强化临床病理住院医师规范化培训过程与考核体系

临床病理住院医师的规范化培训具有独特的专业特点,其培训过程与考核体系均应根据本专业的特点设置和执行。培训过程中应对受训人员做好专业思想教育,加强病理诊断基本功的训练,同时安排相应的系列讲座、及病例讨论,并与日常考核相联系,帮助受训人员完成培训任务并成为合格的病理医师。     

免疫组化筛查林奇综合征的缺陷和应对策略

林奇综合征（LS）是由于错配修复基因（MLH1、MSH2、MSH6、PMS2）的胚系突变引起的,是最常见的遗传性结直肠癌综合征,约占所有结直肠癌的3%。目前,多个权威国际组织建议对所有初诊的结直肠癌患者进行LS的普查。LS的普查方法包括免疫组化（IHC）检测错配修复蛋白缺陷（dMMR）和微卫星不稳定性（MSI）检测两种。IHC由于具有检测费用低、对检测设备的要求低、便于基层医院开展、可以提示突变基因等优点,成为LS筛查的首选。但是,由于组织固定、抗体质量、IHC染色技术问题以及不寻常的染色模式,IHC结果容易出现各种误读。干扰IHC结果解读的因素包括：肿瘤细胞的胞浆染色、内对照细胞染色弱、肿瘤细胞的异质性、特殊的病理形态表现（如：淋巴细胞浸润肿瘤上皮,印戒细胞癌）、新辅助放化疗等。注意避免IHC结果解读的各种陷阱,对于准确识别LS至关重要,有助于节省患者和亲属的监测费用,并避免不必要的焦虑。同时,由于采用IHC进行LS的普查本身还存在一些固有缺陷,所以不能将IHC作为LS的唯一筛查手段,应综合应用各种筛查标准、IHC、MSI、BRAF V600E突变、MLH1启动子甲基化和基因的胚系突变检测,以便对LS做出准确的诊断。     

水囊扩张法3D经直肠腔内超声在低位直肠癌术前分期中的应用

目的评价水囊扩张法3D经直肠腔内超声（ERUS）检查在低位直肠癌术前分期中的灵敏度和特异度。 方法采用水囊扩张法对海军军医大学附属长海医院收治的72例低位直肠癌患者行术前腔内超声检查,进行术前T分期,并与手术后病理T分期进行比较,分析超声术前分期的灵敏度、特异度、过深分期和过浅分期百分比。 结果共72例患者入组,其中超声T1期直肠癌16例,T2期直肠癌23例,T3期直肠癌25例,T4期直肠癌8例。术前腔内超声诊断早期直肠癌T1、T2、T3、T4期诊断灵敏度和特异度分别为93.3%和96.5%,87.0%和93.9%,84.0%和91.5%,71.4%和95.4%。过深分期百分比为5.6%,过浅分期百分比为11.1%。 结论水囊扩张法3D经直肠腔内超声检查对低位直肠癌术前分期和手术治疗具有重要的指导意义。     

免疫组织化学阳性标记结果的观察和判断

免疫组织化学标记结果的判断是以观察组织片阳性或阴性染色为前提，就阳性染色而言，应着重观察阳性染色颗粒在细胞中存在的位置和分布形式，因为它直接反映抗原在细胞中定位和分布情况，而抗原的存在与否及其在细胞中的定位正是免疫组化诊断的重要依据。在免疫组化标记中，观察阳性染色颗粒定位有助于区别假阳性反应；决定抗原定位     

胃肠道间质瘤中C-kit原癌基因突变体的构建及功能研究

目的:构建含突变C-kit基因cDNA的真核表达质粒并行进一步的功能分析.方法:用RT-PCR方法从人胎脑组织克隆野生型C-kit基因蛋白编码区cDNA.根据胃肠道间质瘤中检测出的C-kit基因突变序列,体外突变野生型C-kit cDNA得到突变型C-kit cDNA,与pcDNA3重组成真核表达质粒,并用脂质体法稳定转染人胚胎肾细胞(human embryonic kidney cell,HEK)293细胞系,G418加压筛选出阳性克隆;用Western印迹法检测转染细胞KIT蛋白表达,绘制细胞生长曲线,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测转染HEK 细胞后细胞周期改变,并观察稳定转染突变型重组质粒人胚肾细胞在裸鼠内的成瘤性.分别设转染pcDNA3空白质粒和野生型的C-kit cDNA真核表达质粒的HEK细胞做为对照.结果:构建了突变型C-kit cDNA与pcDNA3的真核表达质粒; 功能检测分析表明:细胞生长曲线显示与对照组相比,实验组的生长速度明显增快;MTT比色显示,与对照组相比实验组细胞增殖活性显著增强;细胞周期检测结果显示,处于增殖期细胞(S G2-M)比例显著高于对照组;体内结果显示转染突变型C-kit基因的HEK细胞在裸鼠体内成瘤.结论:C-kit原癌基因突变体可促使人类细胞生长加快,增殖活性明显增强,并可以使更多的细胞由静止期进入增殖期, 并可使人胚胎肾细胞发生恶性转化,提示C-kit基因突变有可能是引起胃肠道间质瘤恶性转化的关键机制之一.     

胃肠道间质瘤相关基因突变体对格列卫敏感性研究*

目的:探讨胃肠道间质瘤相关基因突变体KIT Ins IPYD579 和PDGFRA L 839P 对格列卫治疗的药物敏感性。方法:采用脂质体法将胃肠道间质瘤相关基因突变体KIT Del559-560、KIT Ins IPYD579、PDGFRA D 842V 及PDGFRA L 839P 重组质粒分别瞬时转染中国仓鼠卵巢上皮细胞系（CHO）,表达24h 后与格列卫共孵育90min,用Western-blot法检测的相关蛋白表达及其磷酸化状态。另外,用MTT 法检测各组稳转PDGFRA 基因突变体的CHO细胞与不同浓度格列卫共孵育72h 后的增殖变化。结果:当格列卫浓度为0.1 μ M 时,转染KIT Del559-560 重组质粒的CHO细胞磷酸化KIT 蛋白表达量明显降低。当格列卫浓度为1 μ M 时,转染KIT Ins IPYD579 和PDGFRA L 839P 重组质粒的CHO细胞的相应蛋白磷酸化形式不能检出。而转染PDGFRA D 842V 重组质粒的CHO细胞直至格列卫浓度提高至5 μ M 时,其磷酸化PDGFRA 蛋白表达水平仍无明显降低。MTT 法显示:当格列卫浓度提高至1 μ M 时,转染PDGFRA L 839P 重组质粒的CHO细胞增殖百分比明显降低,而转染PDGFRA D 842V 重组质粒的CHO细胞增殖百分比直至格列卫浓度为5 μ M 时仍无明显变化。结论:格列卫在短时间内可使PDGFRA L 839P 或KIT Ins IPYD579 突变体磷酸化蛋白表达减少,长期作用时对表达PDGFRA L 839P 突变体的细胞增殖具有明显的抑制作用。      

消痰散结方对荷S180肉瘤小鼠蛋白质代谢的影响

目的运用荷S180小鼠模型,观察消痰散结方改善肿瘤蛋白质代谢状况的作用,探索其作用机制。方法将40只小鼠随机分为消痰散结方组（A组）、化疗（喃氟啶）组（B组）、0.9%氯化钠溶液组（C组）,对照组（D组）,前三组进行S180肉瘤皮下接种造模;4周后,观察各组体重,血清生化检测总蛋白、白蛋白和C-反应蛋白（CRP）水平,免疫组化观察骨骼肌结构及骨骼肌NF-κB的表达。结果消痰散结方可升高荷瘤鼠血清总蛋白、白蛋白水平,下调血清CRP水平,对骨骼肌结构具有保护作用。结论消痰散结方可以改善肿瘤蛋白代谢状况,其可能途径是通过调节肝脏的蛋白代谢。     

间变性节细胞胶质瘤复发为幕上原始神经外胚层肿瘤一例报告并文献复习

背景与目的：间变型节细胞胶质瘤非常少见,恶变总是发生在胶质成分。目前已有少量病例显示神经元成分的恶性转化。本文报道一例原发瘤为间变性节细胞胶质瘤,术后8个月复发为幕上原始神经外胚层肿瘤的病例。方法：观察并分析原发瘤和复发瘤的病理形态特征和免疫组化标记。结合文献讨论间变性节细胞胶质瘤转变为幕上原始神经外胚层肿瘤的可能机制。结果：患儿8岁。镜下见第一次切除的左颞叶肿瘤：部分区域肿瘤细胞密集分布。细胞较小,核染色较深,部分瘤细胞呈小片状,细胞稍大,核圆形或多角形,染色质淡。肿瘤组织中另可见散在或聚集向神经元分化的不同阶段的肿瘤细胞。细胞较大,有明显淡红染的胞浆,胞核空泡状,有核仁。有的似分化较成熟的节细胞。网状染色见瘤组织中纤维组织明显增生。免疫组化结果显示：GFAP灶性（＋）、NSE（＋）、S100（＋）、Nestin（＋）、VIM（＋）、Des（＋）。似神经元分化的大细胞则有NSE和S-100的阳性表达。病理诊断：伴有纤维增生的间变性节细胞胶质瘤。术后8个月左颞部复发肿瘤中除了仍见明显的纤维组织增生外,另见小或中等大小的肿瘤细胞密集排列,瘤细胞更异型,核分裂多见。未见较成熟分化的细胞。免疫组化显示：GFAP灶性（＋）、S100（＋）、NFP（＋）、Neuronal class III beta-tubulin（＋）。提示肿瘤细胞向神经元和胶质成分双向分化。病理诊断幕上原始神经外胚层肿瘤。结论：节细胞胶质瘤可以出现胶质和神经成分的恶性转化。     

bcl-2和p16在胃肠道间质瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨bcl-2和p16的表达与胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor，GIST)的良恶性及发生发展的关系。方法 应用免疫组织化学技术EnVision微波二步法检测40例GIST(良性20例，恶性20例)中bcl-2和p16蛋白的表达。结果 40例GIST中有29例表达bcl-2，23例表达p16，阳性率分别为72．5％和57．5％。bcl-2阳性信号定位于细胞质，p16阳性信号定位于细胞质和细胞核。bcl-2、p16的表达与GIST的良恶性、组织学分型、部位、性别及年龄均无关。结论 bcl-2及p16可能在GIST的早期阶段即参与肿瘤的发生发展，但两者不能作为判断肿瘤良恶性的指标。