二甲基黄(DAB)诱发大白鼠肝细胞癌变过程中,各基因组转录活性的观察——Ⅰ.癌变过程中高度重复顺序基因组活动的复杂性观察

大鼠肝细胞癌变过程中,肝细胞核和细胞质的核糖核酸(RNA)的复杂性有改变,这个变化在诱癌的“早期”(2周之内)已出现,并延续在肝细胞癌变的整个过程中。反映了肝细胞基因表达系统的变化。高等生物具有复杂的基因组织,Britten等人应用DNA复性动力学的方法,按其复性速度的快慢,将真核生物的DNA分为单一顺序、中度重复顺序和高度重复顺序三类不同的基因组织,对基因组织的研究深入了一步。     

TRAP-银染方法检测体外培养细胞的端粒酶活性

ＴＲＡＰ－银染方法检测体外培养细胞的端粒酶活性孙来保文剑明张萌谢丹赵国强罗超权关键词端粒酶ＴＲＡＰ－银染方法端粒中图号Ｒ７３０４３端粒（Ｔｅｌｏｍｅｒｅ）由ＤＮＡ和蛋白质构成，位于真核生物染色体的末端。这一结构的ＤＮＡ部分主要由富含鸟嘌呤（Ｇ）的简...     

二甲基黄(DAB)诱发大白鼠肝细胞癌变过程中,各基因组转录活性的观察 Ⅱ.癌变过程中单一顺序及中度重复顺序基因组活动的复杂性观察

我们曾报导在DAB诱发大鼠肝癌的早期（2～4周）,肝细胞核和细胞质RNA的杂交竞争抑制能力增强,到晚期则比早期减弱,显示DAB诱癌的整个过程鼠肝RNA的复杂性有不同程度的改变。Britten等应用DNA复性动力学的方法,将真核生物的DNA分为单一顺序,中度重复顺序和高度重复顺序三种不同的基因组织。单一顺序DNA属结构基因,隐藏着巨大的遗传信息,由此种顺序拷贝各种功能蛋白质。中度重复顺序DNA,有     

备用根大鼠脊髓后角组织提取液对培养的鸡胚背根节神经突起生长的影响

应用组织培养方法，观察备用根大鼠手术侧和非手术侧脊髓后角组织提取液对鸡胚背根节神经突起生长的影响。结果显示：备用根大鼠手术侧脊髓后角组织提取液作用的背根节神经突起生长密度（１５５．２５±１４．２５）明显高于非手术侧提取液作用的背根节神经突起生长密度（８９．１４±９．６０）。提示部份去传入纤维支配的脊髓后角组织可能存在着促进神经突起生长的神经营养活性物质。     

中国汉族群体c-Ha-ras基因3′端-VNTR位点遗传多态性的初步研究

为了探讨中国汉族ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因３′端ＶＮＴＲ位点遗传多态性，用ＡＦＬＰ－ＰＡＧＥ法对１１２例无亲缘关系的健康个体进行了ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因３′端ＶＮＴＲ位点分析，共检出２１个等位基因，其片段大小分布范围在６３５～２６５１ｂｐ之间，基因频率分布在０．００４５～０．５９３８。父权排除率（Ｐｅ）＝０．４４４５；杂合度（Ｈ）＝０．６２５；个体识别力（Ｄｐ）＝０．８４４０。共发现３４种基因型，经χ２检验（χ２＝２３７．１１，ｄｆ＝２１０，Ｐ＝０．１０２５），符合Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡。家系调查表明这一位点的等位基因按孟德尔规律遗传。本遗传标记系统在人类学、法医学和医学遗传学的研究中有重要意义。     

神经前体细胞的分离培养及绿色荧光蛋白基因的转染

[目的]为替换中枢神经损伤后死亡的神经元提供方便追踪观察的神经前体细胞.[方法]应用含碱性成纤维生长因子(bFGF)的无血清培养技术,从新生大鼠海马组织分离培养神经前体细胞,并借助免疫组织化学技术检测这些细胞巢蛋白(nestin)的表达以及细胞分化后神经丝蛋白(NF)和胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.采用磷酸钙法将绿色荧光蛋白(GFP)基因转染目的细胞内.[结果]从海马组织分离的细胞具有分裂能力,能表达nestin.分化后一些细胞能表达NF,而另一些细胞则表达GFAP.GFP基因修饰的细胞能发出荧光.[结论]从海马组织分离的细胞能表达nestin,属于神经前体细胞,它们具有明显的增殖能力.有些神经前体细胞已经分化为神经元和神经胶质细胞.GFP基因已成功转染到神经前体细胞内,并表达了GFP.     

多囊卵巢综合征与人类白细胞抗原相关性的研究

目的 探讨多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）与人类白细胞抗原（ＨＬＡ）相关性。方法 采用多聚酶链反应和寡核酸探针杂交技术（ＰＣＲ－ＳＳＯ）对３０例汉族ＰＣＯＳ患者和１０６例汉族无亲缘关系健康个体的ＨＬＡ－ＤＱＡ基因进行研究。结果 ＰＣＯＳ组ＨＬＡ－ＤＱＡ１．２基因频率显著低于对照组,比数比（ＯＲ）值提示该基因为ＰＣＯＳ的抵抗（不易感）基因;ＰＣＯＳ组ＨＬＡ－ＤＱＡ１．１及３基因频率分布高于对照组,ＨＬＡ－     

人糖基磷脂酰肌醇(GPI)-B7-1真核表达载体的构建及表达

目的：在仓鼠卵巢细胞CHO细胞中高效表达糖基磷脂酰肌醇GPI-B7-1(B7-1即CD80)融合蛋白，获得大量融合蛋白以研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用潜力。方法： 构建真核表达载体pc3.1/GPI-B7-1，利用脂质体lipofectamine 2000将其转染CHO细胞，G418加压筛选抗性克隆，流式细胞仪检测细胞膜上GPI-B7-1融合蛋白的表达情况，SDS-PAGE、Western blot分析鉴定其免疫活性。结果： 真核表达载体转染CHO细胞经G418筛选后，流式细胞分析证实为GPI锚定蛋白，SDS-PAGE在60 kD左右蛋白表达量明显高于对照组，在Western blot 在60 kD左右有一条强的棕色条带，说明GPI-B7-1在CHO中得到表达。结论： 在CHO细胞中高效表达GPI-B7-1融合蛋白，可获得大量融合蛋白，对进一步研究GPI-B7-1在肿瘤治疗中的应用打下基础。     

恶性黑色素瘤基因治疗的研究进展

恶性黑色素瘤（MM）多发生在成人,是一种恶性程度很高的恶性肿瘤,对放疗、化疗不敏感,且其疗效持续时间短,临床治疗很棘手。基因治疗级MM病人带来了希望,人们把MM选择为第一个基因治疗临床试用的目标,在短短10年内,MM的基因治疗已取得了长足的进展。按所用的基因可分为免疫基因治疗、反义核酸与抗癌基因治疗、自杀基因治疗及联合基因治疗,本就近几年来这几方面的研究进展作一个综述。     

癌胚抗原肿瘤基因疫苗胶囊的研制

 目的研制癌胚抗原(CEA)阳性肿瘤基因疫苗结肠溶胶囊。方法通过分子克隆技术将加强型绿色荧光EGFP cDNA连接于CEA cDNA的上游,构建示踪子EGFP-CEA融合基因疫苗pVGC2。使用特制的微小结肠溶空心胶囊制备鼠用基因疫苗口服胶囊。收集小鼠口服用药后的腹腔游离细胞,采用荧光显微镜观察绿色荧光以便评估EGFP-CEA融合蛋白质的表达情况。结果所构建的重组质粒的目的基因片段测序结果证实所接入的EGFP-CEA cDNA序列与母本cDNA序列100%一致。所制备的口服胶囊的平均溶出度为(91.1±3.65)%。检测结果显示,口服胶囊后小鼠腹腔游离细胞中可见到绿色荧光。结论成功地制备了口服基因疫苗胶囊。小鼠腹腔游离细胞中绿色荧光融合蛋白的表达预示,口服基因疫苗胶囊是一种潜在可行的抗肿瘤免疫途径。