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牛胚胎干细胞建系方法及其影响因素 总被引:1,自引:0,他引:1
学术背景:小鼠胚胎干细胞的建系方法已基本成熟,对于建立牛胚胎干细胞无限系的相关报道较少.目的:就牛胚胎干细胞的研究概况、建系方法及影响因素等问题进行概括性论述. 检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索Pubmed数据库1980-01/2007-06的相关文献,检索词"bovine,Embryonic Stem Cells,Embryonic Germ Cells",并限定文章语言种类为English.同时计算机检索中国期刊全文数据库1998-01/2007-06的相关文献,检索词"牛,胚胎干细胞,胚胎生殖细胞",并限定文章语言种类为中文.共检索到70篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①文章所述内容应与牛胚胎干细胞密切相关.②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章.排除标准:①重复性研究.②Meta分析.文献评价:文献的来源主要是通过对牛胚胎干细胞的研究概况、建系方法及影响因素等方面内容进行汇总分析.所选用的30篇文献中,6篇为综述,其余均为临床或基础实验研究.资料综合:①已有报道从牛鲜胚内细胞团、原始生殖细胞、体外受精胚胎和核移植胚胎中成功分离获得牛类胚胎干细胞.②影响牛胚胎干细胞建系的因素包括胚胎日龄、培养方法、饲养层、细胞因子、传代方法等.③传统的从牛囊胚内细胞团和原始生殖细胞中分离培养胚胎干细胞时会遇到诸多瓶颈,不少学者尝试通过卵母细胞的孤雌生殖和体外成熟、受精来拓宽胚胎干细胞的来源.牛原始生殖细胞的分离过程中,易造成大量原始生殖细胞损失和凋亡,若使用密度梯度离心或特异性荧光抗体标记后通过流式细胞仪进行分离筛选,可能会起到较好的效果.如果使用转白血病抑制因子或干细胞生长因子基因的同源牛胎儿成纤维细胞作饲养层,既可克服外源蛋白污染及动物种间病原交叉感染等问题,同时又提供了培养牛胚胎干细胞所需的外源因子,提高了饲养层的质量.对胚胎干细胞集落进行转基因,通过荧光显微镜可以很清楚地知道所需传代的集落及传代时机.不同学者报道的牛胚胎干细胞碱性磷酸酶的表达有差异,可能与不同的染色程序和细胞分化程度、表型有关,因此碱性磷酸酶活性能否作为牛多能干细胞的特异标记还有待进一步研究. 结论:尽管目前有关牛胚胎干细胞的培养与应用技术已取得一定进展,但如何维持牛胚胎干细胞自我复制及多潜能分化的调控机制、如何确定不同的细胞因子联合使用时对牛胚胎干细胞的剂量效应、不同胚胎干细胞系在分化能力上是否存在差异、如何提高利用牛胚胎干细胞制作嵌合体的成功率等诸多问题还有待深入研究. 相似文献
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目的 建立并优化水蛭ISSR-PCR反应体系及扩增程序,为水蛭进行遗传多样性研究提供依据.方法 使用引物ISSR825,采用正交优化方法对影响PCR反应的Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA进行了体系优化,同时对引物的最佳退火温度进行了选择.结果 在25 μL总体积中,其中包括10×PCR缓冲液2.5 μL、Mg2+ 2.0 mmol/L、dNTP0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、Taq DNA聚合酶2.5 U、模板DNA 2.0 ng/μL,最佳退火温度为49.7℃.结论 所建立的最佳ISSR-PCR反应体系稳定可靠,可用于水蛭遗传多样性评价、不同种源鉴定及亲缘关系分析. 相似文献
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白秀娟 《中国实用神经疾病杂志》2017,20(6)
目的观察奥马哈系统在癫痫患者护理中的效果。方法选取2014-07-2015-07在我院接受治疗的98例癫痫患者,随机分为常规癫痫护理组(对照组,n=49)和奥马哈系统护理组(观察组,n=49),对比2组护理后1a疗效。结果对照组治疗总有效率73.47%,观察组91.84%,2组比较差异有统计学意义(P0.05);对照组治疗依从性优良率为75.51%,观察组97.96%,2组差异有统计学意义(P0.05)。结论奥马哈系统应用于癫痫护理,可显著降低癫痫发作频率,提高治疗有效率和增加患者治疗依从性,临床意义显著。 相似文献
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目的探讨人性化护理在门诊手术患者中的应用效果。方法将76例接受门诊手术的患者随机分为2组,各38例。对照组采用常规护理,观察组在常规护理基础上应用人性化护理。比较2组的护理效果。结果 2组干预前SAS评分差异无统计学意义(P0.05)。干预后2组SAS评分均较干预前明显改善,观察组较对照组显著改善,差异有均统计学意义(P0.05)。观察组切口感染1例,对照组为3例,差异有统计学意义(P0.05)。观察组患者及家属对护理工作的满意率优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论对门诊手术患者中实施人性化护理,能够改善患者焦虑等不良情绪,减少并发症发生率,提高患者及家属对护理工作的满意度。 相似文献
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处于青春期的青少年对其自身的发育充满着好奇与神秘,如何积极有效地引导他们科学认识自身的变化,确立健康的性价值观,学校性健康教育显得尤为重要.通过学校这一主渠道教学,对青少年进行科学的、系统的、正向的性教育,可以使学生掌握正确的性知识,为培养学生稳定的性情感、健康的性态度、良好的性适应可以达到事半功倍的效果. 相似文献
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目的 观察水蛭对实验性血瘀证家兔血脂代谢及其相关基因表达的影响。方法 采用复合因素(饥饿+高脂饲料+注射肾上腺素)建立血瘀证模型,造模结束后将实验动物随机分成5组,高中低水蛭剂量组、模型对照组、空白对照组,三个剂量组分别按0.30,0.15,0.075g·kg-1给血瘀证家兔灌胃30 d。分别于造模结束时、灌胃第10,20,30天心脏取血,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;采用荧光实时定量PCR技术检测家兔肝脏低密度脂蛋白受体(LDL-R)、载脂蛋白E(ApoE) mRNA的表达。结果 与模型组相比,水蛭能显著降低血清中TC、TG、LDL-C水平(P<0.05),能显著上调血瘀证家兔肝脏中LDL-R mRNA、ApoE mRNA的表达(P<0.05)。结论 水蛭具有调节血瘀证家兔血脂代谢的作用,其机制可能与上调LDL-R基因和ApoE基因转录水平有关。 相似文献
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目的 建立并优化土鳖虫基因组DNA的RAMP-PCR反应体系及扩增程序,为土鳖虫遗传多样性的研究提供依据。方法 以雌性土鳖虫为材料,常规酚/氯仿提取基因组DNA。使用RAMP引物(ISSR807+RAPD A5),采用正交优化方法对影响PCR反应的Mg2+、dNTPs、引物、DNA聚合酶、模板进行体系优化,同时选择最佳的引物退火温度。结果 最适引物(ISSR807+RAPD A5)组合进行土鳖虫的RAMP-PCR分析的反应体系为总体积25 μL,包括10×缓冲液2.5 μL、Mg2+ 1.00 mmol/L、dNTPs 2.00 mmol/L、引物0.50 μmol/L、TaqDNA聚合酶1.00 U、DNA模板1.50 ng/μL,最佳退火温度为46.8 ℃。结论 本实验建立的最佳RAMP-PCR反应体系稳定、重复性好,可用于土鳖虫种质资源鉴定和遗传多样性研究。 相似文献
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心包置管并用化疗治疗癌性心包炎的护理本溪钢铁公司职工总医院姜彬,白秀娟心包炎(包括原发性和继发性)、癌性心包炎常出现心包填塞,全身化疗效果不佳,且中毒症状明显,一般不提倡。穿刺放液可缓解心包填塞,但由于心包腔内压力降低,渗出加速,快者可数小时后再出现... 相似文献
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学术背景:胚胎原始生殖细胞经体外抑制分化培养可得到胚胎生殖细胞,是胚胎干细胞的又一来源。以其作为外源基因的载体用于制作嵌合体、基因敲除等具有很高的实用价值。
目的:概括性论述鸡胚胎原始生殖细胞建系方法、影响因素及应用前景等问题。检索策略:由该论文的研究人员应用计算机检索Pubmed数据库1990—01/2006—04的相关文献,检索词“embryos,primordial germ cells,embryonic stem cells,embryonic germ cells,genital ridge,In vitro culture”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库2000—04/2007—04的相关文献,检索词“胚胎,原始生殖细胞,胚胎干细胞,胚胎生殖细胞,生殖嵴,体外培养”,并限定文章语言种类为中文。共检索到60篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①与鸡胚胎原始生殖细胞的建系、影响因素及应用密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:重复性研究。
文献评价:文献的来源主要是通过对鸡胚胎原始生殖细胞建系方法、影响因素及应用前景方面内容进行汇总分析。所选用的30篇文献中,7篇为综述,其余均为临床或基础研究。
资料综合:①原始生殖细胞离体培养的关键是保证细胞具备无限增殖能力的同时维持其未分化状态。目前主要通过选择鸡胚原始生殖细胞的适宜分离时期和方法、合理设计培养基、采用饲养层细胞培养以及添加抑制分化的细胞因子等方法来解决。②鸡胚原始生殖细胞的生物学检测主要包括形态学鉴定、碱性磷酸酶活性检测、PAS染色检测、阶段特异性胚胎表面抗原1检测、核型分析、分化试验以及嵌合体试验等方法。③鸡胚原始生殖细胞的应用研究广泛,相比较桑椹胚和囊胚体外培养获取干细胞优势明显;为基础研究提供了最原始的发育生物学模型;生产克隆动物,降低禽类的保种成本;生产药物蛋白,是生产治疗用重组蛋白极为理想的来源。
结论:尽管目前有关鸡原始生殖细胞的培养与应用已取得一定进展,但在生产实践上如何设计出更适合于鸡原始生殖细胞生长的离体培养体系、如何更高效方便地获得鸡原始生殖细胞、如何提高利用原始生殖细胞制作嵌合体的成功率等问题还有待进一步深入研究。 相似文献
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大家好!我是大通林蛙,知道我穿的衣服了吧—绿色!因为我来自于绿色森林,我是超临界技术生产,我是纯天然产品! 相似文献