C57BL小鼠survivin基因miRNA表达载体的构建*★

背景：Survivin在多种肿瘤组织中的高表达，具有调节细胞增殖分裂和强大的抗凋亡功能。 目的：利用RNA干扰技术，构建具有特异性阻断C57BL小鼠survivin基因的微小RNA(micro RNA，miRNA)表达载体。 设计、时间及地点：单一样本观察，于2008-06/11在重庆医科大学附属第一医院神经内科实验中心完成。 材料：环形pcDNA™6.2-GW/EmGFPmiR和BLOCK-iT™ Pol II miR RNA干扰 Expression Vector Kit with EmGFP为Invitrogen公司产品；DH5a大肠杆菌为实验室保存；xho I和BamH I酶、壮观霉素均为上海生工生物工程有限公司产品。 方法：应用设计软件在C57BL小鼠survivin基因的mRNA上寻找特异性的短核苷酸序列，并设计合成4对寡核苷酸序列，经退火后形成双链DNA片段，采用基因克隆技术，将其克隆到pcDNA™6.2-GW/EmGFPmiR的载体中，转化DH5a大肠杆菌，挑单菌落种于含有壮观霉素LB液体培养基中，提取质粒。 主要观察指标：应用测序法和琼脂糖电泳检测对重组体进行鉴定。 结果：测序结果显示插入片段与线性载体连接正确，无碱基突变、缺失、插入等异常。双酶切处理pcDNA™6.2-GW/EmGFP-miR重组质粒结果显示片段大小与预期相符。 结论：实验结果表明成功构建了C57BL小鼠survivin基因的微小RNA表达载体。     

手部封闭治疗后并发指端坏死1例

1临床资料 患者,女,55岁,因左拇指屈伸受限伴弹响及疼痛2个月余,在当地卫生院就诊,诊断为腱鞘炎,给予局部封闭治疗(2%利多卡因加醋酸强的松龙混合液2毫升),约10 min后患者感手指麻木伴指端疼痛,手指颜色逐渐由红润转为苍白,以拇、食指为甚,继而全手掌及左前臂颜色逐渐变紫,医生嘱注意观察,未给予特殊处理.     

肺癌术后转移及预后与转移抑制基因nm23和nm23-Hl的关系

目的 探讨人非小细胞肺癌中nm23、nm23-H1的表达水平与肺癌的浸润、转移和预后的关系.方法 应用免疫组织化学法对146例人非小细胞肺癌中nm23、nm23-H1的表达水平进行研究,用Cox比例风险模型进行多因素分析.结果 肺癌中nm23、nm23-H1表达水平(71.23±5.19)%,(64.98±5.72)%均明显低于癌旁肺组织(89.00±7.21)%和正常肺组织(90.66±6.78)%(P＜0.05),肺癌中nm23、nm23-H1的表达水平与肺癌的细胞分化程度、是否存在转移有密切关系(P＜0.05),nm23-H1高表达组术后3年及5年(78.81%及55.73%)生存率均明显高于低表达组(21.42%及17.83%)(P<0.05).Cox比例风险模型分析显示影响肺癌患者术后预后的前4种因素依次为nm23-H1表达水平,TNM分期,淋巴结受侵状况和原发肿瘤大小.结论 nm23、nm23-H1在肺癌中起转移抑制基因的作用,它们的表达水平降低可能是肺癌转移的重要原因之一.     

主动保留尿控结构的HoLEP和TUPKEP疗效对比分析

目的:探讨主动保留尿控结构的经尿道钬激光前列腺剜除术(HoLEP)和经尿道等离子前列腺剜除术(TUPKEP)在前列腺组织剥离及疗效上的差异。方法:310例良性前列腺增生(BPH)患者行HoLEP或TUPKEP手术,其中HoLEP组165例,TUPKEP组145例,术中尽最大可能保留尿道黏膜、前列腺前括约肌、前列腺被动括约肌,并尽量避免横纹括约肌(SS)等尿控结构的损伤。收集并统计学分析2种术式的围手术期和术后各项随访指标,评估尽最大可能保留尿控结构的HoLEP和TUPKEP的整体疗效及其在前列腺组织剥离上的差异。结果:310例BPH患者均顺利完成手术。两组所切除的腺体组织重量差异无统计学意义(P0.05),术中出血量HoLEP组少于TUPKEP组(P0.05)。两组总手术时间和腺体剥离时间的差异均无统计学意义(P0.05),但HoLEP组腺体粉碎时间要明显少于TUPKEP组切块时间(P0.05),且HoLEP组单位时间剜除效率及单位体积剜除效率更高(P0.05)。此外,HoLEP组的膀胱冲洗时间、留置尿管时间及术后住院时间均更短(P0.05)。两组术后国际前列腺症状评分(IPSS)、最大尿流率(Q_(max))、残余尿量(PVR)及其手术前后变化值差异均无统计学意义(P0.05)。两组患者中均有暂时性的压力性尿失禁发生,其中HoLEP组26例(15.8%),TUPKEP组17例(11.7%),差异无统计学意义(P0.05)。两组感染、发热及尿道狭窄的发生率差异无统计学意义(P0.05)。但HoLEP组患者拔除尿管后的尿潴留及术后再出血发生率均更低(P0.05)。结论:主动保留尿控结构的HoLEP与TUPKEP均取得较好的效果,二者疗效相当,但HoLEP剜除效率相对更高,止血及防止再出血效果更好,对尿控的保护程度更高,术后恢复速度也更快。因此,其在前列腺组织剥离方法上具有更好的优势。     

伤椎置入螺钉长度对胸腰椎骨折复位的影响

目的探讨在胸腰椎骨折手术治疗中伤椎置入螺钉长度对骨折复位的影响。方法将35例胸腰椎骨折患者按伤椎置入螺钉长度分为两组:研究组18例为伤椎椎弓根置入标准螺钉(45 mm),对照组17例为伤椎椎弓根置入短螺钉(35 mm)。两组患者均采用后路手术,比较两组术后椎体前缘高度、后凸Cobb角、椎间隙高度变化及术后12个月维持情况。结果患者均获得随访,时间12～30个月。两组椎体前缘高度、椎间隙高度和后凸Cobb角术后均较术前明显改善(P0.05)。术后12个月伤椎骨折复位的维持情况研究组明显优于对照组(P0.05)。结论伤椎置钉对胸腰椎骨折具有良好的复位效果,伤椎标准螺钉对骨折复位及维持复位的效果更好。     

高压氧加中药脑复汤治疗脑损伤后综合征66例疗效观察

2000-03～2004-06我院应用高压氧加中药脑复汤治疗脑损伤后综合征66例,疗效满意,现报告如下.     

Lactacystin对体外C6胶质瘤细胞超微结构影响的研究

目的 探讨蛋白酶体抑制剂Lactacystin 对体外C6胶质瘤细胞超微结构的影响.方法 Lactacystin处理体外培养的G6胶质瘤细胞,HE染色后光镜观察细胞的死亡情况,锇铀铅染色后透射电镜观察细胞超微结构变化.结果 Lactacystin处理体外C6胶质瘤细胞24 h后,光镜下见胞浆浓缩深染,胞核染色质致密浓缩,透射电镜下见细胞表面微绒毛消失,核皱缩,染色质致密浓缩、边集.结论 蛋白酶体抑制剂Lactacystin可以诱导体外G6胶质瘤细胞凋亡.     

慢性心力衰竭的药物治疗现状

新观念认为心功能不全分为无症状与有症状两个阶段，前者有心室功能障碍的客观依据。如左室射血分数（LVEF）降低，但无典型充血性心力衰竭（CHF）的症状。心功能尚属NYHAI级，是有症状的心力衰竭的前期，如不进行有效治疗，迟早会发展为有症状的心力衰竭。     

1 470 nm半导体激光前列腺剜除术初步体会（附56例报告）

目的探讨经尿道1 470 nm半导体激光前列腺剜除术(Di LEP)治疗良性前列腺增生症(BPH)的方法和疗效。方法对2015年4月-2015年10月1 470 nm Di LEP剜除的56例BPH患者临床资料进行回顾性分析。在精阜外上方5点或7点于外括约肌近侧处用镜鞘逆推侧叶增生腺体或用激光点切加镜鞘逆推的方式找到外科包膜平面,用激光进行汽化和止血,剜除中叶、左侧叶、右侧叶,并推入膀胱腔,组织粉碎器粉碎剜除腺体。结果剜除腺体时间15~65 min,组织粉碎时间5~37min,切除腺体组织29~152 g。术中无电切综合征、直肠穿孔和膀胱穿孔病例,无输血病例。短期尿失禁5例。术后3个月,国际前列腺症状评分(IPSS)、生活质量评分(QOL)、最大尿流率(Qmax)均较术前明显改善(P0.01)。结论 1 470 nm半导体激光具有良好的组织汽化和止血效果,1 470 nm Di LEP+组织粉碎,最大限度地切净了增生腺体,止血更加彻底,还节省了手术时间。     

颅骨钻孔血肿清除治疗高血压脑出血的再探讨

高血压脑出血是一种常见病,通常病情危重,死亡率高达40%～50%,存活者多有严重病残~([1]).随着城市人口的老龄化,其发病率明显上升~([2,3]).我科自2007年3月至2007年12月应用颅骨钻孔血肿清除术治疗高血压脑出血30例,由于术中侧重血肿的清除,效果良好.