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171.
背景:单份脐血的造血细胞数量有限,难以满足成人的需要,如何有效地扩增脐血造血干/祖细胞是目前研究的热点.目的:构建人白血病抑制因子基因修饰的人胚肺成纤维细胞,观察转基因细胞对脐血CD34+造血干/祖细胞体外扩增的影响.方法:建立转人白血病抑制因子基因的饲养层细胞,用RT-PCR法和ELISA法鉴定目的基因的表达;采用免疫磁珠法分离脐血CD34+造血干/祖细胞,流式细胞术检测纯度;将CD34+造血干/祖细胞与饲养层细胞共培养,流式细胞术检测各组增殖效果;扩增后的造血干/祖细胞用跨膜迁移实验检测自发迁移率和基质细胞衍生因子1诱导迁移试验以鉴定体外扩增的造血干/祖细胞的归巢能力.结果与结论:成功建立转基因饲养层细胞,RT-PCR法和ELISA法证实有目的基因表达,与人白血病抑制因子转基因饲养层细胞共培养7 d后CD34+造血干/祖细胞可大量扩增,同时表面黏附分子的表达量仍较高.体外迁移实验显示与转基因饲养层细胞共培养的造血细胞的诱导迁移率明显高于对照组,可以较好地保持其归巢能力.因此转人白血病抑制因子基因的饲养层细胞可有效扩增脐血CD34+造血干/祖细胞,延缓其分化,并且体外扩增后仍保持较高的归巢能力. 相似文献
172.
173.
目的研究腺病毒介导白细胞介素24(Ad—hIL-24)基因对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对免疫功能的影响。方法取16只BALB/C小鼠,其中4只未致瘤,12只BALB/C小鼠致瘤后随机分为3组:PBS组、5-氟脲嘧啶(5-Fu)组和Ad—hIL-24组。PBS组和Ad—hIL-24组(×10^7pfu)隔日用药,共注射5次;5-Fu组注射5-Fu,20μg/kg,连续注射5d,停药2d后,再连续注射5d。2周后,称质量,眼眶取血,处死后取瘤体、脾脏、胸腺,检测抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数、白细胞总数及淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞数。结果Ad-hIL-24组与5-Fu组的抑瘤率分别为45.08%和52.11%,两者抑瘤效果差异无统计学意义(P〉0.05),而与PBS组比较差异均有统计学意义(均P〈0.05)。与5-Fu组相比,Ad—hIL-24组的胸腺指数、脾脏指数、外周血白细胞总数、淋巴细胞及单核细胞数均增加,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。与正常未致瘤组比较,Ad—hIL-24组中性粒细胞显著增加,差异有统计学意义(P〈0.05)。结论Ad-hIL-24可以抑制小鼠H22肝癌的生长,并对机体免疫功能无抑制作用。 相似文献