人反义端粒酶RNA转染SGC-7901细胞后细胞周期调控基因表达的改变

目的：观察反义人端粒酶RNA(Human telomerase RNA components,hTR)转染的SGC－7901胃癌细胞（7901－ahTR)细胞周期调控基因表达的变化。方法 采用RT－PCR、Western印迹和免疫组化方法检测SGC－7901和7901－ahTR细胞p21、p27、p16、c-myc等基因mRNA和蛋白的表达。结果 反义hTR转染的7901细胞p21和p27表达增加,PCNA和c-myc表达下调,而cyclinD1和p16mRNA表达无明显变化。结论 抑制端粒酶活性能调节多种细胞周期调控基因的表达,从而抑制肿瘤细胞的增殖和诱导分化。     

As2O3对胃癌细胞周期及端粒酶活性的影响

目的 探讨三氧化二砷（As2O3)对SGC－7901胃癌细胞端粒酶活性及细胞周期的影响及其机制。方法 细胞凋亡、细胞周期分布及相关蛋白的表达采用流式细胞术;端粒酶活性的检测采用端粒末端重复序列扩增－ELISA法（TRAP－ELISA）,端粒酶亚单位mRNA及c-myc mRNA的表达采用RT－PCR技术。结果 As2O3可明显抑制SGC-7901细胞的生长,细胞凋亡率明显增加,C0/G1期细胞减少,S和G2／M期细胞增加,Bcl-2、c-myc、PCNA蛋白表达减少,Bax蛋白表达增加,端粒酶活性明显下降;端粒酶亚单位hTR是TP1 mRNA无明显变化,hTRT mRNA表达减少,同时,c-myc mRNA的表达亦减少。结论 As2O3对SGC－7901细胞的抑制作用可能是通过二条途径实现：一个是诱导细胞凋亡,另一个是通过下调hTRT mRNA的表达来下调端粒酶活性,其机制有可能与c-myc和Bcl-2基因的减少以及Bax基因的增加有关。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与胃癌关系的研究

目的 探讨重庆地区人群亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与胃癌的关系。方法 采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性技术，检测66例胃癌和101例正常对照的MTHFR基因C677T多态性。结果 MTHFRC677T呈多态性，可分为3种类型：677CC、677CT、677TT。胃癌组3种基因型频率分别为：677CC45．5％、677CT40．9％、677TT13．6％，等位基因频率677C为65．9％，677T为34．1％。对照组中677基因频率分别为：677CC48．5％、677CT42．6％、677TT8．9％，等位基因频率677C为68．8％，677T为31．2％，胃癌组与对照组相比无显著差异。以677CC基因型作为参考，胃贲门癌677CT基因型OR为0．21．95％CI(0．03～0．99)，677CT TT基因型0R为0．26，95％CI(0．07～0．98)；胃体癌677TT基因型0R为3．63，95％CI(1．02～12．72)。结论 重庆地区人群中，亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T多态性是胃贲门癌的保护因素，是胃体癌的危险因素.     

胃癌细胞bcl-2和Caspase3的表达对TRAIL抗瘤作用的影响

目的 探讨胃癌细胞bcl-2和Caspase3的表达对TRAIL抗瘤作用的影响。方法 应用细胞培养、P1染色、流式细胞仪检测的方法，观察胃癌细胞SGC-7901、MKN28、AGS、MKN45经TRAIL作用后细胞周期及细胞凋亡率，western blot方法分析4种胃癌细胞中bel-2和Caspase3的表达。结果 TRAIL300ng／ml作用于胃癌细胞24h后，胃癌细胞MKN28、MKN45、AGS和SGC-790I的凋亡率分别为36．05％、20．27％、16．50％和11．80％。Western blot结果显示MKN28细胞Caspase3的表达高于其它细胞，而bel-2的表达在各细胞间并无明显差别。结论 胃癌细胞对TRAIL的敏感性与Caspase3的高表达有关，而与bel-2的表达无关。     

Telomerase Activity in Human Hepatocellular Carcinoma

Ｒｅｃｅｎｔｌｙ，ｉｔｈａｓｂｅｅｎｒｅｐｏｒｔｅｄｔｈａｔｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｉｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎｍｏｓｔｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒｓ，ｂｕｔｉｓｉｎａｃｔｉｖｅｉｎａｄｕｌｔｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｓ，ｅｘｃｅｐｔｆｏｒｇｅｒｍｃｅｌｓａｎｄｓｔｅ...     

RT-PCR技术检测外周血/骨髓中肿瘤细胞

应用RT－PCR技术检测外周血或骨髓中的肿瘤细胞是近年来发展起来的新方法，具有灵敏度高、特异性强的优点，该方法的推广使用不仅有助于判断肿瘤的转移、复发，而且也可能为临床选择、评价治疗方案提供有效的依据。     

不同年龄供体正常胃粘膜端粒状态分析

目的:探讨不同年龄供体正常胃粘膜端粒长度的变化规律.方法:采用Southern杂交及图像分析技术,检测26例76岁以下不同年龄供体正常胃粘膜端粒限制性片段长度(Telomeric restriction fragment,TRF).结果:正常胃粘膜TRF长度呈年龄递减趋势,60岁以上组TRF长度明显短于0～39岁、40～49岁及50～59岁组(4.1±1.2 vs 6.4±1.8、6.0±1.0、5.5±1.1,P<0.05),正常胃粘膜TRF长度与供体年龄呈明显负相关(r=-0.56,P=0.0028),端粒重复序列平均每年丢失约(41±12)bp碱基对.结论:TRF长度可以作为衡量胃粘膜细胞衰老的一种生物学标志.     

hTERT干扰真核表达载体的构建及鉴定

目的构建和鉴定人端粒酶逆转录酶(hTERT)干扰真核表达载体.方法人工合成hTERT干扰序列并定向克隆到siRNA(small interfereace RNA)真核表达载体pSilencer 3.1-H1 neo;采用PCR、酶切和测序鉴定.结果成功构建了hTERT干扰真核表达载体.结论hTERT干扰真核表达载体的构建为进一步研究端粒、端粒酶在肿瘤细胞中的生物学作用奠定了基础.     

PCR检测大肠癌YNZ22位点VNTR的杂合性丢失

目的：探讨ＹＮＺ２２位点串联重复序列（ＶＮＴＲ）的杂合性丢失在大肠癌发生发展中的作用。方法：应用多聚酶链反应技术对４１例大肠癌ＹＮＺ２２位点的ＶＮＴＲ区进行了分析。结果：大肠癌ＹＮＺ２２位点杂合缺失（ＬＯＨ）率为４３．３％。分析ＬＯＨ与临床病理参数间的关系发现，大肠癌ＹＮＺ２２位点杂合缺失与肿瘤大小，组织学类型，淋巴结转移，浸润深度和临床分期无关。结论：ＹＮＺ２２位点杂合缺失参与了大肠癌发生与发展。     

食管癌线粒体DNA微卫星不稳与核DNA微卫星不稳相关性探讨

目的:探讨食管癌线粒体DNA微卫星不稳与核DNA微卫星不稳的关系.方法:采用PCR单链构象多态性(PCR-SSCP)方法检测食管癌及正常组织细胞mtMSI与nMSI.结果:45例食管癌检出mtMSI 9例(20.0%),检出nMSI 10例(22.2%).mtMSI主要发生于D-loop区.mtMSI与nMSI两者的发生有相关性(P＜0.05).结论:食管癌组织中存在mtMSI,mtMSI的发生可能通过nMSI参与了食管癌的发生过程.