GDNF cDNA在神经及非神经细胞系中的表达

目的：研究重组GDNFcDNA在神经及非神经细胞系中的表达。方法：重组克隆，基因转染及RT－PCR。结果：CV1及SH－SY-5Y细胞中无GDNF内源性表达，转基因后出现GDNF表达条带。NG108－15细胞有GDNF的内源性表达，转基因后表达条带增强。结论：重组GDNFcDNA在神经及非神经细胞系中均有较强表达，提示以此制备的工程细胞在Parkinson’s病基因治疗中可能具有重要作用。     

颈部贯通伤远达效应的病理变化及致伤机理探讨

用2.74g和1.03g钢球分别射击10只猪的颈背部,造成软组织贯通伤。位于伤道外的脊髓(10只)、脑(10只)、心脏(9只)和肺(3只)见到出血和肺大泡(1只),其中2.74g组伤情较1.03g组更为严重。2只实验猪分别于伤后3和5min死于严重的脑脊髓震荡伤(脊髓休克)。分析了颈部贯通伤远达效应病变特点:脑脊髓致伤机率增加,脑脊髓出血波及范围广泛,出血病变呈跳跃式分布,预后较差,多见早期死亡。前颅腔内压力峰值可达到1300～1810kPa,其压力值与邻近的颈后部软组织内压力值(1600～1810kPa)接近。认为颈部椎管外贯通伤时,伤道外脑脊髓病变的致伤机理主要是压力波和瞬时空腔作用的结果,但作用途径有差别。     

稳定表达GDNF的MN9D／GDNF工程细胞要明显改善帕金森模型？…

目的：观察稳定表达ＧＤＮＦ的ＭＮ９Ｄ／ＧＤＮＦ工程细胞对６－羟基多巴胺损毁所致帕金森病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ ｄｉｓｅａｓｅ，ＰＤ）模型大鼠旋转行为有无治疗作用。方法：用６－羟基多巴胺损毁大鼠单侧中赤质多巴胺能神经元、２周后腹腔注射阿朴吗啡诱导大鼠出现偏侧旋转行为的方法制备ＰＤ模型大鼠。通过脑立体定位技术，将稳定表达ＧＤＮＦ的ＭＮ９Ｄ／ＧＤＮＦ工程细胞注入模型鼠损毁侧纹状体，１周后观察阿朴吗啡诱导的     

人神经黑色素过度激活小胶质细胞：多巴胺能神经细胞进行性变性的新机制

目的 探讨小胶质细胞在中脑黑质致密带（SNpc）人神经黑色素（HNM）导致多巴胺（DA）能神经细胞变性中的作用和机制。方法 （1）采用HNM处理中脑胶质细胞重组培养体系,检测DA能神经细胞摄取能力,探讨小胶质细胞对HNM损伤作用的影响。（2）采用小胶质细胞培养体系,通过免疫细胞化学染色、检测免疫炎性及神经毒性因子,从功能及形态上研究HNM对小胶质细胞的激活作用。结果 （1）经5.0μg/mL HNM干预后10%、20%和30%小胶质细胞重组培养体系DA能神经细胞摄取能力分别为纯神经细胞培养体系（对照组）的58%、51%和35%,与对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;40%、50%和60%星形胶质细胞重组培养体系中DA能神经细胞摄取能力分别为对照组的97%、92%和93%,与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。（2）经5.0μg/mLHNM干预后中脑神经-胶质细胞混合培养体系中激活的小胶质细胞数为对照组的5.77倍（P〈0.05）,小胶质细胞体积明显增大,形状不规则,呈棒状和/或阿米巴样,胞浆深染。（3）经5.0μg/mLHNM干预后小胶质细胞产生大量的细胞内活性氧类物质、一氧化氮、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和前列腺素E2,与对照组比较差异均具有统计学意义（P〈0.05）。结论 HNM从功能及形态上激活小胶质细胞,促进了DA能神经细胞的进行性变性,为抑制小胶质细胞过度激活成为治疗PD的新靶点提供了一定理论依据。     

双膀胱镜尿道会师术在尿道损伤中的应用

目的探讨双膀胱在尿道损伤中的应用价值及疗效。方法对尿道损伤21例患者采用软性膀胱镜联合硬性膀胱镜腔内尿道会师术。结果 12例球部尿道损伤会师成功;9例后尿道损伤患者5例成功,4例失败。随访1年,2例尿道狭窄,1例有性功能障碍。结论应用双膀胱镜治疗尿道损伤创伤小,疗效好,可作为首选的处置方法 。     

从远程医学概念的转变展望远程医学的发展

远程医学近些年发展迅速,它涵盖的内容也随着通讯科技的进步和INTERNET网络技术在医疗卫生领域的运用而有所变化.现在,世界上该领域的定义正在将重心从远程卫生Telehealth转化到卫生电子化E-health,本文就该概念的转变体现出来的几个不同称谓下的定义、应用领域、支持技术和目标的差异进行探讨,为国内远程医学称谓的定义提出建议.通过分析该转变可能对远程医学领域发展的影响,向国内远程医疗发展和卫生信息化道路做了相应建议.     

反复注射吗啡使大鼠脑内前强啡肽原mRNA和κ受体mRNA表达增强

为探讨急性吗啡耐受的分子机制，本研究观察隐急性吗啡耐受对大鼠脑内与奖赏关核团中前脑啡肽原、前强啡肽原和κ受体基因表达的影响。２４只雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠连续注射６次硫酸吗啡（６．２５ｍｇ／ｋｇ）或等体积生理盐水（１ｍｌ／ｋｇ），每两次注射间期为２ｈ。在最后一次注射后３０ｍｉｎ，断头取检测样品：全脑（除去皮层、小脑和低位脑干）、伏核、尾壳核、黑质。用灵敏的液相杂交ＲＮＡ酶保护分析法检测ｍＲＮＡ水平（ｐ     

颈动脉狭窄外科手术治疗的研究进展

自1953年DeBakey完成第1例颈动脉内膜斑块切除术(carotid endarterectomy,CEA)以来,CEA逐渐成为治疗颅外段颈动脉狭窄的主要手段。欧美多项临床研究已经证实CEA对缺血性脑卒中的预防和治疗均有显著效果。经过多年的发展,现在主要有补片式CEA及外翻式CEA两种术式,且经研究证明两者在安全性、有效性等方面均优于传统CEA。本文就颈动脉狭窄外科手术治疗的发展现状作一综述。     

膀胱癌中基质金属蛋白酶2及CD147表达与意义

目的探讨膀胱癌中基质金属蛋白酶2和CD147表达及其与癌浸润、转移的关系。方法应用免疫组化sp法观察49例膀胱癌组织中MMP-2和CD147的表达,并探讨其与临床病理资料的关系。结果在膀胱癌组中MMP-2和CD147的阳性率分别为76%、68%。在膀胱癌中,MMP-2和CD147的联合表达率为58%,两者的表达与膀胱癌的浸润深度及分化程度相关联;有淋巴结转移的病例阳性表达率明显高于无淋巴结转移组。结论膀胱癌中MMP-2,CD147的表达与肿瘤浸润与转移进展有关,可作为一种反映膀胱癌生物侵袭性的标志物。     

人酪氨酸羟化酶和神经营养因子双转基因工程细胞对原代多巴胺能神经元的保护作用

目的　将人的酪氨酸羟化酶(hTH)和胶质细胞源性神经营养因子(hGDNF)基因共同转染SH SY5Y细胞,筛选可同时高效稳定表达 TH和 GDNF的工程细胞,探讨其在帕金森病(PD)基因治疗中的作用。　方法　将 hTH和 hGDNF cDNA插入表达载体 pcDNA3 .0 和 pcDNA3 .1,构建重组真核表达载体 pcDNA3 1/hGDNF和 pcDNA3 0/hTH,然后转染至 SH SY5Y细胞系,利用RT PCR鉴定和筛选出高效稳定表达阳性克隆。将此工程细胞与大鼠原代多巴胺能神经元共培养,免疫细胞化学检测观察多巴脂能神经元的数目和生长状态。　结果　(1)双转基因工程细胞可防止多巴脂能神经元退变死亡,与对照组比较,神经元数目最多提高了 2 8 倍(P<0 .01);(2)工程细胞可抵抗N 甲基 苯基吡啶(MPP+)对多巴脂能神经元的毒性损伤作用,与对照组比较,细胞数目增加了83 .6%(为7 6倍,P<0. 01)。　结论　首次成功建立了可同时高效稳定表达人 TH和 GDNF双基因的工程细胞,对多巴脂能神经元有防、治兼顾的保护作用。