siRNA沉默Annexin-1基因对膀胱癌T24细胞生物学特性的影响

目的观察RNA干扰技术沉默Annexin-1基因表达对膀胱癌T24细胞增殖能力的影响。方法针对Annexin-1基因不同部位设计并化学合成3对不同的靶向小干扰RNA(siRNA),脂质体介导瞬时转染膀胱癌T24细胞,转染后应用半定量RT-PCR和Western印迹法检测Annexin-1mRNA和蛋白的改变,透射电镜观察细胞凋亡情况,用MTT法检测沉默Annexin-1表达对膀胱癌T24细胞增殖的影响。结果转染siRNA后膀胱癌T24细胞Annexin-1mRNA和蛋白水平显著下降(P0.05),转染siRNA沉默Annexin-1基因表达后膀胱癌T24细胞出现典型凋亡细胞,增殖能力显著下降(P0.05)。结论 RNA干扰Annexin-1基因后其mRNA和蛋白水平显著下降,诱导了膀胱癌T24细胞凋亡,并且抑制细胞的增殖。     

色素上皮衍生因子与肿瘤

色素上皮衍生因子(PEDF)是丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)基因家族的成员,是一种强效的内源性血管生成抑制剂.PEDF在多种肿瘤组织中表达下调或缺失,与预后有很大相关性.PEDF的生物学特性、抗肿瘤活性机制的研究为其在肿瘤的治疗提供了理论基础.     

雷公藤内酯醇缓释微球的制备及体内外释放规律研究

目的:制备雷公藤内酯醇缓释微球,并考察其体内外释放规律。方法:采用液中干燥法制备雷公藤内酯醇缓释微球,以静止法研究其体外释放规律,以大鼠药动学实验研究其体内释药规律。结果:制备的缓释微球外观呈规则的球形,粒径分布均匀((38.2±1.7)μm),包封率为(74.7±3.2)%。雷公藤内酯醇缓释微球在体外恒速释放;在大鼠体内的Cmax为(114.7±31.90)ng.mL-1,tmax为(8.32±4.43)h,AUC为(1774282±1046152)ng.h.mL-1,MRT为(596±165)h;在体内外的相关系数为0.9553(P<0.01)。结论:本制备工艺可行;雷公藤内酯醇有制备成缓释注射微球的可行性。     

用射线照射的B7-1转基因细胞进行肿瘤疫苗的研究

目的探讨用放射的B71转基因细胞进行肿瘤疫苗疗法的效果。方法将重组人B7-1基因真核表达载体导入CAK-1肾细胞瘤细胞,利用转基因细胞治疗观察其抗肿瘤效果。结果转基因细胞的肿瘤原性较CAK-1／Wt、CAK-1／pCDNA3组明显降低（P〈0．001）。同时免疫原性明显增强,以^60Co照射的CAK-1／B7-1细胞免疫后,小鼠体内诱发了抗CAK-1／Wt的系统性、保护性免疫。用^60Co灭活的转基因细胞作为瘤苗进行实验性治疗,能够延长小鼠的生存时间,减慢肿瘤的生长速度,CAK-1／H7-1的应用提高了肿瘤治疗效果（P〈0．01）。结论放射的转基因细胞及其表达的H7细胞因子可以有效地激发机体的抗肿瘤免疫应答,B71表达肿瘤细胞应用可以成为一种很有前景的肿瘤疫苗。     

MIPPO技术结合LCP治疗高龄胫骨远端骨折

目的探讨经皮置入钢板技术治疗高龄胫骨远端骨折的疗效。方法应用经皮置入钢板技术治疗高龄胫骨远端骨折18例,对关节内骨折间接复位或有限切开复位,使关节面解剖复位,再对胫骨远端骨折应用经皮置入钢板技术行间接复位,锁定钢板固定。结果 18例均获随访,随访时间8～21个月,平均12.5个月。骨折均愈合,平均14.5周（11～16周）,完全负重时间平均16.5周。根据Mazur踝关节功能[1]评分,优13例,良4例,可1例,优良率94.4%。结论经皮置入钢板技术结合锁定钢板是治疗高龄胫骨远端骨折的一种安全有效方法。     

培养细胞的显微摄影方法

文章结合实践介绍了培养细胞的显微摄影方法及其常用仪器,为从事细胞培养工作的科技人员提供了技术支持.     

帕金森病炎症/免疫异常细胞模型的建立

目的 观察小胶质细胞激活后形态和功能的变化。以探讨活化的小胶质细胞对多巴胺能神经元产生损伤作用的可能机制。阐明帕金森病发病的免疫机制。方法 建立原代小胶质细胞培养。筛选和鉴定的方法，以细菌细胞壁脂多糖为工具药激活小胶质细胞，通过免疫组化，MTT，ELISA等方法观察小胶质细胞形态，数量和功能的文化。结果 LPS激活的小胶质细胞体积增大，OX-42表达上调，释放一氧化氮（NitricOxide,NO)，合成超氧阴离子（O2）及分泌细胞因子TNF-α量显著增多，而细胞数量无明显改变。结论 激活的小胶质细胞对多巴胺能神经元的损伤作用。可能与释放NO，O2^-及细胞因子TNF-α等细胞毒性物质有关。     

应用于远程医疗的远程家庭监护设备的发展

以美国、英国、加拿大等发达国家远程医疗历史发展为背景，介绍当前国际国内远程家庭监护的发展和现状，提出远程家庭监护设备的理想设计要求和特点，分析目前推广现有远程家庭监护技术的问题所在，在探讨目前处于发展中的远程家庭监护设备市场和卫生领域远程家庭监护设备应用现状后，借鉴并支持医院信息化和远程医学统一发展的观点，并就信息技术的发展前景和生物传感器的发展进一步探讨今后家庭远程监护发展趋势。     

TH和GDNF双转基因工程细胞对多巴胺能神经元的保护作用

目的将人的外源基因TH和GDNF共同转染SH-SY5Y细胞,建立一种可同时高效稳定表达TH和GDNF的工程细胞,探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用。方法将人GDNF和TH的cDNA构建于表达载体PcDNA3.0和PcDNA3.1,形成重组真核表达载体PcDNA3.1/hGDNF、和PcDNA3.0/hTH,同时转染至SH-SY5Y细胞系,利用RT-PCR鉴定筛选出高效稳定表达阳性克隆,将此工程细胞与大鼠原代多巴胺(DA)能神经元共培养,免疫细胞化学检测观察DA能神经元的数目和生长状态。结果成功建立了可同时高效稳定表达人TH和GDNF双基因的工程细胞,并且该细胞可防止DA能神经元退变死亡,有助于DA能神经元抵抗MPP+的毒性损伤。结论人TH和GDNF双转基因工程细胞对DA能神经原有防治兼顾的保护作用。、     

高功率微波对原代培养心肌细胞的影响

目的：观察高功率微波(high Power microwave，HPM)对心肌细胞的影响及细胞内钙高于浓度的变化，探讨HPM对心肌细胞损伤的发生机制。方法：以功率密度950mW／cm^2的HPM辐照心肌细胞后，用荧光染料Fluo—3／AM负载，于激光扫描共聚焦显微镜下观察心肌细胞形态和[Ca^2 ]i的变化；用FITC—膜联蛋白(annexin)V／PI双染色法，于流式细胞仪检测心肌细胞的坏死和凋亡。结果：HPM辐照后，细胞内钙高于浓度明显降低，与对照组相比差异显著(P＜0．01)。心肌细胞发生坏死和凋亡，与对照组相比差异显著(P＜0.01)。结论：HPM辐照可引起心肌细胞[Ca^2 ]i明显降低，提示HPM辐照可引起心肌细胞膜的损伤，从而造成[Ca^2 ]i的大量漏出和细胞的死亡。