PI3k/Akt通路参与二仙汤抑制顺铂所致卵巢颗粒细胞凋亡的作用

目的：观察顺铂干预大鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况,从而探讨二仙汤含药血清经PI3k/Akt通路抑制卵巢颗粒细胞凋亡的作用机制。方法：SD雌性大鼠30只,随机分为3组,分别为生理盐水组、补佳乐组、二仙汤组。心脏取血,制备药物血清。SD大鼠卵巢颗粒细胞,经培养贴壁后,用顺铂损伤大鼠原代卵巢颗粒细胞。经各组药理血清作用后,应用Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡,并对各实验组大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡情况进行分析。应用免疫组化法,测定各分组PI3k、Akt、p-Akt蛋白的表达情况,并进行图像分析。结果：流式细胞凋亡结果显示,二仙汤可以降低顺铂损伤后的大鼠卵巢颗粒细胞的凋亡率。免疫组化结果显示,PI3k、p-Akt、Akt在细胞质内均有表达,可见棕黄色阳性物质;而二仙汤可以上调顺铂干预后大鼠卵巢颗粒细胞的PI3k、p-Akt、Akt的表达。结论：二仙汤含药血清上调了PI3k、p-Akt、Akt的表达,从而抑制了卵巢颗粒细胞凋亡,该过程可能通过调节PI3k/Akt通路实现,进而有效地保护卵巢功能。     

染料木素和大豆苷元对去卵巢大鼠甘油三酯代谢的作用

目的　观察染料木素和大豆苷元对去卵巢大鼠甘油三酯代谢的影响。方法　Wistar大鼠 70只 ,随机分成正常组、模型组、雌激素组、大剂量染料木素 (Genistein ,G)组、小剂量 (Genistein ,G)组、大剂量大豆苷元 (Daidzein ,D)组、小剂量 (Daidzein ,D)组 ,每组 10只。除正常组外 ,其余各组均切除双侧卵巢。术后 1wk开始给药染料木素和大豆苷元 ,6wk后处死动物 ,测定血清甘油三酯 (sTG)浓度、肝脏组织甘油三酯 (hTG)含量、肝脏组织磷脂含量和磷脂指数 ,并固定肝脏组织、HE染色 ,进行病理学观察。结果　大鼠切除卵巢6wk后hTG含量明显增加 ,HE染色发现肝脏细胞中分布大小不一的脂滴 ;肝脏磷脂指数降低。雌激素和大豆苷元均可逆转以上变化 ,但雌激素升高sTG浓度并且对肝细胞造成空泡样变损伤 ;染料木素对各项指标均无明显作用。结论　大豆异黄酮中影响去卵巢大鼠甘油三酯代谢的有效成分为大豆苷元 ,其可以有效抑制去卵巢大鼠肝脏组织中脂肪的堆积。     

灵芝及其提取物对红细胞中2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)含量的作用

灵芝[Ganoderma capens(Lloyd)Teng]是我国传统医学常用于治疗多种疾病和防治衰老的药物,中医认为它"益精气"、"益心气"、"入心生血,助心充脉"、"久服轻身不老",是补血益气、滋补强壮的珍贵药品。药理学研究认为它有助于维持机体稳态、提高人体抗病能力。我们在上述临床和药理研究的基础上,进一步观察灵芝及其提取物对血红细胞运氧功能的影响。2,3-二磷酸甘油酸(2,3-Diphosphoglyceric acid     

红细胞中2,3-二磷酸甘油酸研究近况

1967年Benesch等人发现2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)具有降低人血红蛋白(Hb)与氧亲和力(简称血氧亲和力)作用以后,近十多年来,人们以较大的兴趣研究了红细胞内(RBC)特有的化合物——2,3-DPG的一系列理论和实际问题。逐步认识到该化合物的生理功能是维持机体正常血氧亲和力,缺氧患者RBC中2,3-DPG浓度升高是机体重要的     

金雀异黄素和槲皮素对人类乳腺癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨金雀异黄素(genistein,Gen)和槲皮素(quercetin,Que)对人类乳腺癌细胞株增殖的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法测定槲皮素对雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF-7、T47D和非雌激素依赖性乳腺癌细胞MDA-MB231的细胞增殖作用,并以雌激素受体拮抗剂ICI182780为工具药来评价金雀异黄素、槲皮素发挥雌激素样作用与雌激素受体的关系,流式细胞术对MCF-7细胞的增殖情况进行分析。结果Gen和Que在一定剂量范围内能促进T47D和MCF-7细胞的增殖,而对雌激素受体阴性MDA-MB231细胞未见增殖作用,并将MCF-7细胞周期由G1期向S期推进,促进DNA合成,提高细胞分裂增殖指数,且Gen和Que促进MCF-7细胞增殖作用被雌激素受体拮抗剂所拮抗。结论金雀异黄素和槲皮素具有雌激素活性,此作用可能是通过雌激素受体(ER)介导的。     

复方鳖甲软肝方对肺纤维化大鼠细胞外基质的影响

目的 :研究复方鳖甲软肝方对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化细胞外基质的影响。方法 :SD雄性大鼠 54只 ,分为假手术对照组、模型对照组、复方鳖甲软肝方高剂量组、中、低剂量组、强的松组 ,每组 9只。除假手术对照组外其余各组大鼠气管内一次性滴注盐酸博莱霉素 ,假手术对照组大鼠气管内一次性滴注等体积的生理盐水。 28d后给药 ,复方鳖甲软肝方高、中、低剂量组 ,强的松组分别灌服复方鳖甲软肝方 1.4,0 .7,0 .35g·kg^-1及强的松 0 .56mg·kg^-1,假手术对照组、模型对照组分别灌服等体积的生理盐水。观察 80d时大鼠肺组织羟脯氨酸和血清中Ⅲ (Ⅲ C) ,Ⅳ (Ⅳ C)胶原及层粘连蛋白 (LN)和透明质酸 (HA)的含量 ,同时取肺组织行HE ,Masson染色。结果 :复方鳖甲软肝方可降低肺纤维化大鼠Ⅰ ,Ⅲ胶原 ,层粘连蛋白及透明质酸含量 ,减轻肺组织纤维性增生。结论 :复方鳖甲软肝方可能是通过降低肺纤维化大鼠细胞外基质含量而发挥治疗肺纤维化作用。     

首乌方对帕金森病模型大鼠血液和纹状体细胞外液左旋多巴药代动力学影响的研究

目的:采用清醒自由活动大鼠血-脑双位点微透析采样的方法,同步探讨首乌方对左旋多巴(L-DOPA)在帕金森病(PD)大鼠血液和纹状体细胞外液药动学的影响。方法:SD大鼠分为4组,对照组、模型组、左旋多巴组、首乌方+左旋多巴组。脑内注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)造模,首乌方+左旋多巴组提前ig首乌方煎剂(生药量18 g·kg-1.d-1)6 d,各给药组单次ip L-DOPA 24 mg·kg-1和盐酸苄丝肼6 mg·kg-1。血-脑双位点微透析采样,分别用高效液相-荧光法(HPLC-FLD)、高效液相-电化学法(HPLC-ED)检测血液、纹状体细胞外液L-DOPA浓度。应用DAS软件拟合药动学参数。结果:与左旋多巴组相比,首乌方+左旋多巴组血药浓度在6个时间点升高,纹状体细胞外液药物浓度在给药后15 min时降低(P<0.05)。左旋多巴组、首乌方+左旋多巴组血液药动学参数分别为:AUC(1 627.7±420.6)mg.L-1.min-1,(2 626.4±980.6)mg.L-1.min-1;Tmax30 min,(37.5±8.2)min,MRT(0-t)(71.98±3.19)min,(83.44±9.53)min。纹状体细胞外液药动学参数分别为:Tmax(50.0±15.5)min,(81.0±27.3)min,MRT(0-t)(68.7±15.34)min,(107.9±26.7)min。与左旋多巴组相比,首乌方+左旋多巴组血液AUC增加(P<0.05),Tmax延后(P<0.05),MRT(0-t)延长(P<0.05)。纹状体细胞外液Tmax滞后(P<0.05),MRT(0-t)延长(P<0.05)。结论:首乌方可减慢L-DOPA消除,增加血液L-DOPA的吸收,减少纹状体L-DOPA药物浓度波动。     

姜黄素对博来霉素诱导肺纤维化C57BL/6小鼠cathepsin K表达的影响

目的探讨姜黄素抗C57BL/6小鼠肺纤维化与组织蛋白酶K(cathepsin K)表达的相关性。方法博来霉素气管注射造小鼠肺纤维化模型,随机分组:对照组(气管内注入0.1 mL生理盐水),模型组(气管内注入0.025 U博来霉素),姜黄素组(气管内注入0.025 U博来霉素);造模第2天,对照组和模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠生理盐水灌胃,姜黄素组给予200 mg/(kg.d)姜黄素(0.5%羧甲基纤维素钠助溶)灌胃,分别于造模后7、14、28 d取材。采用HE及Mallory染色观察肺组织病理学变化;应用免疫组化检测cathepsin K蛋白的表达,经图像分析各组之间的差异。结果 HE及Mallory染色结果显示姜黄素组、模型组与对照组比较都有不同程度的炎症及纤维化病灶,姜黄素组与模型组比较炎症及纤维化程度减轻;姜黄素组、模型组与对照组比较cathepsin K表达都有不同程度增加;姜黄素组与模型组比较cathepsin K蛋白表达显著增加,其中14 d,P<0.01;7 d和28 d,P<0.05。结论姜黄素可能是通过增加cathepsin K的表达从而降解胶原而实现抗纤维化作用。     

中药植物雌激素受体调节剂筛选研究中的问题与对策

中药植物雌激素是近年来研究的一个热点,但目前的研究中还存在着很多的问题,如中药含有植物雌激素成分的判断标准值得商榷、具体作用的受体需明确、药物血清实验方法尚需改进、植物雌激素具体作用机制有待阐明等。针对这些问题,可以从以下研究方向展开植物雌激素筛选的研究,从结构上寻找中药的活性成分、能影响雌激素受体表达、揭示雌激素受体之间的关系,以及明确植物雌激素的作用靶点。     

复方鳖甲软肝片对酒精性肝纤维化狄氏间隙胶原沉积的影响

目的　研究复方鳖甲软肝片 (FFBJRGP)对酒精性肝纤维化大鼠肝血窦周围胶原沉积的影响。方法　采用“白酒 -植物油-吡唑”混合液灌胃配合饲喂高脂饲料法复制大鼠酒精性肝纤维化模型。采用高、中、低 3个剂量的FFBJRGP对肝纤维化大鼠进行治疗。取材后 ,采用肝组织样本前处理水解法检测各组大鼠肝组织羟脯氨酸含量 ;用放免分析法检测各组大鼠血清中Ⅳ型胶原 (CⅣ)和层黏连蛋白 (LN)含量 ;大鼠肝组织石蜡切片 ,Mallory、天狼星红染色 ,图像分析 ,显示胶原分布及含量。结果　酒精性肝纤维化大鼠肝组织内羟脯氨酸含量 ,血清中CⅣ和LN水平均显著升高 (P<0 0 1) ;中、低剂量FFBJRGP治疗后 ,羟脯氨酸含量、血清中CⅣ和LN水平呈下降趋势 (P <0 0 5或P<0 0 1) ;酒精性肝纤维化大鼠肝窦Disse间隙胶原大量沉积 ,中央静脉周围及肝小叶Ⅲ区的肝窦内以Ⅰ型胶原为主 ;FFBJRGP治疗后 ,肝窦内、中央静脉周围胶原明显减少 ,肝窦内胶原类型由Ⅰ型向Ⅲ型转化。结论　FFBJRGP可有效抑制肝血窦基底膜胶原的合成和沉积 ,促进胶原由幼稚向成熟型转化 ,从而有效阻滞肝纤维化的进程