人胰岛的分离纯化和功能评价

目的 应用Ricordi人胰岛分离技术分离和纯化人的胰岛,并进行功能和安全性的评价.方法 获得6例成人尸体胰腺组织供体,采用胶原酶消化法及密度梯度离心法分离和纯化胰岛,并分析胰岛的数量、纯度和活力.采用免疫荧光法分析胰岛内分泌细胞的组成和分布;检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌和胰岛移植后的动物血糖水平.并对分离胰岛的安全性指标进行评价.结果 分离纯化后的胰岛数量为(22.9±3.1)万IEQ,纯度为(59.0 ±8.9)%,活力为(89.0±3.0)%.免疫荧光显示,胰岛由4种内分泌细胞组成并呈正常分布.葡萄糖刺激胰岛素释放的刺激指数为8.1 ±4.0.胰岛移植于糖尿病裸鼠后,血糖在3 d后降至正常水平并维持超过30 d.分离胰岛样本的各项安全性指标在规定范围之内.结论 采用Ricordi人胰岛分离技术分离和纯化的胰岛在形态、结构、数量、纯度、活力、体内外功能以及安全性方面都达到临床胰岛移植的标准,为开展临床胰岛移植奠定了基础.     

肾移植排斥反应患者血清蛋白质谱的差异性研究

目的 研究肾移植排斥反应患者的血清蛋白质谱的差异性,检测肾移植排斥反应早期诊断的特殊血清多肽标记物.方法 将研究对象分成实验组和对照组,实验组为经肾活检确诊的10例急性排斥反应和12例慢性排斥反应患者,对照组为12例移植肾功能稳定受者和13例健康志愿者.通过ClinProt磁珠浓缩和基质辅助激光解吸电离法(MALDI)-TOF-MS分析两组研究对象的血清蛋白质谱的差异.结果 通过与健康对照组比较,筛选出18条差异性多肽作为诊断肾移植急性排斥反应的潜在生物标记物,6条差异性多肽作为诊断慢性排斥反应的潜在生物标记物.此外,还比较了急性排斥反应与慢性排斥反应患者的多肽差异,检测出了4条高表达的差异性多肽.运用快速分类算法,建立了移植排斥反应的分类模型,该模型对急性排斥反应患者的有效识别能力达到82.64%,对慢性排斥反应患者的有效识别能力高达98.96%.结论 基于功能性磁珠的样本分离法结合MALDI-TOF-MS分析的实验方法 是精确而稳定的.应用蛋白质组学技术建立了肾移植排斥反应患者的血清蛋白质谱诊断模型,为人们更好的理解肾移植排斥反应的发病机制,并将蛋白质组学技术用于排斥反应早期诊断的新技术手段提供了思路.     

高尿酸血症肾损害社区流行病学调查及其危险因素分析

目的 通过社区人群筛查了解国内现阶段城市原住居民中高尿酸血症及其相关肾损害患病现状,并探讨相关危险因素在国内社区人群发生高尿酸血症肾损害中的意义.方法 选择桂林市城区原住居民集中的象山社区,对年龄在18~75岁之间居民4 075人进行横断面筛查.结果 社区人群高尿酸血症总患病率为19.1%,其中男性高尿酸血症患病率(22.9%)显著高于女性(15.9%),P<0.001.高尿酸血症人群中慢性肾脏病(CKD)患病率(30.5%)显著高于尿酸正常人群(19.0%),P<0.001.男性高尿酸血症人群CKD患病率(34.3%)显著高于同性别正常血尿酸人群(21.2%),P<0.001,发病风险为正常尿酸人群的1.516倍;也显著高于女性高尿酸血症人群(25.9%),P<0.001,CKD发病风险为女性高尿酸血症人群的1.496倍.高尿酸血症合并CKD人群中38.4%仅为微量白蛋白尿,34.6%为微量白蛋白尿+GFR下降,27.0%为单纯GFR下降.结论 高尿酸血症是CKD重要危险因素,高尿酸血症患病率显著增加是CKD患病率增高的重要原因,且轻度增高的血尿酸即增加CKD患病率.男性比女性更易受尿酸损害而发生CKD.微量白蛋白尿是单纯高尿酸血症发生肾损害的早期诊断标志和干预靶点.     

强直性脊柱炎患者外周血中调节性T细胞水平研究

目的探讨强直性脊柱炎患者外周血中CD4^＋CD25^＋Treg（调节性T细胞）、CD4^＋CD25^＋CD127low／-Treg细胞表达水平及其意义,并对两种标识方法检测AS患者Treg进行对比分析。方法采用流式细胞术检测9例正常人和20例强直性脊柱炎患者外周血中的CD4^＋T细胞比率及CD4^＋CD25^＋Treg、CD4^＋CD25^＋CD127^lovw／-Treg占CD4^＋T细胞的比率。结果强直性脊柱炎患者外周血中的CD4^＋T细胞比率及CD4^＋CD25^＋Treg、CD4^＋CD25^＋CD127low／-Treg细胞占CD4^＋T细胞的比率均明显高于正常对照组（P〈0．01）。结论强直性脊柱炎患者免疫功能紊乱,外周血中CD4^＋CD25^＋Treg、CD4^＋CD25^＋CD127low／-Treg细胞水平显著增高。两种调节性T细胞标识方法检测强直性脊柱炎患者外周血Treg的结果基本一致。     

高尿酸血症肾损害社区流行病学调查及其危险因素分析

目的通过社区人群筛查了解国内现阶段城市原住居民中高尿酸血症及其相关肾损害患病现状,并探讨相关危险因素在国内社区人群发生高尿酸血症肾损害中的意义。方法选择桂林市城区原住居民集中的象山社区,对年龄在18～75岁之间居民4075人进行横断面筛查。结果社区人群高尿酸血症总患病率为19．1％,其中男性高尿酸血症患病率（22．9％）显著高于女性（15．9％）,P〈0．001。高尿酸血症人群中慢性肾脏病（CKD）患病率（30．5％）显著高于尿酸正常人群（19．O％）,P〈0．001。男性高尿酸血症人群CKD患病率（34_3％）显著高于同性别正常血尿酸人群（21．2％）,P〈0．001,发病风险为正常尿酸人群的1．516倍;也显著高于女性高尿酸血症人群（25．9％）,P〈0．001,CKD发病风险为女性高尿酸血症人群的1．496倍。高尿酸血症合并CKD人群中38.4％仅为微量白蛋白尿,34．6％为微量白蛋白尿＋GFR下降,27．0％为单纯GFR下降。结论高尿酸血症是CKD重要危险因素,高尿酸血症患病率显著增加是CKD患病率增高的重要原因,且轻度增高的血尿酸即增加CKD患病率。男性比女性更易受尿酸损害而发生CKD。微量白蛋白尿是单纯高尿酸血症发生肾损害的早期诊断标志和干预靶点。     

蛋白质组学在HIV中的研究进展

阐明AIDS的分子病理学机制,提出新的疾病预防措施是当前的研究热点.本文综述了当前普遍使用的蛋白质组学技术在HIV研究领域的应用,为人们对HIV进行更深入的研究提供了理论依据.     

城市社区居民高尿酸血症与脂代谢异常的关系

目的通过社区人群筛查了解国内现阶段城市居民中高尿酸血症患病率变化，同时探讨其与脂代谢异常及胰岛素抵抗的相关性。方法选择桂林市城区原住居民集中的象山社区，针对年龄在18-75岁之间居民（n=4075）采取随机横断面进行筛查。结果高尿酸血症总患病率为19．1％，男性高尿酸血症患病率为22．9％，显著高于女性高尿酸血症患病率的15．9％（P〈0．001）。尿酸增高还与年龄、运动时间、食用动物油、饮酒（P〈0．001）及吸烟（P〈0．05）有关。血尿酸水平越高，脂代谢异常越显著．并且胰岛素水平和超敏C反应蛋白水平也越高。尿酸水平与甘油三酯、胰岛素和超敏C反应蛋白水平呈正相关（P〈0．01）。尿酸增高的居民，血压、体重指数及腰围均较尿酸正常者高（P〈0．01）。结论本研究发现我国社区居民高尿酸血症患病率已显著增高，与性别、年龄及生活习惯有关，高尿酸血症与脂代谢异常有相关性，高尿酸血症的增加与胰岛素抵抗有关，不良生活习惯可能是高尿酸血症、血脂异常以及胰岛素抵抗的共同风险因素。     

GSK-3β在移植肾肾组织的表达及其意义

目的：探讨糖原合成酶激酶在移植肾组织中的表达及其在慢性移植肾失功发病机制中的意义。方法：收集解放军第181医院2007年01月～2009年12月因蛋白尿或肌酐升高而行肾脏穿刺术的肾移植患者的肾穿标本。其中病理诊断符合慢性移植肾失功的病例有28例,包括男21例,平均年龄（45±10）岁,女7例,平均年龄（42±9）岁,肾穿时间为肾移植术后1年～9年,平均3.5年,血清肌酐（206±122）μmol/L。利用免疫组织化学技术和计算机真彩色图像分析系统（imagepro-plus6.0）半定量检测28例慢性移植肾失功患者移植肾组织中糖原合成酶激酶的表达情况,计算GSK表达的平均面积和平均累计光密度,分析GSK-3β表达水平与移植肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化/小管萎缩程度之间的关系。5例正常肾组织作为对照组。结果：慢性移植肾失功患者肾组织中GSK-3β的表达比正常肾组织明显增加,并随肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化、小管萎缩程度而递增。结论：糖原合成酶激酶的高表达与移植肾肾组织炎症细胞浸润、间质纤维化/小管萎缩存在正相关关系。     

多模式镇痛对肾移植后免疫功能的影响

背景：多模式镇痛模式应用于肾移植受者可有效减轻疼痛,并有利于移植肾功能恢复。目的：观察地佐辛多模式镇痛对肾移植后患者免疫功能的影响,并探讨合适的移植后镇痛药物及方式。方法：40例肾移植患者随机分为两组,均行硬膜外阻滞复合全身麻醉。对照组间断肌注镇痛药物,地佐辛多模式镇痛组给予地佐辛超前镇痛＋术后硬膜外患者自控镇痛。记录麻醉前,移植后12,24,48h的心率、动脉平均血压、血氧饱和度;抽取静脉血检测T淋巴细胞亚群含量和白细胞介素2、白细胞介素6和白细胞介素10水平。结果与结论：与麻醉前比较,对照组移植后CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋、白细胞介素2和白细胞介素6水平均明显下降（P〈0.05）,白细胞介素10水平明显升高（P〈0.05）。地佐辛多模式镇痛组CD4＋、白细胞介素2、白细胞介素6水平在移植后12h低于麻醉前（P〈0.05）,移植后24h则恢复至麻醉前水平。CD8＋、CD4＋/CD8＋与移植前比较变化不明显。白细胞介素10水平在移植后48h明显高于移植前,但低于对照组（P〈0.05）。结果可见地佐辛多模式镇痛对肾移植后免疫功能有一定的保护作用,对患者移植肾肾功能短期转归和移植物的长期存活起积极作用。     

蛋白质组学在肾病研究中的应用

蛋白质组学的快速发展为肾病的研究提供了科学的理论依据,在肾损伤、糖尿病肾病以及肾小球肾炎等肾脏疾病的诊断方面发挥了重要作用,一些差异表达蛋白及其作用机制相继被发现,如细胞信号蛋白、跨膜蛋白和钙调蛋白等.了解这些表达机制,对肾病的诊断和治疗有重要意义.