胃肠道间质瘤相关PDGFRA基因突变体功能的研究

目的 探讨胃肠道间质瘤中一个新的PDGFRA基因突变位点L839P在肿瘤发生发展中的恶性转化作用.方法 采用脂质体法,将重组质粒稳定转染中国仓鼠卵巢上皮细胞(CHO).应用Western blot法,检测PDGFRA蛋白的表达情况.应用细胞计数法,描绘细胞生长曲线;应用流式细胞仪榆测细胞周期及细胞凋亡,并观察稳转突变型重组质粒CHO细胞在裸鼠体内的成瘤性.将PDGFRA突变型与kit野生型重组质粒共同瞬时转染CHO细胞,用Western blot法检测kit蛋白的表达及其磷酸化状态.结果 阴性对照组、实验组及阳性对照组细胞中均有PDGFRA蛋白表达.实验组和阳性对照组较阴性对照组和空白对照组细胞生长速度加快;空白对照组、阴性对照组、实验组和阳性对照组处于增殖期的细胞比例分别为28.4%、24.5%、43.8%和40.9%,凋亡率分别为1.8%、1.9%、1.5%和1.6%.接种阳性对照组及实验组稳转细胞的裸鼠,3周后均见肿瘤生长.PDGFRA突变型质粒与kit野生型质粒共转染CHO细胞后,磷酸化kit蛋白表达明显增强.结论 PDGFRA基因L839P点突变为功能获得性突变,对正常细胞有较强的恶性转化作用,并口丁激活kit蛋白,导致肿瘤发生.     

血小板衍生生长因子受体α基因突变及表达在胃肠道间质瘤中的意义

胃肠道间质瘤（GIST）以C—Kit基因突变和CD117表达为特征。然而仍有部分GIST中未检测到C—Kit突变。2003年Heinrich等发现，在GIST中存在血小板衍生生长因子受体α（PDGFRα）表达及功能获得性突变。本研究观察了国人GIST中PDGFRα基因突变及其蛋白表达情况，探讨该基因在肿瘤形成中的作用。     

上海部分地区30年女性乳腺癌发生的临床病理学差异比较

目的分析上海市部分地区1978～2007年女性乳腺癌发病情况与临床病理特点的变化趋势,为探索乳腺癌防治措施提供理论基础。方法收集1978年～2007年间长海医院病理科诊断的原发性女性乳腺癌病例共计2548例,以每5年为一个时期对乳腺癌的发病情况和临床病理进行回顾性分析和比较。结果 30年来,该地区乳腺癌病例数增长了511%,乳腺癌占病理检验总量的比例、乳腺肿瘤中恶性肿瘤所占比例均上升。乳腺癌的发病年龄逐期上升,最后1个时期发病平均年龄达53.55岁,与前5个时期相比差异有显著性。浸润性非特殊癌的比例从第1个时期的73.33%上升到第5个时期的84.64%,而最后一个时期又下降到79.28%,非浸润性癌及早期浸润性癌的比例上升。小体积肿瘤和淋巴结转移阴性病例比例持续上升。结论 30年来,该地区乳腺癌发病率呈快速上升趋势,发病年龄呈现老龄化。乳腺癌早期检出率上升,肿瘤恶性比例及浸润性非特殊癌比例也呈现上升趋势。     

胃肠道间质瘤相关PDGFRA基因突变体功能的研究

目的 探讨胃肠道间质瘤中一个新的PDGFRA基因突变位点L839P在肿瘤发生发展中的恶性转化作用.方法 采用脂质体法,将重组质粒稳定转染中国仓鼠卵巢上皮细胞(CHO).应用Western blot法,检测PDGFRA蛋白的表达情况.应用细胞计数法,描绘细胞生长曲线;应用流式细胞仪榆测细胞周期及细胞凋亡,并观察稳转突变型重组质粒CHO细胞在裸鼠体内的成瘤性.将PDGFRA突变型与kit野生型重组质粒共同瞬时转染CHO细胞,用Western blot法检测kit蛋白的表达及其磷酸化状态.结果 阴性对照组、实验组及阳性对照组细胞中均有PDGFRA蛋白表达.实验组和阳性对照组较阴性对照组和空白对照组细胞生长速度加快;空白对照组、阴性对照组、实验组和阳性对照组处于增殖期的细胞比例分别为28.4%、24.5%、43.8%和40.9%,凋亡率分别为1.8%、1.9%、1.5%和1.6%.接种阳性对照组及实验组稳转细胞的裸鼠,3周后均见肿瘤生长.PDGFRA突变型质粒与kit野生型质粒共转染CHO细胞后,磷酸化kit蛋白表达明显增强.结论 PDGFRA基因L839P点突变为功能获得性突变,对正常细胞有较强的恶性转化作用,并口丁激活kit蛋白,导致肿瘤发生.     

胃肠道间质瘤相关PDGFRA基因突变体功能的研究

目的 探讨胃肠道间质瘤中一个新的PDGFRA基因突变位点L839P在肿瘤发生发展中的恶性转化作用.方法 采用脂质体法,将重组质粒稳定转染中国仓鼠卵巢上皮细胞(CHO).应用Western blot法,检测PDGFRA蛋白的表达情况.应用细胞计数法,描绘细胞生长曲线;应用流式细胞仪榆测细胞周期及细胞凋亡,并观察稳转突变型重组质粒CHO细胞在裸鼠体内的成瘤性.将PDGFRA突变型与kit野生型重组质粒共同瞬时转染CHO细胞,用Western blot法检测kit蛋白的表达及其磷酸化状态.结果 阴性对照组、实验组及阳性对照组细胞中均有PDGFRA蛋白表达.实验组和阳性对照组较阴性对照组和空白对照组细胞生长速度加快;空白对照组、阴性对照组、实验组和阳性对照组处于增殖期的细胞比例分别为28.4%、24.5%、43.8%和40.9%,凋亡率分别为1.8%、1.9%、1.5%和1.6%.接种阳性对照组及实验组稳转细胞的裸鼠,3周后均见肿瘤生长.PDGFRA突变型质粒与kit野生型质粒共转染CHO细胞后,磷酸化kit蛋白表达明显增强.结论 PDGFRA基因L839P点突变为功能获得性突变,对正常细胞有较强的恶性转化作用,并口丁激活kit蛋白,导致肿瘤发生.     

胃肠道间质瘤相关PDGFRA基因突变体功能的研究

目的 探讨胃肠道间质瘤中一个新的PDGFRA基因突变位点L839P在肿瘤发生发展中的恶性转化作用.方法 采用脂质体法,将重组质粒稳定转染中国仓鼠卵巢上皮细胞(CHO).应用Western blot法,检测PDGFRA蛋白的表达情况.应用细胞计数法,描绘细胞生长曲线;应用流式细胞仪榆测细胞周期及细胞凋亡,并观察稳转突变型重组质粒CHO细胞在裸鼠体内的成瘤性.将PDGFRA突变型与kit野生型重组质粒共同瞬时转染CHO细胞,用Western blot法检测kit蛋白的表达及其磷酸化状态.结果 阴性对照组、实验组及阳性对照组细胞中均有PDGFRA蛋白表达.实验组和阳性对照组较阴性对照组和空白对照组细胞生长速度加快;空白对照组、阴性对照组、实验组和阳性对照组处于增殖期的细胞比例分别为28.4%、24.5%、43.8%和40.9%,凋亡率分别为1.8%、1.9%、1.5%和1.6%.接种阳性对照组及实验组稳转细胞的裸鼠,3周后均见肿瘤生长.PDGFRA突变型质粒与kit野生型质粒共转染CHO细胞后,磷酸化kit蛋白表达明显增强.结论 PDGFRA基因L839P点突变为功能获得性突变,对正常细胞有较强的恶性转化作用,并口丁激活kit蛋白,导致肿瘤发生.     

A549肺癌细胞株中肿瘤干细胞与克隆形成的关系

目的 观察克隆形态是否与肿瘤细胞的不断自我更新相关。方法 将A549细胞株单细胞悬液接种到96孔板，观察克隆形成率和克隆形态及传代情况，测量克隆大小，并计数细胞数目。分别观察早期、中间和晚期的黏附细胞数目，检测其细胞增殖活性和细胞免疫表型。结果 A549细胞可形成3种类型的克隆集落，其中，Holoclone型占总克隆数的4％，克隆体积大，可连续传代20代以上，并可分化为其他2种类型的集落，增殖活性不随时间延长而降低，并表达干细胞标记。结论 A549中Holoclone型集落存在不断自我更新的肿瘤干细胞。     

肝细胞生长因子对骨髓基质干细胞与纤维连接蛋白涂层黏附行为的影响

目的 观察肝细胞生长因子（HGF）对骨髓基质干细胞与纤维连接蛋白涂层黏附行为的影响。方法 将不同浓度的肝细胞生长因子加入预涂纤维连接蛋白的96孔板，观察细胞的黏附特性、增殖活性及形态学改变。结果 在肝细胞生长因子的诱导下，骨髓基质干细胞在纤维连接蛋白预包被的96孔板底分布均匀，多呈纤维母细胞样外观；肝细胞生长因子诱导的骨髓基质干细胞对纤维连接蛋白的黏附性是一种剂量-依赖性方式，50％的有效剂量（ED50）大约是20μg／L，当达到最大黏附力时剂量为100μg／L；与空白对照组相比，50～200μg／L的肝细胞生长因子能促进骨髓基质干细胞的增殖，其中以50μg／L组细胞增殖活性最强（P〈0．05）。结论 在最适浓度下，肝细胞生长因子能显著提高骨髓基质干细胞与纤维连接蛋白涂层的黏附行为。     

妇产科手术过程中抑制死致医疗纠纷2例尸检分析

1病例报告,例1 某女，23岁，因停经2月余，阴道少量流血，诊断为难免流产而行刮宫术，手术进行2min，患者右腿下滑、抽搐、面色青紫、呼之不应，脉搏消失，经气管插管、吸氧、心三联注射等抢救无效而死亡。     

胃腺癌内镜活检和术后标本HER-2 表达的一致性分析

目的:分析胃腺癌内镜活检和术后标本HER-2 蛋白表达状态的一致性,探讨胃腺癌内镜活检标本HER-2 检测结果对应用曲妥珠单抗治疗的指导价值。方法:选取2013年3 月至2014年2 月上海长海医院病理科诊断明确的胃腺癌内镜活检标本及相应的肿瘤根治手术切除标本167 例,并收集相关临床病理资料。采用免疫组织化学（immuno histochemistry,IHC ）方法检测内镜活检标本的HER-2 蛋白表达情况,用IHC 及原位荧光杂交（fluorescence in situ hybridization,FISH）方法检测相应肿瘤手术切除标本的HER-2 蛋白表达和基因扩增状况,对检测结果进行比较,并结合临床病理特征进行分析。结果:167 例根治标本中,共有18例（10.8%）HER-2 检测呈阳性,其中包含10例IHC 3 + 与8 例IHC 2 + 且FISH+ 的病例。相对应的内镜活检标本与根治手术标本的IHC 检测结果的一致率为82.0% ,剔除IHC 2 + 的样本后,真阳性率和真阴性率分别为73.3% 和97.0% 。结论:内镜活检标本HER-2蛋白IHC 检测具有较好预测价值,根治与活检标本不一致的主要原因是肿瘤表达的异质性。通过提高内镜活检标本取材数,并结合FISH检测结果,可以减少误判。