电压门控钠通道亚型Nav1.5在乳腺癌细胞中的表达及与细胞体外转移的关系

目的 观察电压门控钠通道(voltage-gated sodium channels,VGSCs)亚型在乳腺癌细胞中的表达及其与细胞体外转移的关系.方法 通过RT-PCR,Western blot,MTT及Transwell小室迁移和侵袭实验,检测乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中VGSCs的表达及VGSCS特异性阻断剂河豚毒素(TTX)对细胞的毒性、迁移和侵袭特性的影响.结果 在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中同时存在NaV1.1,NaV1.4和NaV1.8的高表达;而在MDA-MB-231细胞中发现NaV1.3和NaV1.5、NaV1.6的表达量较MCF-7细胞中明显升高,尤其是NaV1.5的表达具有功能性意义.体外应用1μmol/L和30μmol/L TTX处理细胞后,与对照组相比,MDA-MB-231细胞的体外侵袭性分别下降了(12.50±0.19)%和(53.58±1.03)%.而MCF-7细胞的体外侵袭性却没有发生明显变化.结论 乳腺癌细胞MDA-MB-231中存在高表达的NaV1.5,TTX阻断VGSCs后显著抑制其体外侵袭力.     

早期宫颈癌和癌前病变中微血管密度和微淋巴管密度的相关性研究

目的 同时检测早期宫颈癌和癌前病变中的肿瘤微血管密度(MVD)和微淋巴管密度(LVD),分析它们之间的关系及其临床意义.方法 采用SP法利用抗人CD34和D2-40单克隆抗体分别检测102例宫颈组织中的MVD和LVD水平,并结合临床资料分析MVD和LVD与肿瘤的临床分期、淋巴结状态和肿瘤细胞分化程度之间的关系.结果 在早期宫颈癌和癌前病变中MVD与临床分期(P＜0.01)和患者盆腔淋巴结转移(P＜0.05)有显著相关性;LVD与临床分期(P＜0.01)、患者盆腔淋巴结转移(P＜0.01)和肿瘤细胞的分化程度(P＜0.01)有显著相关性.研究还发现早期宫颈病变组织中MVD和LVD的水平呈正相关(r=0.620,P＜0.01).结论 早期宫颈病变中MVD和LVD与宫颈病变的临床进展和转移密切相关,高MVD和LVD促进宫颈病变的发展和转移,并且早期宫颈癌的血管新生和淋巴管新生密切相关.     

人宫颈癌发生中p16INK4A表达缺陷与其外显子甲基化的关系

目的 研究抑癌基因p16INK4A在宫颈癌发生中的表达变化，分析这种差异表达与甲基化的关系。方法 逆转录聚合酶链技术（RT．P（1R）检测30例宫颈癌组织标本、48例宫颈上皮内瘤样病变（CIN）组织（CIN Ⅰ12例、CINⅡ16例、CINⅢ20例）中p16INK4A基因的表达。Western Blot分析P16INK4A蛋白水平的表达。甲基化特异性的PCR技术（MSP）对p16INK4A DNA进行甲基化分析。以每例标本相应正常宫颈组织作为对照。结果 70％（21／30）宫颈癌组织中p16INK4A表达下降或缺失，与正常宫颈组织、CIN Ⅰ和CINⅡ中的p16INK4A表达相比，差异具有统计学意义（P〈0．05），与CIN Ⅲ相比差异无统计学意义（P〉0．05）。蛋白的表达检测也得到相似的结果。MsP检测发现宫颈癌组织中有9例p16INK4A外显子甲基化，甲基化率为30％，其中8例年龄小于40岁，提示甲基化易于出现在年轻患者。而CIN组织中仅CIN Ⅲ发现1例甲基化，说明甲基化随着宫颈病变的发展而增多。分析甲基化与p16INK4A表达的关系，发现42．86％（9／21）的宫颈癌组织中p16INK4A表达下降与甲基化有关，甲基化的宫颈癌组织中p16INK4A表达均下降。结论 p16INK4A作为一种抑癌基因，它的表达缺失或下降在宫颈癌的发生中起重要作用，外显子甲基化是导致其表达缺陷的部分原因。     

国产奥硝唑栓治疗细菌性阴道病及滴虫性阴道炎的临床研究

目的：评价盥硝唑栓治疗厌氧菌所致阴道病及滴虫性阴道炎的临床疗效及其安全性。方法：采用多中心随机双盲对照的研究方法，共观察142例细菌性阴道病和130例滴虫性阴道炎患者。试验药为奥硝唑栓，对照药为甲硝唑栓，均为每日一次，每次500mg，塞入阴道深处，疗程7d。结果：奥硝唑栓和甲硝唑栓治疗细菌性阴道痛痊愈率和有效率分别为62．3％，84．1％和54．8％，76．7％，细菌清除率分别为95．3％和94．1％；治疗滴虫性阴道炎的痊愈率和有效率分别为70．3％，98．4％和57．6％，97．0％。两组间比较均无统计学差异（P〉0．05）。试验组和对照组药物不良反应发生率分别为3．0％及5．0％（P〉0.05）。结论：奥硝唑栓治疗厌氧苗所致阴道病及滴虫性阴道炎安全有效，不良反应少。     

p27、cyclin E和HPV16在宫颈癌中的表达及其与预后的关系

目的:探讨细胞周期调控抑制因子p27(k ip1)和周期素E(cyc lin E)在宫颈癌发生发展中的作用及其与人乳头瘤病毒(HPV)16型感染之间的关系。方法:采用免疫组化二步法检测p27、cyc lin E和HPV 16蛋白在48例宫颈癌(宫颈癌组)、13例宫颈上皮内瘤变(C IN组)和15例正常宫颈组织(正常组)中的表达。结果:p27蛋白在宫颈癌组阳性表达率为25.00%,显著低于正常组和C IN组(2χ=29.253,P<0.01),并与宫颈癌患者病理分化程度有关(2χ=7.704,P<0.01)。cyc lin E蛋白在宫颈癌组阳性表达率为77.08%,显著高于正常组(2χ=19.695,P<0.01),而与C IN组无显著性差异(P>0.05),并与组织分化程度及淋巴结转移有关(2χ=9.148,P<0.01;2χ=4.737,P<0.05)。HPV 16蛋白在宫颈癌组阳性表达率为70.83%,显著高于正常组(2χ=12.184,P<0.01),而与C IN组相比差异无显著性(P>0.05)。p27表达与cyc lin E、HPV 16蛋白的表达均呈极显著性负相关(r=-0.563,P<0.01;r=-0.587,P<0.01),cyc lin E和HPV 16蛋白的表达呈极显著性正相关(r=0.566,P<0.01)。结论:p27的低表达或缺失和(或)cyc lin E的高表达可能在宫颈癌的发生发展中起重要作用,HPV 16病毒可能通过激活cyc lin E、下调p27导致细胞的永生化从而导致宫颈癌的发生。     

mdr1启动子调控CD∷UPP基因对紫杉醇耐药卵巢癌细胞的杀伤作用

目的:探讨腺病毒介导的mdr1启动子调控胞嘧啶脱氨酶∷尿嘧啶磷酸核糖转移酶(CD∷UPP)融合基因联合5-氟胞嘧啶(5-FC)对紫杉醇耐药卵巢癌细胞的特异性杀伤作用。方法:扩增、纯化含有mdr1-CD∷UPP基因的重组腺病毒,转染人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株A2780/Taxol和亲本细胞株A2780,RT-PCR检测mdr1和CD∷UPP基因的表达水平;之后加入5-FC,MTT法检测细胞抑制情况及旁观者效应,并观察腺病毒转染后裸鼠移植瘤的生长情况。结果:mdr1和CD∷UPP基因在A2780/Taxol细胞中可稳定表达,转染后A2780/Taxol组的细胞生长明显低于A2780组;转基因的A2780/Taxol细胞联合5-FC后可通过旁观者效应杀伤周围未转基因的耐药细胞;耐药组移植瘤生长明显受到抑制,肿瘤体积为(569.10±187.93)mm3,对照组肿瘤体积为(2111.98±230.82)mm3,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:mdr1启动子可调控CD∷UPP基因特异性表达并特异性杀伤紫杉醇耐药卵巢癌细胞。     

子宫颈癌发生发展中维甲酸受体-β基因启动子甲基化状态的研究

目的 研究维甲酸受体-β(RAR-β)基因在子宫颈癌发生、发展中的表达变化,分析其差异表达与甲基化的关系及临床意义.方法 采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测四种子宫颈癌细胞株、38例子宫颈浸润癌、30例子宫颈上皮内瘤变组织、10例正常子宫颈组织中RAR-β基因的表达,Western blotting对RAR-β蛋白进行定量检测,分析蛋白水平上的RAR-β表达的变化,并与正常子宫颈组织的RAR-β表达情况进行对照.应用甲基化特异性PCR(MSP)对细胞系和组织的RAR-βDNA进行甲基化分析,同时分析RAR-β基因的表达与子宫颈癌临床病理参数的关系.结果 子宫颈癌细胞系、子宫颈上皮内瘤变组织和子宫颈癌组织中RAR-β基因的表达缺失或下降,并与正常子宫颈组织中的RAR-β表达情况进行对照,差异具有统计学意义(P＜0.05).蛋白的表达检测也得到相同的结果.MSP检测发现3种子宫颈癌细胞株、11例癌组织、1例CIN Ⅰ级、5例CIN Ⅱ～Ⅲ级RAR-β第1外显子甲基化表现,甲基化者RAR-β表达均下降.RAR-β基因甲基化状态在不同的病理分级中差异有统计学意义(P=0.037),在不同的I临床分期(P≈1.000)及有无淋巴转移中差异无统计学意义(P≈1.000).结论 RAR-β基因的表达缺陷在子宫颈癌的发生中起重要作用,而启动子区异常甲基化是导致基因表达缺陷的主要原因.     

妊娠合并急性胰腺炎四例临床分析

妊娠合并急性胰腺炎并不常见，但却是妊娠期严重的并发症之一。国外报道的妊娠合并急性胰腺炎的发生率约为1：3300。妊娠合并急性胰腺炎孕妇的死亡率为37．0％，胎儿的死亡率为37．9％。国内报道其死亡率始终占妊娠合并急腹症孕妇死亡率的首位（54．6％），误诊率达72．7％。本文回顾性分析2002年5月至2004年6月间收治的4例妊娠合并急性胰腺炎的临床资料，现报道如下。     

Expression of Cyclooxygenase-2 in Ovarian Cancer Cell Lines

Summary： To investigate the expression of cyclooxygenase-2 （COX-2） in ovarian cancer cell lines, RT-PCR and immunocytochemistry were used to detect the expression of COX-2 in 5 ovarian cancer cell lines. The expression of COX-2 mRNA and protein was detected in all 5 cell lines. It is suggested that COX-2 is expressed in ovarian cancer cell lines, which provides a Basis for the chemoprevention of ovarian cancer.     

血小板源性生长因子对体外培养子宫肌瘤细胞增殖的影响

目的: 研究血小板源性生长因子 (Platete-DerivedGrowthFactor, PDGF) 对体外培养的子宫肌瘤细胞和子宫平滑肌细胞增殖性核抗原 (PCNA) 和细胞内前胶原α1多肽的表达的影响。方法: 用基因重组人PDGF-AB (10ng/ml) 作用体外培养的子宫肌瘤细胞, 以邻近正常子宫肌层细胞作对照, 用RT-PCR法从mRNA水平检测在有无PDGF-AB作用下, PCNA、前胶原α1多肽 (Ⅰ、Ⅲ) 表达的差异; 用免疫组化SABC法从蛋白水平显示PDGF对PCNA表达的影响。结果: 两种细胞受PDGF-AB刺激后, PCNA、collagenα1 (Ⅰ) 表达均有增加, 但两者在肌瘤细胞中表达的增加显著高于子宫平滑肌细胞 (P<0. 01); 而collagenα1 (Ⅲ) 在子宫肌瘤细胞和子宫平滑肌细胞中的变化无显著性差异。结论: PDGF在体外可同时促进子宫肌瘤细胞增殖和细胞外基质分泌的增加, 从而使肌瘤组织不断增长。