非亲缘异基因造血干细胞移植后血栓性微血管病1例

患者，女性，32岁，2005年因“发现血三系减少”在当地确诊为“骨髓增生异常综合征-难治性贫血（MDS—RA）”，染色体无殊。先后予维A酸、十一酸睾丸素、环孢霉素、复方皂矾丸、沙立度胺（反应停）及输血等治疗，疗效不佳。患者与台湾慈济骨髓捐赠中心供者人类白细胞抗原（HLA）配型全相合，2007年6月4日为行造血干细胞移植入院。既往史、     

非亲缘异基因骨髓移植后并发急性移植物抗宿主病的诊治

移植物抗宿主病(ＧＶＨＤ)是异基因造血干细胞移植的主要障碍。我院近１年完成的１０例非亲缘异基因骨髓移植中 ,１例发生超急性移植物抗宿主病 (ａＧＶＨＤ) ,经抢救好转 ,现报道如下。１．供受体情况 :患者女性 ,１２岁 ,山东省临沂市学生。７年前发现血白细胞数增高 ,２年前血白细胞数升至１３０×１０９／Ｌ,当地骨髓涂片检查确诊为慢性髓细胞白血病 (ＣＭＬ)慢性期 ,予羟基脲治疗。移植前血象 :白细胞数７．５×１０９／Ｌ,血红蛋白量１０９ｇ／Ｌ,血小板数２９６×１０９／Ｌ;骨髓象 :有核细胞增多 ,粒系增生明显活跃 ,以中幼粒以下阶…     

亲缘异基因骨髓移植治疗11例慢性髓系白血病患者临床分析

目的 评价亲缘异基因骨髓移植 (allo -BMT)治疗慢性髓系白血病 (CML)的临床疗效。 方法2000年9月至2002年6月 ,对11例CML慢性期患者进行HLA相合亲缘allo-BMT。预处理方案 :马利兰16mg/kg+环磷酰胺120mg/kg。急性移植物抗宿主病 (GVHD)预防 :霉酚酸酯、环孢素A加短程甲氨喋呤。结果 11例患者均获供髓植入 ,中性粒细胞数大于0.5×109/L中位时间15(11～20)d ,血小板数大于20×109/L中位时间20(10～35)d。发生Ⅱ～Ⅳ度急性GVHD2例 (18.2%) ,慢性GVHD4例 (36.4 %)。移植相关死亡2例(18.2%) ,复发1例(9.1 %)。中位随访时间20(5～31)月 ,Kaplan-Meier生存曲线的2年无病生存率为 (70.7±14.3) %。 结论亲缘allo-BMT是治疗CML的有效方法 ,霉酚酸酯可安全而有效地应用于急性GVHD的预防。     

供患者性别组合对恶性血液病患者单倍体造血干细胞移植结局的影响北大核心CSCD

目的探究供患者性别组合对基于抗胸腺细胞球蛋白(ATG)和单纯外周血干细胞(PBSC)来源单倍体造血干细胞移植(haplo-HSCT)治疗恶性血液病移植结局的影响。方法对2015年2月至2020年9月在浙江大学医学院附属第一医院骨髓移植中心接受清髓性haplo-HSCT的648例恶性血液病患者进行回顾性分析。男363例(56.0%),女285例(44.0%),中位年龄32(14~62)岁。急性淋巴细胞白血病(ALL)242例(37.3%),急性髓系白血病(AML)293例(45.2%),骨髓增生异常综合征(MDS)56例(8.7%),非霍奇金淋巴瘤(NHL)27例(4.2%),其他恶性血液病30例(4.6%)。结果①所有患者移植后3年总生存(OS)率为(73.10±1.90)%,无病生存(DFS)率为(70.80±1.90)%,Ⅱ~Ⅳ度、Ⅲ/Ⅳ度急性移植物抗宿主病(GVHD)累积发生率分别为(33.96±1.87)%、(13.08±1.33)%,3年中/重度慢性GVHD、重度慢性GVHD累积发生率分别为(35.10±2.14)%、(10.66±1.38)%,累积复发率(CIR)为(19.43±1.67)%,非复发死亡率(NRM)为(9.80±1.24)%。②供患者性别相合、性别不合组haplo-HSCT后28 d累积中性粒细胞植入率、血小板植入率差异无统计学意义(P=0.270,P=0.842),Ⅱ~Ⅳ度、Ⅲ/Ⅳ度急性GVHD累积发生率及移植后3年OS率、DFS率、CIR、NRM率、慢性GVHD累积发生率差异均无统计学意义(P>0.05)。③男供女、女供女、男供男、女供男组haplo-HSCT后28 d累积中性粒细胞植入率差异无统计学意义(P=0.148),Ⅱ~Ⅳ度、Ⅲ/Ⅳ度急性GVHD累积发生率及移植后3年OS率、DFS率、CIR、NRM、慢性GVHD累积发生率差异均无统计学意义(P>0.05)。女供男组移植后28 d累积血小板植入率[(91.45±2.63)%]低于男供女组[(94.77±1.75)%,P=0.004]、女供女组[(95.54±2.05)%,P=0.005],与男供男组[(95.08±1.41)%,P=0.284]比较差异无统计学意义。④在≤35岁患者中,姐妹供者组、兄弟供者组移植后3年重度慢性GVHD累积发生率分别为(26.71±5.90)%、(10.33±4.43)%(P=0.054);在>35岁患者中,女儿供者组、儿子供者组移植后3年中重度慢性GVHD累积发生率分别为(40.07±6.65)%、(27.41±4.54)%(P=0.084)。⑤女供男组移植后28 d累积血小板植入率低于其他组[(91.45±2.63)%对(95.08±0.95)%,P=0.037]。⑥抗人T细胞兔免疫球蛋白10 mg/kg预防GVHD方案女供男组的28 d累积血小板植入率低于其他组[(89.29±4.29)%对(94.49±1.45)%,P=0.037],兔抗人胸腺细胞球蛋白6 mg/kg预防GVHD方案女供男组与其他组移植后28 d累积血小板植入率差异无统计学意义[(93.44±3.38)%对(95.62±1.26)%,P=0.404]。结论在基于ATG和PBSC来源的haplo-HSCT模式下,供患者性别组合对恶性血液病患者haplo-HSCT后主要临床结局没有影响。女供男模式与血小板植入延迟和较低的移植后28 d累积血小板植入率相关。     

丹参酮诱导间质干细胞分化为神经元样细胞的研究

神经干细胞的发现和研究,改变了以往神经细胞不可再生的传统观念.目的:研究丹参酮在体外诱导间质干细胞(MSC)分化为神经元样细胞的作用.方法:用Ficoll-Paque液将成人骨髓细胞进行密度梯度离心和贴壁筛选分离出MSC,体外扩增,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达和进行细胞周期测定.采用含丹参酮的无血清L-DMEM诱导MSC分化为神经元样细胞,并探讨丹参酮不同浓度对MSC诱导分化为神经元样细胞的影响.以免疫组化方法检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、神经丝蛋白(NF-M)、巢蛋白(nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果:MSC原代可获得(6-8)×105、第5代可获得(2-3)×108个细胞.流式细胞仪检测结果CD29、CD44、CD166表达阳性,CD14、CD34、CD45、HLA-DR为阴性;扩增后的各代MSC表面抗原表达无显著差别;90%以上MSC都处在G0/G1期.丹参酮诱导后,MSC形态上转变为典型的神经元样细胞,免疫组化显示诱导出的神经元样细胞NSE、NF-M、nestin表达阳性,GFAP阴性.结论:采用的细胞培养条件适于MSC的纯化和扩增,培养细胞为MSC;丹参酮可以在体外诱导MSC分化为神经元样细胞,其诱导转化率与丹参酮的浓度有关.     

高剂量化疗联合自体外周血造血干细胞移植治疗难治性、复发性恶性淋巴瘤

恶性淋巴瘤对放化疗敏感,常规治疗可使60%的霍奇金病(HD)和30%～50%的非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者得到治愈或长期无病生存,但对具有不良预后因素的难治性、复发性淋巴瘤疗效则较差.我院采用高剂量化疗联合自体外周血造血干细胞移植(APBSCT)治疗10例难治性、复发性恶性淋巴瘤患者显示出肯定的疗效,现报道如下.     

新疆棕色林蚁主要营养成分的测定与分析

对新疆可食用棕色林蚁主要营养成分进行测定。使用常压干燥法与灼烧法测其水分与灰分;微量凯氏定氮法测定蛋白质含量;使用索氏提取法测定脂肪含量;气相色谱法测定脂肪酸百分含量;采用高效液相色谱法测定蛋白质中18种氨基酸成分与含量。新疆棕色林蚁的蛋白质、必需氨基酸、亚油酸含量较高,必需氨基酸种类齐全,脂肪含量较低。新疆棕色林蚁主要营养成分丰富,其综合应用的开发前景十分广阔。     

异基因造血干细胞移植后并发出血性膀胱炎的高危因素和防治措施

目的 评估改良的水化碱化方案对预防和治疗非亲缘异基因造血干细胞移植(URD-HSCT)后出血性膀胱炎(HC)的效果及安全性,探讨URD-HSCT后并发HC的危险因素.方法 151例血液系统恶性疾病患者接受了URD-HSCT,所有患者移植前均接受白消安+环磷酰胺(BuCy2)方案预处理.在使用环磷酰胺(Cy)过程中,所有患者均接受改良的水化碱化输液方案,分别在静脉滴注Cy后0、3、6、9、12 h分5次静脉注射美司钠,总量为Cy总量的120%～160%;于开始使用Cy时至结束后24 h(共计72 h)经中心静脉持续输液,输液量5000 ml·m-2·d-1,匀速输注,每500 ml液体中加入50 g/L碳酸氢钠20 ml,间断应用利尿剂,保持液体出入量平衡;每小时测尿pH值,保持尿pH值＞7.5.结果 URD-HSCT后共有26例患者发生HC,发生率为17.2%(26/151),中位发病时间为40d(8～89 d),无患者发生早发性HC.移植后26例HC患者再次接受改良的水化碱化尿液治疗,部分患者接受膀胱持续冲洗,所有患者均治愈,无患者因HC而死亡.经统计分析表明,以下因素与HC的发病明显相关:男性患者,相关系数(OR)值=3.093,95%可信区间(CI)为1.145～8.353,P＜0.05;急性GVHD,OR值=18.044,95%CI为3.952～82.392,P＜0.01;≥30岁,OR值=6.077,95%CI为1.585～23.299,P＜0.01.结论 改良的水化碱化方案是预防和治疗URD-HSCT后HC的安全有效的措施,尤其是由Cy预处理引起的早发性HC;男性患者、年龄≥30岁以及移植后并发急性GVHD是引起HC的危险因素.

Abstract：

Objective To investigate the efficacy and safety of the optimal alkalized hydration solution for hemorrhagic cystitis (HC) following unrelated donor allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (URD-HSCT), and the risk factors and prophylaxis measures about HC.Methods The clinical data of 151 HC patients who underwent URD-HSCT were retrospectively analyzed. All patients were given busulfan/cyclophosphamide (BuCy)-based conditioning regimen.During Cy therapy, all patients were given the optimal alkalized hydration solution to prevent HC.MESNA was given intravenously after administration of Cy at 0, 3, 6, 9, 12 h, and its total dose was administration of Cy to 24 h under the ECG monitoring. Each 500 ml liquid contained 50 g/L sodium bicarbonate 20 ml. Urinary pH value was monitored every one hour (keeping urine pH＞7. 5). Results None of early onset HC occurred. Twenty-six of 151 (17. 2 %) patients developed late onset HC, and the median onset time was 40 (8～89) days after transplantation. During the therapy, no symptoms of the circulatory system, no congestive heart failure and no acid-base electrolyte imbalance occurred. All HC patients after re-hydration, diuretic, and (or) continuous bladder irrigation and other indwelling catheter after treatment, were cured. The statistical analysis showed that the following factors were significantly associated with HC: male (OR = 3. 093, 95 % CI, 1. 145～8.353, P＜0. 05), acute graft versus host disease (aGVHD) (OR= 18. 044, 95 % CI, 3. 952～～82. 392, P＜0. 01), and ≥30-yearold (OR = 6. 077, 95 0% CI, 1. 585～23. 299, P＜0. 01). Conclusion The optimal alkalized hydration solution is safe and effective to prevent early onset HC following URD-HSCT in combination with BuCy regimen. Male, aGVHD and ≥30-year-old were the risk factors for HC.     

黄芪对间质干细胞分化为神经元样细胞的定向诱导作用

目的　研究黄芪在体外诱导间质干细胞 (MSC)分化为神经元祥细胞的作用。方法　用Ficoll Paque液将成人骨髓细胞进行密度梯度离心和贴壁筛选分离出MSC ,体外扩增 ,流式细胞仪检测MSC表面抗原表达 ,采用含黄芪的无血清L DMEM诱导MSC分化为神经元样细胞。以免疫组化方法检测神经元特异性烯醇化酶 (NSE)、神经丝蛋白 (NF M)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果　MSC原代可获得 (6～ 8)× 10 5、第 8代可获得 (2～ 3)× 10 1 0 个细胞。流式细胞仪检测结果CD2 9、CD4 4、CD16 6表达阳性 ,CD14、CD34、CD4 5、HLA DR为阴性 ;扩增后的各代MSC表面抗原表达无显著性差异。黄芪诱导后 ,MSC形态上转变为典型的神经元样细胞 ,免疫组化显示诱导出的神构经元样细胞NSE、NF M表达阳性 ,NSE阳性细胞为 (87 2± 3 3) % ,NF M阳性细胞为 (89 1± 3 1) % ,GFAP阴性。结论　黄芪可在体外诱导成人MSC分化为神经元样细胞。     

人骨髓间充质干细胞端粒酶活性的表达

目的:探讨人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)端粒酶活性的表达以及深低温冻存和向脂肪细胞诱导分化对基因表达的影响.方法:联合应用密度梯度离心法和贴壁培养法分离人hMSCs,传代培养.深低温冻存hMSCs或诱导其向脂肪细胞分化,以TRAP(Telomerase repeat amplification protocol assay) 法分别检测新鲜的不同传代次数的hMSCs、冻存复苏后培养的hMSCs和诱导分化为脂肪细胞的hMSCs的端粒酶活性.结果:用TRAP法检测hMSCs(n=19)端粒酶活性(RTA)是(1.46±0.67)%,分化成脂肪的hMSCs(n=3)的RTA为(11.80±2.52)%(P<0.001);不同传代次数MSCs端粒酶活性的比较中,早期hMSCs(n=10)的RTA为(1.46±0.83)%,晚期hMSCs(n=9)的RTA为(1.46±0.47)%(P=0.99);在低温冻存对hMSCs端粒酶活性的影响中,新鲜的hMSCs(n=13)的RTA为(1.41±0.44)%,低温冻存的hMSCs(n=6)的RTA为(1.57±1.07)%(P=0.64).结论:hMSCs的端粒酶呈阴性,传代培养和低温冻存不影响基因表达水平.向脂肪细胞分化后hMSCs端粒酶活性表达水平增高,其确切机制尚需进一步研究.