嗅神经鞘细胞和自体坐骨神经移植修复受损视神经

背景:有研究已初步证明了甲泼尼龙对受损视网膜节细胞的早期保护作用。目的:观察甲泼尼龙联合嗅神经鞘细胞和自体坐骨神经移植大鼠受损视神经纤维及其髓鞘的形态学及计数变化。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-09/2006-03于北京大学医学部神经解剖实验室完成。材料:选取成年雄性SD大鼠40只,取其中4只做形态学正常对照。方法:其余36只大鼠按随机数字表法分为6组,即视神经损伤模型组、甲泼尼龙组、嗅神经鞘细胞移植组、嗅神经鞘细胞移植 甲泼尼龙组、坐骨神经移植组、坐骨神经移植 甲泼尼龙组,每组6只。主要观察指标:取视神经,制作冰冻切片,移植后14,21d分别从各组切片中随机抽取10张载玻片,对生物素标记的葡聚糖胺染色的视神经纤维及甲苯胺蓝染色的视神经髓鞘进行形态学观察,电镜下对视神经纤维髓鞘进行计数。结果:顺行追踪剂生物素标记的葡聚糖胺在视神经中的染色结果主要表现为嗅神经鞘细胞移植 甲泼尼龙组、坐骨神经移植 甲泼尼龙组,与视神经损伤模型组相比,神经纤维排列较整齐,发生中晚期溃变的纤维比例较小。移植后14,21d,甲泼尼龙组视神经纤维髓鞘数量均显著高于视神经损伤模型组(P<0.05,0.01)。坐骨神经移植 甲泼尼龙组均显著高于坐骨神经移植组(P<0.05)。嗅神经鞘细胞移植 甲泼尼龙组均显著高于嗅神经鞘细胞移植组(P<0.05)。结论:形态学结果表明嗅神经鞘细胞和自体坐骨神经移植与甲泼尼龙的联合作用能激发并增强受损中枢神经的自我保护及修复作用,对视神经纤维及其髓鞘溃变速度有延缓作用。     

成年大鼠嗅黏膜嗅成鞘细胞的纯化

嗅成鞘细胞(OECs)是一种独特的中枢神经胶质细胞,分布于嗅球和鼻腔嗅黏膜,可分泌多种生物活性物质,现已证明来自嗅球的OECs与来自鼻腔嗅黏膜的OECs形态学特征与免疫组织化学性质是一致的,且都具有促进中枢神经系统轴突再生的作用。目前用于移植的OECs多数取材于嗅球,由于嗅黏膜OECs在自体取材上有着方便、快捷和安全性的特点,     

产前束缚应激对子代大鼠学习记忆能力的影响

越来越多的实验证明：嗅球的成鞘细胞(OECs)移植到脊髓损伤处可形成细胞链，引导新生神经纤维的生长，有助于神经传导束的修复。目的：Nogo蛋白是具有抑制轴突再生的一种蛋白。观察Nogo蛋白在OECs中亚细胞水平的表达部位，研究Nogo蛋白在中枢神经系统轴突再生中的作用，进一步明确其功能意义。     

小檗碱对局部脑缺血组织中HIF-1α表达的影响

目的 研究大鼠局部性脑缺血再灌注损伤时,小檗碱(BE)对缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达及脑神经元凋亡的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉阻塞再灌注组(MCAO/R组)、假性治疗组(DMSO组)、小檗碱10mg/kg治疗组(BE10组)、小檗碱20mg/kg治疗组(BE20组)、小檗碱40mg/kg治疗组(BE40组).治疗组在术前48h、24h及术后6h腹腔注射相应剂量药物,观察各组大鼠神经行为学缺陷;再灌注7d,TTC染色观察脑梗死体积变化;再灌注24h,制备脑组织切片分别作Nissl染色、免疫组织化学染色、TUNEL标记及免疫荧光双标记.结果 BE20、BE40组神经功能较MCAO/R组有明显改善(P＜0.05),但BE10组神经学评分与MCAO/R组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).不同剂量BE治疗均可以减小梗死灶体积(P＜0.05),且呈现剂量依赖性.Nissl染色可见BE治疗组皮质神经元结构较清晰,胞体肿胀、核固缩、核溶解程度较模型组及假性治疗组明显减轻,淡染区域减小;免疫组织化学法观察到,BE组HIF-1α、Caspase-3、BNIP3、VEGF及TUNEL标记的阳性细胞数减少;免疫荧光双标记显示HIF-1α与BNIP3、Caspase-3及TUNEL阳性颗粒共表达于细胞中.结论 BE可能通过降低HIF-1α水平并下调其下游的BNIP3和VEGF的表达,从而减少凋亡因子Caspase-3的作用而发挥神经元保护作用.     

动物实验模型中多极导管心室除颤系统电除颤对心脏功能的影响

评价新型的双极和三极导管自动心室除颤系统电除颤对左心室收缩和舒张功能的影响。动物麻醉后,在X光机指导下,分别在10只犬心脏内装置双极导管自动除颤系统（组Ⅰ）;在10只猪心脏内装置三极导管自动除颤系统（组Ⅱ）;并行电除颤试验。使用食管超声心动图在电除颤前后记录二维、M型和多谱勒超声图像。组I动物接受4次电除颤,电量为64J;组Ⅱ接受平均8次电除颤,电量为210J。结果显示：左室收缩面积分数、左室等容舒张时间和二尖瓣血流E波与A波速度比值以及时间-流速积分比值等反映左室舒缩功能的指标在两组动物除颤后均无显著改变。研究表明：两种经静脉导管自动心室除颤系统中反复低能量心内膜电除颤对左室舒缩功能无明显损伤作用;研究结果为经静脉多极导管自动心室除颤系统在临床的应用和电生理研究提供了可靠的实验数据。     

肺结核病人特异性抗体分泌水平及CD23、CD40表达

目的：探讨肺结核病人Ｂ淋巴细胞活化状态。方法：采用间接酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）及细胞－酶联标记法测定了５７例活动性肺结核病人特异性抗体分泌水平及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＣＤ２３、ＣＤ４０的表达。结果：（１）肺结核病人血清抗结素纯蛋白衍生物（ＰＰＤ）抗体ＩｇＧ、ＩｇＭ水平明显低于健康对照;病人离体培养的ＰＢＭＣ在无ＰＰＤ存在的条件下,所产生的ＩｇＧ抗体明显高于健康对照,而加入ＰＰＤ后ＩｇＧ抗     

环境温度变化对去卵巢大鼠下丘脑视上核和室旁核c-Fos蛋白表达的影响

目的:以不同温度刺激去卵巢大鼠,观察下丘脑视上核(SO)和室旁核(PVN)细胞c-Fos蛋白表达的变化,探讨更年期妇女血压、渗透压以及体温调节功能异常的可能机制.方法:将去卵巢(OVX)和假手术(Sham)大鼠分别置于4,10,25,33和38℃5个温度等级的培养箱内,2 h后取脑.采用免疫组织化学法检测各实验组SO和...     

成年大鼠嗅球和鼻腔嗅粘膜成鞘细胞的分离、培养与鉴定

目的　在嗅球成鞘细胞 (OECs)移植到脊髓可有助于损伤神经纤维再生的基础上 ,分别对嗅球和嗅粘膜的OECs进行培养 ,探索自体嗅粘膜作为OECs供体的可能性。　方法　根据OECs、成纤维细胞和星形胶质细胞贴壁时间的不同 ,采用差时贴壁方法分离出OECs,培养 14div后进行NGFRp75和GDNF的免疫细胞化学染色。　结果　按形态学和免疫组织化学特性 ,培养的嗅球和嗅粘膜OECs可分为 3类 :双极细胞、三级细胞和扁圆细胞 ,其中以双极细胞最多。嗅粘膜的双极成鞘细胞的突起更加细长。　结论　差时贴壁细胞分离法是一种简单、经济、实用的成鞘细胞分离方法。鼻腔嗅粘膜OECs的形态学和免疫细胞化学特性与嗅球OECs基本相同 ,本实验为临床开展自体嗅粘膜OECs修复脊髓损伤的研究提供参考     

基于剪切波变换的医学图像融合算法

剪切波变换是一种新颖的多尺度几何分析工具,具有多分辨率、多方向性、效率较高等优点,比小波变换、曲波变换、轮廓波变换等图像表示方法有独特有的优势.基于剪切波变换提出一种医学图像融合算法,先将原始图像通过剪切波变换分解为低频子带图像和高频方向子带图像,然后采用非负矩阵分解方法融合低频子带系数,再通过深入研究人类视觉系统的特性提出最大视觉能量对比度方法,利用局部对比度和局部区域的能量和进行高频方向子带系数的融合,最后通过剪切波逆变换得到融合图像.两组实验均显示所提出的融合方法在与其余3种融合方法的比较中,采用的5项客观评价指标均有4项指标达到最优值,证明所提出的方法获取的融合图像效果最好.     

甲基强的松龙上调受损视网膜节细胞内Hsp27蛋白的表达

目的研究甲基强的松龙（MP）上调热休克蛋白（Hsp27）蛋白对受损中枢神经元自我保护及修复机制的激发和增强作用,为进一步促进受损中枢神经元存活和纤维再生创造有利的条件.方法建立中枢神经损伤模型（视神经眼眶内切断术）,经或未经MP治疗的术后动物分别存活4、7 14、21、28 d,取视网膜,切片,Nissl染色观察视网膜节细胞（RGCs）形态和存活数量的变化,用免疫组织化学染色的方法观察节细胞层中Hsp27的表达（检测A值）.用SAS软件对数据进行统计学处理.结果 MP治疗组可见受损RGCs在7、14 d的存活数量增多,有统计学意义（P＜0.01）,在受损RGCs表达增多的Hsp27表达更加强烈（检测A值）.RGCs存活率与A值在各个时间点的变化趋势相似.结论 MP可使具有保护作用的Hsp27表达上调,从形态学角度提示了MP可能激发并增强受损中枢神经的自我保护及修复机制.