子宫内膜癌中增殖细胞核抗原表达和S-100阳性朗格汉斯细胞浸润及其临床意义的评估

目的 探讨子宫内膜癌增殖细胞核抗原(PCNA)的表达和肿瘤微环境中S-100蛋白阳性的朗格汉斯细胞(LC)的浸润情况及其临床意义.方法 采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法对10例正常增殖期子宫内膜组织和72例子宫内膜癌组织PCNA的表达及S-100蛋白阳性LC浸润情况进行了检测,分析其与子宫内膜癌临床病理特征的关系.结果 PCNA在子宫内膜癌组织中的表达阳性率和阳性指数评分均高于正常子宫内膜,差异有极显著性意义(P<0.01); S-100蛋白阳性的LC在正常子宫内膜组织中未见浸润,在子宫内膜癌组织中浸润阳性率为81.9%,差异有极显著性意义(P<0.01); PCNA阳性指数评分在高分化、低手术分期和肌层浸润深度≤1/2的子宫内膜癌组织中低于中低分化、高手术分期和子宫肌层浸润深度>1/2的子宫内膜癌组织,差异有极显著性意义(P<0.01);S-100蛋白阳性的LC在高分化、低手术分期和肌层浸润深度≤1/2的子宫内膜癌组织中浸润多于中低分化、高手术分期和子宫肌层浸润深度>1/2的子宫内膜癌组织,差异有极显著性意义(P<0.01);PCNA阳性指数评分与S-100蛋白阳性LC的浸润呈负相关(r=-0.471,P<0.01).结论 癌组织微环境中LC浸润反映机体抗肿瘤的免疫反应,PCNA的阳性表达和缺乏LC浸润可能与子宫内膜癌不良预后有关.     

血浆血栓烷B2不同孕期对子痫前期的预测价值

目的:研究孕妇血浆TXB2在子痫前期以及正常妊娠中的变化并探讨不同孕期对子痫前期的预测价值。方法:采用前瞻性、双盲的研究方法,对180例孕前血压正常的孕妇,在妊娠10+0~14+6、20+0~24+6、30+0~34+6周3个时间段母体血浆中的TXB2水平进行测定,观察孕妇孕期病情变化并随访妊娠结局。结果:①180例孕妇发展为子痫前期10例(子痫前期组),其中4例重度子痫前期、6例轻度子痫前期;170例妊娠结局正常(正常妊娠组)。②180例孕妇血浆中TXB2的水平随着妊娠的进展,进行自身配对比较均逐渐上升,不同阶段之间比较,差异有显著性意义(P=0.000<0.01)。③在妊娠10+0~14+6周子痫前期组母体血浆TXB2水平与正常妊娠比较,差异有上升的趋势,但差异无统计学意义(P=0.486>0.05);20+0~24+6、30+0~34+6子痫前期母体血浆TXB2与正常妊娠组比较,其值均明显上升(P=0.016、0.002,P均<0.05)。④母体血浆中TXB2水平在妊娠20+0~24+6、30+0~34+6周2个阶段对子痫前期均有预测价值,ROC曲线下面积分别为0.724(95%CI0.617~0.830)和0.797(95%CI0.674~0.920),应用ROC曲线计算2个阶段的最佳切入值分别为3 750 ng/ml和4 400 ng/ml,它们预测子痫前期的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、比数积(OR)分别为80%、69.5%、13.3%、98.33%、9.11和90%、68.82%、13.84%、99.13%、19.86。结论:子痫前期母体血浆TXB2水平在临床症状出现前很长一段时间就异常升高,20+0~24+6、30+0~34+6周母体血浆TXB2水平对子痫前期有早期预测价值,妊娠30+0~34+6周的预测价值优于妊娠20+0~24+6周。     

tTG蛋白与子宫内膜癌细胞凋亡和紫杉醇化疗敏感性

目的:探讨组织转谷氨酰胺酶抑制剂(monodansylcadaverine,MDC)对体外培养的人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的诱导作用和对紫杉醇(TS)的化疗增敏性。方法:用MTT法检测逐渐递增的MDC药物浓度和不同作用时间对细胞增殖的影响。用流式细胞技术检测MDC对细胞凋亡和紫杉醇的化疗敏感性的影响。结果:Ishikawa细胞中,MDC处理组和对照组凋亡率差异有统计学意义(P<0.05);MDC+TS组的细胞凋亡率亦高于TS组(P<0.05);同时,MDC对细胞凋亡的诱导作用呈一定的剂量时间依赖关系。结论:组织转谷氨酰胺酶对维持子宫内膜癌细胞生长有一定作用,抑制酶的活性可以促进细胞凋亡并增加细胞对紫杉醇的化疗敏感性。     

卵巢上皮性肿瘤中RIZ1基因表达缺陷的临床意义

目的:探讨抑癌基因RIZ1在卵巢上皮性肿瘤组织及卵巢癌细胞系中的表达及其表达变化与卵巢癌发生的关系。方法:以卵巢肿瘤组织及卵巢癌细胞系为研究对象。RT-PCR检测RIZ1 mRNA水平;蛋白印迹检测RIZ1蛋白表达。结果:卵巢癌组织、卵巢癌细胞系、良性肿瘤组织及正常卵巢组织中RIZ1 mRNA相对含量的平均值分别为0.42±0.16、0.34±0.12、0.68±0.12及1.17±0.08,RIZ1蛋白相对含量的平均值分别为0.48±0.11、0.38±0.08、0.82±0.11及1.56±0.14。卵巢癌组织、卵巢癌细胞系、良性卵巢肿瘤组织分别与正常卵巢组织比较,RIZ1基因的表达差异均有统计学意义(P<0.05);良性卵巢肿瘤组织与卵巢癌组织比较,RIZ1基因的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RIZ1基因表达缺陷与上皮性卵巢癌的发生密切相关。     

Difference in Expression of Bcl-2 and Bcl-xl Genes in Cisplatin- sensitive and Cisplatin-resistant Human in Ovarian Cancer Cell Lines

Apoptosisisthemainmechanismofcelldeathandisregulatedbyalargenumberofgenes.Amongthem ,theBcl 2familiesareconsideredtoplayakeyroleintheexecutionorpreventionofapoptosisinducedbygenotoxicstressthroughthealterationofapoptoticsignals.Epithe lialovariancancerist…     

MDR1 and MDR3 Genes and Drug Resistance to Cisplatin of Ovarian Cancer Cells

To investigate the relationship between MDR1 and MDR3 gene and drug resistance to cisplatin of ovarian cancer cells. Two siRNAs (MDR1, MDR3) which specifically targeted MDR1 and MDR3 genes were transfered into A2780/DDP cells. Then double staining with Annexin- V-FITC/PI was used to detect cell apoptosis by the flow cytometry (FCM). A2780/DDP cell viability was determined by MTT. MDR1 and MDR3 mRNA were assessed by RT-PCR. Caspase-3 protein was detected by Western blotting. Transfection of MDR1 and MDR3 siRNA into A2780/DDP cells failed to reverse the drug-resistance of A2780/DDP cells to cisplatin (P>0.05). No significant differ- ence in the apoptosis efficiency was observed between the MDR1 and MDR3 siRNA, pSuppressor- Neo vector transfection cells and untreated cells (P>0.05). In the presence of cisplatin of different concentrations, the viability of A2780/DDP cells was not significantly decreased after the transfection. No changes in MDR1 and MDR3 mRNA were found in MDR1 and MDR3 siRNA-transfected A2780/DDP cells. As compared with pSuppressorNeo and untreated groups, no significant difference existed in the expression of MDR1 and MDR3 mRNA (P>0.05). The expression of caspase-3 protein in MDR1 and MDR3 siRNA transfected A2780/DDP cells was not significantly increased. It is con- cluded that multidrug resistance induced by cisplatin in ovarian carcinoma cell lines is not due to overexpression of MDR1 and MDR3 gene. The drug resistance of ovarian carcinoma cells to cisplatin is not mediated by P-glycoprotein.     

体外模拟二氧化碳人工气腹对宫颈癌细胞生长的影响

目的 观察二氧化碳（CO2）人工气腹对宫颈癌细胞生长的影响，探讨其与乏氧的关系。方法 2005-10—2006-03华中科技大学同济医学院附属协和医院通过裸鼠右下腹腔注射宫颈癌细胞，注射宫颈癌细胞株（Hela）数量：4×10^9／L：将注射后40只裸鼠随机分成4组，每组10只：阴性对照组（常氧组）：仅给予右下腹腔注射宫颈癌细胞；CO2气腹模拟环境按CO2灌注压分3组：CO2灌注压4mmHg（1mmHg=0．133kPa）组，CO2灌注压10mmHg组，CO2灌注压16mmHg组．4周后观察裸鼠体重改变、切除瘤灶称瘤重、瘤体标本用免疫组化测定增殖细胞核抗原（PCNA）、Western-blot方法检测瘤体的缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达．结果 与阴性对照组比较，CO2气腹各组裸鼠体重下降明显，而瘤体重量增加相对显著，并随着CO2灌注压的增高这种趋势更为显著（P〈0．05）；CO2气腹各组裸鼠PCNA表达显著高于阴性对照组（P〈0．01）；CO2气腹各组裸鼠HIF-1α蛋白的表达与阴性对照组比较明显增加，差异有统计学意义（P〈0．01）．结论 与阴性对照组比较，CO2人工气腹环境可促进宫颈癌细胞生长，其机制可能与HIF-1α激活了PCNA表达，促进了细胞增殖有关。     

SDF-1/CXCR4对卵巢上皮性癌细胞增殖和侵袭的影响

目的:研究SDF-1/CXCR4在卵巢癌细胞生物学活性中的作用。方法:用RT-PCR方法检测卵巢癌细胞株SW626及Anglne中的SDF-1和CXCR4的表达。细胞经外源性SDF-1或者抗CXCR4单克隆抗体干预后,用MTT法检测细胞增殖,PI测细胞凋亡,Annexin-V/PI法检测细胞早期凋亡,Transwell小室检测细胞的迁移侵袭活性。结果:两株卵巢癌细胞株中,SW626细胞既表达SDF-1又表达CXCR4,Anglne细胞则两者均不表达。在SW626细胞中,SDF-1作用于无血清状态下培养的细胞(吸光度A值为0.911±0.01),与对照组(吸光度A值为0.506±0.01)相比,差异有统计学意义(P<0.01),而加入抗CXCR4单克隆抗体作用后(10μg/ml A值为0.725±0.01,20μg/ml A值为0.650±0.02),与SDF-1组相比,差异均有统计学意义(分别为P<0.05和P<0.01);抗CXCR4单克隆抗体作用于无血清状态下培养的细胞(10μg/ml A值为0.655±0.11和20μg/ml A值为0.520±0.04),与对照组(A值为0.724±0.03)相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。加入外源性SDF-1后,SW626细胞在无血清状态下的早期凋亡数为15.6%,相对于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。抗CXCR4单克隆抗体可增加SW626细胞中的PI阳性细胞数(P<0.01)。并且,与对照组相比,SDF-1促进SW626细胞的迁移和侵袭能力增强(P<0.01),而此活性可被抗CXCR4单克隆抗体阻断。结论:SDF-1/CXCR4可能通过促进细胞增殖、迁移、侵袭及抑制其凋亡,使卵巢癌细胞获得进展。     

Aurora-A/STK15在上皮性卵巢癌组织中的表达及其与预后的关系

目的探讨Aurora-A/STK15在上皮性卵巢癌组织中的表达变化及其与预后的关系。方法应用显微切割法从石蜡切片上提取总RNA,实时定量PCR和免疫组化方法检测80例原发性卵巢上皮性癌和29例正常卵巢组织中Aurora-A/STK15mRNA及蛋白水平的表达,分析其作为卵巢癌标志物的可行性以及与预后的相关性。结果上皮性卵巢癌组织中Aurora-A/STK15mRNA的表达明显高于正常卵巢组织[（60.5±74.2）对（2.19±1.4）,P〈0.01],但mRNA的表达水平与卵巢癌的分期和分级以及生存时间无关,P〉0.05;上皮性卵巢癌Aurora-A/STK15蛋白的阳性表达率也明显高于正常卵巢组织（87.3%对6.9%,P〈0.05）,蛋白表达水平随病理分级和手术分期增加而增加,与病理分级密切相关（P〈0.05）,而与手术分期的相关性无统计学意义（P〉0.05）;在行理想肿瘤细胞减灭术并行术后辅助泰素化疗的病例组,Aurora-A/STK15蛋白高表达预后好,总的生存时间较低表达病例生存时间长（P〈0.05）;在除泰素以外的铂类药物化疗组,Aurora-A/STK15蛋白高表达则与不良预后相关,高表达者总的生存时间短（P〈0.05）。结论Aurora-A/STK15在上皮性卵巢癌中存在异常表达,且与卵巢癌的分化程度以及手术联合辅助化疗的预后密切相关,有望成为卵巢癌个体化治疗疗效的预测因子。     

罗比卡因和布比卡因用于自控硬膜外分娩镇痛的临床效果对比研究

目的 :比较罗比卡因和布比卡因联合芬太尼用于自控硬膜外分娩镇痛 (PCEA)的效果及运动神经阻滞情况。方法 :将 6 0例健康、单胎、足月的初产妇随机分为两组 ,接受 0 .1%罗比卡因加 1μg/ml芬太尼 (RF组 )或 0 .0 75 %布比卡因加 1μg/ml芬太尼 (BF组 )自控硬膜外分娩镇痛。两组进行视觉模拟镇痛评分 (VAS)和下肢运动神经阻滞评分(MBS)。记录两组产程时间、分娩方式、阴道流血量及新生儿Apgar评分。结果 :两组产妇均有较可靠的镇痛效果 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;RF组可下床活动者为 96 .6 7% ,而BF组为 33.33% ,两组差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;两组产程时间和分娩方式差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;两组新生儿Apgar评分差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :低浓度罗比卡因或布比卡因联合小剂量芬太尼用于PCEA均可产生可靠的镇痛效果。产程中罗比卡因极少引起运动阻滞 ,产妇有下床活动能力 ,其效果优于布比卡因