系统性红斑狼疮外周血Dicer和Ago2的表达

Dicer和Ago2是RNA干扰(RNAi)中重要的酶,本研究检测常见自身免疫病系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿关节炎(RA)和强直性脊柱炎(AS)患者中Dicer和Ago2的表达水平并分析其与SLE临床特征的相关性。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)检测41例SLE、24例RA、13例AS患者和21例正常人外周血白细胞中Dicer和Ago2的表达水平,并分析其与SLE疾病活动指数(SLEDAI)、SLE肾脏损伤活动指数(renal-SLEDAI)及临床用药之间的相关性。结果显示,Dicer表达水平在SLE、RA和AS患者中较正常对照显著升高(P=0.0051;P<0.0001;P=0.0001),而Ago2表达水平仅在SLE患者中显著升高(P=0.0015)。Dicer表达水平在中度以上活动性SLE患者中较轻度以下活动性患者显著升高(P=0.032),并且与SLEDAI正相关(r=0.4075,P=0.0254),在狼疮肾炎患者中较无狼疮肾炎患者显著升高(P=0.0367),与renal-SLEDAI显著正相关(r=0.4014,P=0.0309),但Ago2表达水平与SLEDAI积分无明显相关性,且在狼疮肾炎患者中也无明显变化,不同量激素治疗组之间Dicer与Ago2均无显著差异。提示,Dicer和Ago2的表达水平在SLE患者中均显著升高且前者与SLEDAI积分、Renal-SLEDAI积分正相关,Dicer升高提示SLE活动及肾脏损害,可能参与SLE的发病。     

Real-time PCR判断前列腺癌盆腔淋巴结微转移的价值

目的 确定实时定量PCR(Real-time PCR)判断新辅助治疗后前列腺癌盆腔淋巴结微转移的价值.方法 对54例临床诊断T2c-T3a的前列腺癌患者行足背淋巴管造影,对无明显淋巴结转移者行3个月新辅助治疗,根治性前列腺切除术前在X线萤光屏监视下,对盆腔可疑癌转移淋巴结行经皮穿刺抽吸淋巴液,用real-time PCR方法检测淋巴液内PSAmRNA和PSMAmRNA的表达,与同法抽取淋巴液的6例女性因膀胱癌行根治性全膀胱切除检测结果作对照,阳性表达示前列腺癌淋巴结转移.同时与术中所取淋巴结组织切片行病理和免疫组化检查结果相比较.结果 术前在可疑癌转移淋巴结抽吸液行Real-time PCR方法检测PSAmRNA和PSMAmRNA的表达中,显示23例淋巴结存在癌转移,而病理切片免疫组化检查中仅有6例淋巴结癌转移.结论 前列腺癌经新辅助治疗后,由于病理检查有时难以发现变性的前列腺癌细胞以致于漏诊,采用Real-tine PCR方法检测淋巴结抽吸液内PSA和PSMA基因表达有利于探测新辅助治疗后前列腺癌淋巴结微转移的存在,为前列腺癌术前临床分期提供可靠的诊断依据.     

γδT细胞、NK细胞及LAK的生物特性比较

目的 通过体外分离,增殖培养获取γδＴ细胞、ＮＫ细胞和ＬＡＫ细胞,并比较３种细胞的抗肿瘤的生物学特性。方法 收集用不同单抗分别被粘附的细胞,通过ＭＡＣＳ细胞分选仪的分选,获取的细胞进行细胞增殖动力学,细胞表型,细胞杀伤活性的测定以及单抗阻断效应的分析。结果 经ＭＡＣＳ分离得到的γδＴ细胞、培养２周后细胞数扩增６００￣８００倍,ＣＤ３,ＣＤ８和γδ细胞表达阳性率分别是７２．２９％,５８．０２％和６５