt综合征患者的X染色体着丝粒区域的α-卫星DNA串联重复序列结构变化与染色体不分离的关系。方法采用（representative sampling of multiple repetitive units,rep）PCR方法,通过设计适当的引物,对α-卫星DNA多个单拷贝串联重复序列同时进行扩增,检测重复序列中结构变化的种类、频率及重组位点。结果首次发现由缺失产生的562bp和220bp变异片段和重组位点,异常组的570、562、220bp构成显著高于正常组（P〈0．05）。Logistic回归分析显示：570、562bp和220bp3个短片段同时出现和任两个短片段同时出现均是疾病相关的危险因素。结论Klinefelt综合征的X染色体着丝粒区α-卫星DNA过多的重组可能是造成X染色体不分离的重要原因之一。     

着丝粒的形成与控制研究进展

着丝粒是保证染色体准确分离的基本结构 ,其形成与控制的机制却长期困扰着研究者 ,本文就近年国内外对着丝粒研究的若干进展作一综述 ,提出了一些可能的研究热点     

113. 小鼠子宫内膜LIF基因表达与孕激素的关系

白血病抑制因子（Leukemia Inhibitory Factor, LIF）是一种多生物学功能的细胞因子,因其能诱导小鼠M1型白血病细胞分化为巨噬细胞和抑制白血病细胞增殖而命名。近年来,关于LIF在胚胎着床、妊娠维持和胚胎发育中发挥的作用越来越引起国内外学者的重视。小鼠的LIF基因位于染色体的11A1A2区,小鼠胚泡的成功着床LIF基因的表达必不可少,并在受孕第4天（着床期）的小鼠子宫腺上皮细胞中大量转录,然而LIF基因表达的调控机制尚不清楚。有学者认为LIF基因表达受母体调控,子宫内膜LIF基因表达可能受到卵巢激素的调节。为此我们对小鼠子宫内膜LIF基因表达与血清中孕酮水平的关系进行了研究。本实验用本校动物实验中心的NIH小鼠130只,取孕期为4～5 d的小鼠子宫内膜及心脏血分别用于检测LIF基因表达和血清中孕酮的水平。其结果显示,在妊娠第4～5 d的130只小鼠中,LIF基因表达12只为阴性（阴性组）,118只为阳性（阳性组）,详见附图。阴性组和阳性组血清中孕酮含量的变化水平分别为：0～3.33 (ng/ml)和1.43～6．39 (ng/ml),阴性组和阳性组孕酮的平均值分别为1.43和2.98,经统计学分析(t检验）,两组间差异极显著(P＜0．01),即阳性组孕酮水平显著高于阴性组,这说明了孕酮在小鼠LIF基因表达起着重要的调控作用。根据阳性组孕酮的平均水平,小鼠血清中孕酮水平达到1.43 ng/ml左右很可能是启动LIF基因表达的一个阈值。综上所述,LIF基因的表达很可能受控于生物体内一个复杂的、多因素的相互制约和协调的调控体系。我们推测孕激素对LIF基因的表达是LIF基因表达调控系统中的一个重要因素。在保证孕激素作用能正常发挥、LIF基因表达的调控相关的调节基因正常和有关细胞因子得到满足的情况下,孕激素水平的高低可起到调节LIF基因表达的作用。     

酵母双杂交系统筛选Mps1相互作用蛋白

目的：对前期筛出的与Mps1可能有相互作用的两种蛋白用酵母双杂交回转,验证与Mps1有相互作用的蛋白,为染色体分离机制研究提供线索,并为蛋门质相互作用网络提供资料。方法：应用酵母双杂交技术,将前期以pDBLeu—Mps1为诱饵质粒筛选成人肝脏cDNA文库,得到的Leu＋LacZ＋阳性克隆进一步回转酵母进行验证,即将文库质粒与诱饵质粒一对一重新转入酵母体内对相互作用进行验证。并对验证后的阳性克隆的外源片段进行测序及同源性分析。结果：用同源性分析,从人胚胎cDNA文库筛选到的与Mps1有相互作用的两个蛋白在酵母双杂交回转实验中仅有一个为阳性,另一个相互作用为阴性。结论：应用酵母双杂交系统从人胚胎cDNA文库中筛选并初步验证了与Mps1有相互作用的蛋白,为Mps1蛋白的功能研究奠定了基础．     

036 血清比较蛋白质组学在SARS及并发症中的应用

蛋白质组学技术是研究疾病相关蛋白质的重要手段.血清以其在临床疾病研究中的独特性、重要性成为研究者最为感兴趣的研究材料之一,寻找疾病血清中特异蛋白质的比较蛋白质组学,以此发现血清中的特异标志物是蛋白质组学研究的新思路.本文就血清比较蛋白质组学技术在SAPS及并发症中的应用作一综述.     

正常女性子宫内膜LIF基因表达研究

本文采用RT－PCR技术对32例正常女性分泌期子宫内膜LIF基因表达进地了研究,结果在32例女性这一时期子宫内膜组织中均检测到有强烈的LIF基因表达。这提示在人类非妊娠分泌期子宫内膜组织中存在LIF基因表达LIF在胚泡着床中可能起着十分重要的作用。     

RNA干扰MAD2基因对细胞增殖的影响

目的:探讨MAD2对HepG2细胞周期的影响。方法:构建针对MAD2基因的shRNA表达载体,MAD2基因与GFP融合的绿色荧光蛋白真核表达质粒pmad2-EGFP共转染HepG2细胞株,用Western印迹法检测shRNA的抑制效应;用MTT法测定细胞增殖率;用流式细胞仪检测细胞周期。结果:shRNA的重组质粒表达载体能明显抑制MAD2绿色荧光融合蛋白的表达。HepG2细胞转染有效干扰质粒48h后,细胞增殖抑制率达65%。有效干扰质粒引起G0/G1期和S期细胞的明显降低,G2/M期细胞增多。结论:在细胞水平,可通过RNA干扰特异性抑制MAD2基因来抑制细胞的增殖,为研究MAD2基因在细胞增殖中的作用机制奠定基础。     

重庆市基层医院检验设备配置现状分析

临床检验与实验室诊断技术一直是基层卫生服务体系和医疗预防保健网建设中十分重要的环节,基层医院称其为检验科,它的设备配置与应用在疾病的治疗、预防方面具有重要的作用,同时也是评价基层卫生发展状况的重要指标.因此,调查分析当前基层医院检验科设备配置和使用情况非常必要,并可通过调查充分了解基层卫生资源的配置特点以及存在的问题,为下一步调整设备资源,实现进一步合理配置,提供实证依据.     

血清比较蛋白质组学在SARS及并发症中的应用

蛋白质组学技术是研究疾病相关蛋白质的重要手段。血清以其在临床疾病研究中的独特性、重要性成为研究者最为感兴趣的研究材料之一,寻找疾病血清中特异蛋白质的比较蛋白质组学,以此发现血清中的特异标志物是蛋白质组学研究的新思路。本文就血清比较蛋白质组学技术在SARS及并发症中的应用作一综述。